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一例豬大腸桿菌病的診斷及防治研究

2012-04-13 14:14:46
四川畜牧獸醫 2012年5期

錢 峰

(江蘇省泰興市古溪鎮畜牧獸醫站,江蘇 泰興 225417)

1 豬大腸桿菌病的特征

1.1 病原及臨床癥狀

1.1.1 病原 本屬菌呈革蘭氏染色陰性,無芽孢,一般有數根鞭毛,常無莢膜,兩端鈍圓。從病豬身上分離到的大腸桿菌有溶血性或非溶血性兩類,其O型抗原因不同地域和時期而有變化。多數病原菌株都有菌毛吸著因子并產生腸毒素,已知吸著因子(也稱粘著因子)有K88、K99、987P、F41 4 種,且各具獨特的抗原性。

1.1.2 臨床癥狀 臨床上以排灰白色粥樣稀便為主要特征,發病率高而致死率低。神經癥狀表現為盲目行走或轉圈,共濟失調,口吐白沫,叫聲嘶啞,進而倒地抽搐,四肢呈游泳狀,逐漸發生后軀麻痹,臥地不起,在昏迷狀態中死亡。體溫在病初可能升高,很快降至常溫或偏低。眼瞼或結膜及其他部位水腫,病程在數小時至1~2 d,潛伏期短,一般在24 h左右,長的也僅有1~3d,個別病例到7日齡左右發病。

1.2 病理變化 尸體脫水,表現為皮膚干燥、皺縮,口腔黏膜蒼白。最顯著的病變為腸道有急性卡他性炎癥,其中以十二指腸最為嚴重。全身多處組織水腫,特別是胃壁黏膜水腫是本病的特征。大腸腸系膜水腫,結腸腸系膜膠凍狀水腫亦很常見。此外,大腸壁、全身淋巴結、眼瞼和頭頸部皮下亦有不同程度的水腫。除了水腫病變外,胃底和小腸黏膜、淋巴結等有不同程度的充血。心包、胸腔和腹腔有程度不等的積液。

2 病原分離及鑒定

2.1 試驗材料 大腸桿菌標準O抗原(O1-O163),購自中國獸藥監察所,病料分別來自江蘇泰興市14個鄉鎮,編號為:長生(CS)、古溪(GX)、黃橋(HQ)、泰興(TX)、溪橋(XQ)、河失(HS)、橫垛(HD)、橫巷(HX)、劉陳(LC)、廣陵(GL)、曲霞(QH)、寧界(NJ)、元竹(YZ)、大生(DS)。所有病料均為典型腸炎病死豬的肝、脾、淋巴結和胃壁水腫液;實驗動物購自南京農業大學動物醫學院實驗中心,為60日齡左右的健康小白鼠。

2.2 細菌分離及培養試驗 無菌采取病料接種于麥康凱瓊脂平板上培養24h,挑取紅色中等大小光滑菌落接種于普通肉湯,再劃線于麥康凱瓊脂平板上培養24h,然后挑取單個菌落將其接種于鮮血瓊脂上培養,并觀察是否有溶血現象。分離菌分別接種于普通瓊脂平板、鮮血瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板、巧克力瓊脂平板、伊紅美藍瓊脂平板、普通肉湯培養基,于37℃有氧條件下培養;同時設立另一組于厭氧條件下培養,并觀察其生長表現。

2.3 生化試驗 參照《伯杰氏細菌鑒定手冊》進行鑒定,分別進行了吲哚試驗、M.R試驗、V-P試驗、硫化氫試驗、尿素試驗、葡萄糖、麥芽糖等發酵試驗。

2.4 血清型鑒定及細菌毒素試驗 將待檢菌株接種于營養斜面,37℃培養24h,用生理鹽水制成濃菌液。均參照中國獸藥監察所抗O血清試劑說明書操作。

將純種菌接種于普通肉湯內常溫培養24h,菌液先用比濁法進行計數,然后倍比稀釋。取不同濃度菌液涂布平板培養24h后進行計數,然后將菌液稀釋至18億CFU/mL備用。將備制的菌液用0.22μm濾膜過濾,取無菌液尾靜脈注射小白鼠,0.1mL/只,注射5只;空白對照組5只,注射滅菌肉湯(0.1mL/只),觀察注射后的小白鼠發病及死亡癥狀,對死亡的立即剖檢,并取肝、脾、淋巴結等涂片鏡檢。

2.5 動物致病性試驗 將以上菌液腹腔注射小白鼠,0.2mL/只,對照組腹腔注射普通肉湯0.2mL/只。對注射后的小白鼠進行隔離飼養并觀察其發病及死亡情況,對死亡的立即進行剖檢,并取肝、脾、淋巴結等涂片鏡檢。

2.6 結果

2.6.1 細菌分離及形態 從14個疑似病料樣品中分離到大腸桿菌12株,在血瓊脂上均可見明顯的溶血現象。分離菌為革蘭氏陰性,兩端略圓、中等大小的桿菌,無芽孢單個存在。

2.6.2 生化及培養特性 參照《伯杰氏細菌鑒定手冊》的判定標準,分離菌均符合大腸埃希氏菌的特征;分離菌為兼性厭氧菌,在巧克力瓊脂平板上形成邊緣整齊的白色菌落,在伊紅美藍瓊脂平板上形成黑色帶金色的菌落,在普通肉湯培養基內生長的液體渾濁,管壁有菌環。

2.6.3 血清型鑒定結果 共有6個血清型,其中O139有 3株(LC、TX、XQ),O138有 4株(HQ、HD、GX、YZ),O48有 2株(GL、QX),O8、O54、O141 各有 1株(分別是 LJ、HX、DS)。

一般認為,仔豬大腸桿菌感染通常以出生仔豬的黃痢、哺乳仔豬的白痢以及斷奶前后的水腫病這3種形式出現,而我們分離菌株的病豬所表現的癥狀和剖檢變化也明顯有別于仔豬黃痢、白痢和水腫病,提示該菌株不同于引起豬大腸桿菌病的大腸埃希氏菌的某些血清型,可能另有所屬。對照《中國人獸共患病學》有關資料記載,認定該病原屬出血性大腸桿菌這一群。

2.7 診斷 根據發病情況、臨床癥狀、病理變化及上述病原分離結果,初步認定該病屬出血性大腸桿菌引起的腹瀉病。

2.8 藥敏試驗 取典型菌落均勻涂布于普通瓊脂平板上進行藥敏試驗,結果該菌對氯霉素、丁胺卡那、環丙沙星高敏,對磺胺嘧啶、土霉素中敏,對青霉素、氨芐青霉素、鏈霉素低敏。

2.9 防治

2.9.1 西醫治療 立即將圈舍清洗干凈并用1%百毒殺消毒,停喂飼料半天。每頭豬口腔灌注0.1%高錳酸鉀溶液20mL;每頭豬腹腔注射5%葡萄糖氯化鈉20mL;每頭豬肌注“6542”注射液5mg;板蘭根注射液10mL+維生素B125mL+100萬單位鏈霉素1支,靜脈注射。

2.9.2 中醫療法 中藥組方:焦山楂20g、焦六曲20g、牡蠣 30g、半支蓮 30g、垂盆草 30g、雞骨草 10g、黃芪50g、白芍 30g、熟地 30g、甘草 15g、茵陳 20g、薏苡仁15 g、陳皮20 g,共研細末拌料飼喂,每日一次,連用3 d。效果:當天止瀉,3d后痊愈。

3 小結與討論

3.1 豬大腸桿菌病是危害仔豬生長發育的常見病、多發病,是引起仔豬死亡的主要原因之一。臨床上對該病的治療通常使用抗生素,如:痢菌凈、鏈霉素、慶大霉素、痢特靈、環丙沙星等藥。而常見病原菌耐藥菌的傳播又使很多抗生素在治療該疾病時效果不明顯,常引發人們過量用藥的錯誤治療行為,致使細菌耐藥性增強或出現大量變異菌株,從而加重了病原耐藥菌的傳播,對畜牧業生產造成巨大的影響,且嚴重威脅著人們的身體健康。目前防治此類疾病的藥品往往都是偏重治療且功效單一,雖能解決一些問題,但卻忽視了整體性及相關器官功能的平衡與協調關系,并容易因此掩蓋其他問題甚至是實質性問題,進而導致更嚴重的后果。

3.2 口腔灌注0.1%高錳酸鉀溶液20mL,是為了凈化胃腸環境;停止采食半天,是為了讓腸胃充分休息以及恢復、調整腸胃功能。

3.3 本中藥組方藥理是:焦山楂、焦六曲、薏苡仁、陳皮、雞骨草、甘草有健脾、養胃、助消化等作用,主治食積腹脹、菌痢腹瀉;半支蓮、垂盆草、雞骨草有清熱解毒、涼血消腫等作用,主治急慢性肝炎;黃芪有補氣固表、生肌利尿等作用。

3.4 本中藥組方打破了傳統的以痢治痢的治療方法,通過提高脾胃的運化功能達到燥濕、健脾、保肝、潤腸的功能,對腸黏膜有收斂和吸附作用,從而有效地保護消化道黏膜減少細菌毒素及食物異常發酵產物的侵蝕,使炎癥得以緩解,達到清熱解毒、開胃消積、祛濕健脾、保肝止瀉的目的。充分體現了中醫藥的整體觀念和優勢,使藥效和功能更為全面達到標本兼治,從而拓開了中醫藥辯癥施治的具體內容和應用范圍。

3.5 中藥在我國資源豐富,應用歷史悠久,價格低廉,并具有抗菌、抗病毒、抗毒素、免疫調節和提高生產性能等多方面作用,且毒副作用小,在治療仔豬腹瀉方面,能與抗生素媲美,它一般不受大腸桿菌血清型的影響,不存在耐藥性問題。在畜牧業生產中作為抗生素的替代品,在營養、保健、提高免疫力、抗應激、抗氧化和改善畜產品品質等多方面的應用已越來越受到人們的重視。而傳統的對仔豬進行抓捕注射,不僅勞動強度大,還易對病豬造成各種應激反應;中藥喂服投藥簡便省工、安全實惠,療程短、療效高、保護率高、克服了打針灌藥的困難,易于在生產中推廣。

3.6 仔豬消化道未發育成熟,消化機能不健全、消化腺不發達,體溫調節及應急能力差,再加上飼養管理粗放、圈舍骯臟潮濕導致仔豬消化機能紊亂是引發本病的主要原因。病豬喜舔食糞便污水,致使病原體在整個消化道形成惡性循環,故而必須首先清理胃腸。

3.7“6542”注射液有抑制腺體分泌、解除胃腸平滑肌痙攣的作用,因此運用該藥治療在本案中能起到很好的協同療效。

3.8 長期劇烈的腹瀉使機體體液減少,鈉離子大量喪失,體內電解質失衡,引起機體等滲性脫水,因此必須補水。引起腹瀉的原因很多,有細菌性、病毒性、寄生蟲性等,往往是混合存在相互促進誘發,因此治療時必須有一個綜合全面的措施。

4 結語

本病只要正確診斷,及時做好中西醫結合治療,采取消毒隔離、加強飼養管理等綜合性防治措施,是可以控制的。建議獸醫人員在實際工作中應認真進行病死豬的剖檢,特別是在基層化驗條件有限的情況下,此項工作對任何疾病的診斷尤為重要。

參與文獻:

[1] 錢鋒.仔豬出血性大腸桿菌病的診斷與防治[J].上海畜牧獸醫通訊,2009,(4).

[2] 宋秉生,王興亞.仔豬大腸桿菌性腹瀉[J].甘肅畜牧獸醫,1997,(3).

[3] 李永明.豬大腸桿菌病病原學研究概況[J].貴州農業科學,1990,(4).

[4] 錢鋒.仔豬腹瀉與飼料中維生素、微量元素、礦物質含量的研究[J].畜牧與飼料科學,2009,(4).

[5] 劉純杰,蘇維萍.產腸毒素性大腸桿菌毒力相關質粒研究進展[J].中國預防獸醫學報,1994,(3).

[6]高崧.豬水腫病的研究進展 [J].中國預防獸醫學報,1995,(3).

[7] 錢鋒.規范獸醫市場確保食源健康[J].畜牧獸醫科技信息,2009,(6):13.

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[9] 楊伯華,常劍鑫,黃志琴,等,豬大腸桿菌出血性腸炎的防治[J].畜牧與獸醫,1998,(5).

[10]錢峰.治療仔豬腹瀉病的藥食兩用中藥組合物:中國,200910027894.2[P].2009-5-19.

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