裂解加熱—熒光毛細管法快速測定血液紅細胞內丙酮酸
2012-04-12 00:00:00周朗李喬婧李永生高秀峰
分析化學 2012年11期
摘 要 在常規紅細胞處理方法中，用生理鹽水對紅/白細胞清洗分離會導致細胞內丙酮酸外滲，造成丙酮酸測定值不能反映細胞內丙酮酸的真實濃度。本研究設計了“氯化銨裂解液特異性裂解紅細胞-離心分離白細胞/血小板-加熱去除蛋白-丙酮酸酶熒光毛細管分析”方法。最優化的血樣預處理條件是：以16000 r/min離心血液1 min，獲得紅細胞；裂解液裂解紅細胞后在100 ℃下加熱5 min。對比實驗發現，本方法優于其它紅細胞處理法。本研究中丙酮酸測定方法的線性范圍為10～120 mmol/L； 檢出限為0.98 mmol/L；靈敏度為5.64 F L/mmol，高于文獻方法60倍以上；測定紅細胞內丙酮酸值的相對標準偏差小于2.8% （n=11），回收率在98.3%～104.1%之間。
關鍵詞 酶熒光毛細管分析； 丙酮酸； 紅細胞； 裂解加熱法
