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裂解加熱—熒光毛細管法快速測定血液紅細胞內丙酮酸

2012-04-12 00:00:00周朗李喬婧李永生高秀峰
分析化學 2012年11期

摘 要 在常規紅細胞處理方法中,用生理鹽水對紅/白細胞清洗分離會導致細胞內丙酮酸外滲,造成丙酮酸測定值不能反映細胞內丙酮酸的真實濃度。本研究設計了“氯化銨裂解液特異性裂解紅細胞-離心分離白細胞/血小板-加熱去除蛋白-丙酮酸酶熒光毛細管分析”方法。最優化的血樣預處理條件是:以16000 r/min離心血液1 min,獲得紅細胞;裂解液裂解紅細胞后在100 ℃下加熱5 min。對比實驗發現,本方法優于其它紅細胞處理法。本研究中丙酮酸測定方法的線性范圍為10~120 mmol/L; 檢出限為0.98 mmol/L;靈敏度為5.64 F L/mmol,高于文獻方法60倍以上;測定紅細胞內丙酮酸值的相對標準偏差小于2.8% (n=11),回收率在98.3%~104.1%之間。

關鍵詞 酶熒光毛細管分析; 丙酮酸; 紅細胞; 裂解加熱法

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