阿片對小白鼠組織大分子成分的影響研究進展

李定健

（貴州省畜牧技術推廣站，貴州 貴陽 550001）

阿片是指通過與存在于細胞膜上的阿片受體結合直接產生作用的任何內源性及合成肽類或非肽類物質，并且其作用能被純粹的麻醉拮抗劑如納洛酮特異性地阻斷。鴉片類藥物有兩大類：鴉片類（如鹽酸嗎啡）與合成鎮痛藥（如美沙酮）。內源性阿片是指由大腦和其他器官產生的任何藥理特性類似于阿片物質嗎啡并且是阿片受體的天然配體的物質。大多數內源性阿片為肽類物質。阿片參與機體許多功能的調節，包括痛覺、應激機制、呼吸調節、溫度控制、耐受性形成、生理依賴性、利尿和心血管功能調節以及行為模式。阿片肽影響內分泌系統，調節生長激素、促腎上腺皮質激素、促黃體激素和促卵泡激素等激素的釋放。

筆者首次報道了內源性阿片肽對家畜組織器官生長發育的影響[1]。納洛酮對豬胎兒腎臟重量以及腎臟DNA、RNA和蛋白質合成的影響具有性別差異。納洛酮顯著增加雄性胎兒腎臟重量而對雌性胎兒腎臟重量沒有影響，納洛酮通過刺激細胞增生增加雄性胎兒腎臟重量。納洛酮能夠明顯地改變胎兒發育過程（即納洛酮能夠刺激雄性胎兒腎臟生長）的證據支持了內源性阿片肽及阿片受體可能在細胞增生、遷移和分化中起調節作用的可能性。阿片拮抗劑影響組織大分子成分的主要機理可能是通過阿片受體介導，但是阿片拮抗劑也可能通過與阿片系統部分或整個無關的機理而產生作用。近年來，阿片被認為在控制家畜和其它種類動物生長中起重要作用，但國內有關阿片對小白鼠組織大分子成分的影響研究甚少。

1 阿片對發育期小白鼠組織大分子成分的影響

1.1 阿片對小白鼠胚胎大腦皮層細胞的影響

Reznikov等[2]觀察了阿片對小白鼠胚胎大腦皮層細胞分裂的影響。用μ阿片受體激動劑DAGO或部分選擇性κ阿片受體激動劑布馬佐辛對小白鼠胚胎進行急性處理，增加氚標胸腺嘧啶核苷標記和有絲分裂指數。相反地，δ受體激動劑DSLET降低標記細胞指數和有絲分裂指數。阿片拮抗劑納洛酮具有雙向作用。

1.2 阿片對新生小白鼠組織大分子成分的影響

1.2.1 阿片對神經膠質細胞的影響 發育期間阿片似乎在神經膠質生長中起著重要調節作用[3]。阿片生長因子（OGF）影響培養的小白鼠神經膠質細胞的增生。培養的神經膠質細胞對阿片的不同反應取決于用于準備培養的小白鼠腦的發育年齡。

1.2.2 阿片對星形膠質細胞的影響 內源性阿片或鴉片藥物的濫用傾向于抑制星形膠質細胞的增生并在體外和體內促進成熟前的形態分化[3-4]。內源性阿片肽甲-腦啡肽抑制從1日齡小白鼠大腦半球分離的星形膠質細胞的生長。納洛酮逆轉甲-腦啡肽的作用。嗎啡抑制星形膠質細胞增生的同時顯著引起細胞肥大[4-5]。

1.2.3 阿片對腦和肝細胞的影響 阿片受體激動劑美沙酮是新生小白鼠組織生長的強抑制劑。美沙酮抑制不同組織包括大腦核糖核酸（RNA)和蛋白質的合成[6]。用納洛酮慢性處理新生小白鼠不改變腦RNA的合成，但卻顯著地增加肝臟RNA合成。與納洛酮不同，每日注射納曲酮顯著地降低肝臟RNA的生物合成，而蛋白質合成仍然不受影響。這種相反的影響也許歸因于納曲酮的激動作用。納曲酮以相同劑量隔天處理不減少RNA的生物合成。

2 阿片對成年小白鼠組織大分子成分的影響

2.1 阿片對非免疫細胞的影響

2.1.1 嗎啡的影響 （1）嗎啡慢性處理的影響。與對照組比較，嗎啡腹腔處理成年小白鼠48 d降低大腦和肝臟勻漿胸腺嘧啶核苷摻入脫氧核糖核酸（DNA）以及尿嘧啶核苷摻入RNA。埋植嗎啡丸不改變大腦和肝臟RNA濃度以及整個大腦RNA含量。然而，Swain等[7]則報道連續7 d每日注射嗎啡或哌替啶顯著地增加成年小白鼠腦、肝、腎、睪丸DNA、RNA和蛋白質的含量。納洛酮或部分性受體激動劑鎮痛新慢性處理不改變放射性物質摻入RNA的量。在體內，嗎啡慢性處理不改變小白鼠肝臟或腦細胞核中蛋白質與DNA的比率。

（2）嗎啡急性處理的影響。在體內，嗎啡急性處理抑制腦和肝臟氨基酸合成蛋白質[8]。Stolman和Loh發現在體外嗎啡急性處理穩定小白鼠大腦多核糖體并且不改變它們將氨基酸結合成蛋白質的能力。嗎啡急性處理增加小白鼠大腦髓鞘質-微粒體部分中蛋白質的含量。

2.1.2 腦啡肽的影響[5]腦啡肽抑制成年小白鼠皮膚[9]，舌[10]和食管[11]DNA合成。用納洛酮同時處理阻止DNA合成的降低，納洛酮單獨處理對細胞復制過程沒有影響，提示肽的作用通過受體介導。納曲酮增加DNA合成。這些結果提示一個內源性阿片肽（阿片生長因子）及其受體（ζ）存在于皮膚、舌和胃腸道上皮并且以強直性地抑制、直接和依賴于晝夜節律的方式在細胞更新過程中起作用。

2.2 阿片對免疫細胞的影響

2.2.1 阿片對脾細胞的影響 阿片的慢性使用與免疫抑制密切相關[12]。在缺乏內源性阿片肽β-內啡肽的小白鼠觀察到脾細胞的增生反應增加[13]。將嗎啡加入到體外培養的BALB/c小白鼠脾細胞中抑制有絲分裂素的反應。納洛酮和納曲酮，但不是κ阿片受體拮抗劑nor-BNI，拮抗嗎啡的作用，提示κ阿片受體并未參與體外嗎啡引起的有絲分裂素反應的免疫調節[14]。

2.2.2 阿片對胸腺細胞的影響 低濃度的δ阿片受體激動劑新皮啡肽I抑制胸腺細胞增生，而高濃度的新皮啡肽I促進胸腺細胞增生[15]。兩個δ-2亞型特異性拮抗劑，納曲吲哚和naltriben（NTB）加強胸腺細胞增生，而δ-1亞型特異性拮抗劑BNTX卻不能。此外，嗎啡處理抑制有絲分裂素/細胞因子誘導的胸腺細胞增生[12]。盡管納洛酮能夠部分地拮抗嗎啡引起免疫抑制效應的體內抑制，但它卻不能拮抗嗎啡的體外作用。

2.2.3 阿片對淋巴細胞的影響 關于T-淋巴細胞的活化作用，β-內啡肽刺激[16]和抑制[17]淋巴細胞的增生均有報道。差異的原因雖然還不能下明確結論，但被推測與供體狀況、晝夜變異以及處理時間和處理劑量有關。此外，δ阿片受體配體調節T-細胞增生[18]。外源性腦啡肽影響分裂素刺激淋巴細胞的增生。在大量的其它研究中，納洛酮逆轉體內和體外腦啡肽對各種免疫反應的功能影響。

3 展望

綜上所述，阿片能夠影響小白鼠組織大分子成分，說明內源性阿片肽及阿片受體可能在細胞增生、遷移和分化中起著調節作用。雖然阿片可以導致免疫抑制，但是阿片是否引起非免疫器官功能失常值得進一步研究。此外，阿片是否影響小白鼠組織重量以及阿片對小白鼠組織大分子成分的影響是否具有性別差異仍待闡明。阿片產前和/或產后處理是否影響成年后組織大分子成分的生物合成也有待研究。

[1]Li D J.Effects of naloxone on kidney weight,macromolecular constituents of kidney and cortisol secretion in fetal and neonatal pigs[D].Gottingen:Niedersachsische Staats-und Universitatsbibliothek Gottingen,2007.

[2]Reznikov K,Hauser K F,Nazarevskaja G,et al.Opioids modulate cell division in the germinal zone of the late embryonic neocortex[J].Eur J Neurosci,1999,11（8）:2711-2719.

[3]Knapp P E,Hauser K F.μ-Opioid receptor activation enhances DNA synthesis in immature oligodendrocytes[J].Brain Res,1996,743（1-2）:341-345.

[4]Hauser K F,Stiene-Martin A,Mattson M P,et al.μ-Opioid receptor-induced Ca2+mobilization and astroglial development:morphine inhibits DNA synthesis and stimulates cellular hypertrophy through a Ca2+-dependent mechanism[J].Brain Res,1996,720（1-2）:191-203.

[5]Stiene-Martin A,Hauser K F.Morphine suppresses DNA synthesis in cultured murine astrocytes from cortex,hippocampus and striatum[J].Neurosci Lett,1993,157（1）:1-3.

[6]Hui F W,Krikun E,Smith A A.Inhibition by d,l-methadone of RNA and protein synthesis in neonatal mice:antagonism by naloxone or naltrexone[J].Eur J Pharmacol,1978,49（1）:87-93.

[7]Swain N,Senapati B K,Kar R N,et al.Changes in DNA,RNA and protein contents in different tissues of mice after repeated morphine and pethidine treatment[J].Indian J Exp Biol,1980,18（10）:1188-1189.

[8]Loh H H,Lee N M,Harris R A.Alterations of macromolecule biosynthesis after chronic administration of opiates and ethanol[J].Adv Exp Med Biol,1977,85B:65-86.

[9]Zagon I S,Wu Y,McLaughlin P J.The opioid growth factor,[Met5]-enkephalin,and the ζ（zeta）opioid receptor are present in human and mouse skin and tonically act to inhibit DNA synthesis in the epidermis[J].J Invest Dermatol,1996,106（3）:490-497.

[10]Zagon I S,Wu Y,McLaughlin P J.Opioid growth factor inhibits DNA synthesis in mouse tongue epithelium in a circadian rhythm-dependent manner[J].Am J Physiol,1994,267（3 Pt 2）:R645-652.

[11]Zagon I S,Wu Y,McLaughlin P J.Opioid growth factor is present in human and mouse gastrointestinal tract and inhibits DNA synthesis[J].Am J Physiol,1997,272（4 Pt 2）:R1094-1104.

[12]Roy S,Sedqi M,Ramakrishnan S,et al.Differential effects of opioids on the proliferation of a macrophage cell line,Bac 1.2F5[J].Cell Immunol,1996,169（2）:271-277.

[13]Refojo D,Kovalovsky D,Young J I,et al.Increased splenocyte proliferative response and cytokine production in beta-endorphin-deficient mice[J].J Neuroimmunol,2002,131（1-2）:126-134.

[14]Eisenstein T K,Taub D D,Adler M W,et al.The effect of morphine and DAGO on the proliferative response of murine splenocytes[C].Friedman H.Drugs of Abuse,Immunity and Immunodeficiency.New York:Plenum Press,1991.203.

[15]Linner K M,Quist H E,Sharp B M.Met-enkephalin-containing peptides encoded by proenkephalin A mRNA expressed in activated murine thymocytes inhibit thymocyte proliferation[J].J Immunol,1995,154（10）:5049-5060.

[16]Vanden B P,Rozing J,Nagelkerken L.Two opposing modes of action of beta-endorphin on lymphocyte function[J].Immunology,1991,72（4）:537-543.

[17]Panerai A E,Manfredi B,Granucci F,et al.The beta-endorphin inhibition of mitogen-induced splenocytes proliferation is mediated by central and peripheral paracrine/autocrine effects of the opioid[J].J Neuroimmunol,1995,58（1）:71-76.

[18]Sharp B M,Li M D,Matta S G,et al.Expression of delta opioid receptors and transcripts by splenic T cells[J].Ann N Y Acad Sci,2000,917:764-770.