鹽酸小檗堿結(jié)腸定位微丸的制備＊

賈少輝，張春燕，孫珊珊，王 汀，趙 穎

（濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，山東 日照 276826）

鹽酸小檗堿為《中國藥典》收載的常用抗菌藥物，臨床主要用于治療腸炎，療效顯著。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)其還有抗病毒、抗腫瘤、抗糖尿病等作用[1]。但傳統(tǒng)的鹽酸小檗堿片劑或膠囊口服后，在胃內(nèi)崩解，藥物成分大多數(shù)被胃酸降解；而普通腸溶制劑藥物主要在小腸內(nèi)釋放，大部分藥物經(jīng)小腸吸收入血，且因首過效應(yīng)使藥物代謝失活，會使到達(dá)結(jié)腸段的藥物濃度降低，治療效果不理想。直腸給藥個體差異較大，藥物分布不均勻，僅限于直腸和乙狀結(jié)腸，達(dá)不到橫結(jié)腸和升結(jié)腸，且使用不便[2]。如果采用結(jié)腸靶向給藥，可使藥物集中在結(jié)腸內(nèi)釋放，藥物分布均勻，且結(jié)腸段血流量少，物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)速度緩慢，藥物在結(jié)腸滯留時間較長，有利于臨床治療。為了提高鹽酸小檗堿的生物利用度，有人曾以肉豆蔻酸異丙酯、聚氧乙烯蓖麻油、甘油等制備納米乳[3]，用薄膜蒸發(fā)法制備鹽酸小檗堿脂質(zhì)體[4]。本試驗(yàn)中選用歐巴代為包衣材料，以微丸為載體，采用擠出滾圓法制備鹽酸小檗堿微丸，旋轉(zhuǎn)包衣，紫外分光光度法測定微丸在不同釋放條件下的釋放度，探討微丸制備的最優(yōu)處方，旨在于開發(fā)出鹽酸小檗堿的定位給藥制劑。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

JBZ－300型多功能微丸包衣造粒機(jī)（遼寧醫(yī)聯(lián)新藥技術(shù)研究所）；ZRS－8G型智能溶出試驗(yàn)儀（天津大學(xué)無線電廠）；79HW－1型恒溫磁力攪拌器（江蘇金壇市榮華儀器制造有限公司）。鹽酸小檗堿（四川協(xié)力制藥有限公司，批號為20090405）；微晶纖維素（批號為20090810）、羧甲基淀粉納（批號為20101001）均來自安徽山河藥用輔料有限公司；磷酸二氫鈉（天津市廣成化學(xué)試劑有限公司，批號為20090702）；磷酸氫二鈉（天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠，批號為20100608）；歐巴代（上海卡樂康包衣技術(shù)有限公司，批號為SH542283）。

2 方法與結(jié)果

2.1 制備方法選擇

微丸的制備首先應(yīng)根據(jù)藥物性質(zhì)、臨床用藥的要求和設(shè)備條件等選擇輔料和具體制備方法。通常微丸的制備包括擠出滾圓法、流化床造粒、離心包衣制備、噴霧制備等方法[5]。由于擠出滾圓法是現(xiàn)在較成熟的微丸制備方法，具有操作簡單、快速，適合大規(guī)模生產(chǎn)、一次性成丸合格率高等特點(diǎn)。故本試驗(yàn)選擇擠出滾圓法制備鹽酸小檗堿結(jié)腸控釋微丸。

2.2 微丸制備

將鹽酸小檗堿、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉按處方量混合均勻，加入適量20％乙醇制軟材。制好的軟材經(jīng)過擠出機(jī)的篩孔擠出，擠出的條狀軟材進(jìn)入滾圓機(jī)滾圓，擠出速率為20 r/min，滾圓頻率為8～10hz，滾圓時間為30～45min。滾圓后置60℃烘箱干燥1h，篩選18～20目之間的微丸進(jìn)行包衣。

2.3 包衣液配制

將80％乙醇與水的混合溶劑適量置磁力攪拌器上，開動攪拌器，攪拌溶液使其形成漩渦，同時避免卷入過多的空氣，將歐巴代粉末均勻地加入到漩渦中，避免有粉末漂浮在液體表面，待所有的歐巴代全部加入后，降低攪拌速率，使漩渦消失，繼續(xù)攪拌45min。

2.4 方法學(xué)考察

檢測波長選擇：精密稱取適量鹽酸小檗堿，用pH=7.6的磷酸鹽緩沖液定容，配制成質(zhì)量濃度為60μg/mL的溶液，以pH=7.6緩沖溶液作為空白對照液，按2010年版《中國藥典（二部）》附錄ⅣA中紫外分光光度法規(guī)定，在200～400 nm波長范圍內(nèi)進(jìn)行掃描。結(jié)果表明，鹽酸小檗堿在263 nm波長處有最大吸收。

輔料干擾試驗(yàn)：將所用輔料按處方組成混合后，用pH=7.6的磷酸鹽緩沖液分別配制成相應(yīng)比例的空白輔料溶液，搖勻，0.45μm微孔濾膜過濾，濾液在263 nm波長處掃描。結(jié)果表明輔料在此波長處無吸收干擾。

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：精密稱取鹽酸小檗堿0.97mg，置50mL容量瓶中，用pH=7.6的磷酸鹽緩沖液溶解并定容，搖勻，作為對照品溶液備用。精密量取鹽酸小檗堿對照品溶液1，2，5，10，20mL，置50 mL容量瓶中，加pH=7.6的磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度。以pH=7.6的磷酸鹽緩沖液作為空白溶液，在最大吸收波長263 nm處測定吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo)對質(zhì)量濃度作圖，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程 A=0.08017C－0.125 36，r2=0.9999（n=5）。

2.5 釋放度測定

按2010年版《中國藥典（二部）》附錄ⅩD釋放度測定法第二法規(guī)定的槳法評價包衣微丸的體外釋藥性能。取包衣微丸6份，置溶出杯中，溶出介質(zhì)為 750 mL，轉(zhuǎn)速為 50 r/min，溫度為（37± 0.5）℃。首先以0.1 mol/L鹽酸溶液（人工胃液）為溶劑，轉(zhuǎn)速100 r/min，2h時檢查崩解情況，并立即棄去鹽酸溶液加入pH=7.6（人工腸液）的磷酸鹽緩沖液，繼續(xù)測定；在5，10，20，30，45min時各取溶出液6mL，并及時補(bǔ)充新介質(zhì)6mL。濾過，取濾液2mL，置50 mL容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，照紫外分光光度法，在263nm波長處測定吸光度。結(jié)果見圖1。試驗(yàn)結(jié)果表明，在0.1mol/L鹽酸溶液中攪拌2h后微丸仍保持圓整，微丸在其中的釋放度小于10％，而在pH=7.6緩沖液中45 min累積釋放度（Q）大于90％。體外釋放結(jié)果表明，該微丸具有結(jié)腸控釋的特點(diǎn)。

圖1 微丸在pH=7.6緩沖液中的累積釋放度

3 討論

多次預(yù)試驗(yàn)結(jié)果表明，鹽酸小檗堿與微晶纖維素的比例會影響微丸在緩沖溶液中的崩解與釋放。曾考察了鹽酸小檗堿與微晶纖維素分別為1∶3，1∶5，1∶1，5∶1，2∶1，3∶1時的具體影響。為增強(qiáng)微丸的可塑性與圓整度，在初擬處方中，試圖增加微晶纖維素的比重，但對比不同處方的崩解時間，結(jié)果在鹽酸小檗堿與微晶纖維素比例為2∶1時，崩解時間最短。為改善崩解問題，在處方中又加入了適量羧甲基淀粉鈉，將崩解時限控制在5min之內(nèi)。

為準(zhǔn)確模擬胃腸道環(huán)境，實(shí)現(xiàn)微丸結(jié)腸定位的目的，在體外釋放度試驗(yàn)中，依次測試了3批包衣微丸（批號分別為20110301，20110302，20110303）在0.1mol/L鹽酸溶液以及pH=6.8，pH=7.0，pH=7.2，pH=7.4，pH=7.6的緩沖溶液中的崩解釋放情況。結(jié)果所得微丸在pH=7.6的緩沖液中45 min累積釋放度大于90％；在其他溶液環(huán)境中，微丸經(jīng)一定時間的攪拌后均保持圓整，且累積釋放度小于10％。

口服結(jié)腸定位給藥系統(tǒng)是指用適當(dāng)?shù)姆椒ǎ顾幬锟诜蟊苊庠谖浮⑹改c、空腸和回腸前端釋放藥物，運(yùn)送到回盲腸部后釋放藥物，發(fā)揮局部和全身治療作用的一種給藥系統(tǒng)。普通口服制劑藥物在胃和小腸釋放、吸收，但對結(jié)腸局部疾病由于在到達(dá)結(jié)腸時藥物已經(jīng)被吸收或降解，不能在病灶部位達(dá)到治療所需血藥濃度。采用結(jié)腸定位給藥技術(shù)將激素、抗感染等藥物直接運(yùn)送到回盲腸部位，可大大提高結(jié)腸炎、結(jié)腸癌、結(jié)腸性腸蟲病等結(jié)腸疾病的治療效果。

[1]李 波，朱維良，陳凱先.小檗堿及其衍生物的研究進(jìn)展[J].藥學(xué)學(xué)報，2008，43（8）：773－787.

[2]劉 欣，薛紅梅，王建明，等.鹽酸小檗堿結(jié)腸定位包衣片的制備工藝和體外釋放研究[J].世界科技研究與發(fā)展，2008，30（3）：347－351.

[3]孫紅武，歐陽五慶.鹽酸小檗堿納米乳的制備及其理化性質(zhì)研究[J].中草藥，2007，38（10）：1 476－1 480.

[4]蘇春梅，楊 紅，梁翠茵，等.鹽酸小檗堿脂質(zhì)體制備工藝研究[J].中國藥業(yè)，2009，18（21）：41－42.

[5]陸 彬.藥物新劑型與新技術(shù)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1998：281－282.