銀杏內酯B滴丸制備工藝優化研究＊

王 雷，朱光宇，陳衛東，王 念，吳 勇，汪電雷，汪 寧，張 華(1.安徽中醫學院藥學院藥物代謝動力學研究室，安徽 合肥 230031；2.安徽省中藥制劑工程技術研究中心，安徽 合肥 230022；3.安徽省中藥研究與開發重點實驗室，安徽 合肥 230022； .馬鞍山市中心醫院，安徽 馬鞍山 23000；.馬鞍山市藥品檢驗所，安徽 馬鞍山 23000；.馬鞍山市海克康源生物科技有限公司，安徽 馬鞍山 23000)

銀杏內酯(ginkgolide)是銀杏葉的主要活性成分之一，目前發現其含有6個單體化合物，分別是銀杏內酯A，B，C，M，J以及白果內酯。銀杏內酯B是迄今發現的自然界中最強的血小板活化因子拮抗劑，具有清除氧自由基、抑制脂質過氧化等作用，可用于治療老年性癡呆、阿爾茨海默癥以及提升記憶力等[1]。但銀杏內酯B不溶于水，體內吸收差，生物利用度不高。筆者參考相關文獻并結合前期申請的專利[2]，研制了滴丸劑型，以改善銀杏內酯B的水溶性，提高生物利用度，增加穩定性，減少刺激性，掩蓋不良氣味；與傳統劑型相比，滴丸劑表面積大、溶出速度快、劑量準確、服用方便[3－4]。現將銀杏內酯B滴丸的制備工藝優化研究結果報道如下。

1 儀器與試藥

PL601－S型電子天平，AB135－S型電子分析天平(梅特勒－托利多儀器上海有限公司)；自制滴丸裝置(科大玻璃儀器廠)；CS501型超級恒溫水浴鍋(中華人民共和國重慶設備廠)；ZB－ID智能崩解儀(天津鑫洲科技有限公司)。銀杏內酯B原料藥(成都福潤德實業有限公司)；聚乙二醇4000(PEG 4000)，聚乙二醇6000(PEG 6000)，均為天津市光復精細化工研究所產品；液體石蠟(江蘇強盛化工有限公司)。

2 方法與結果

2.1 滴丸制備

將基質在水浴上加熱熔融，加入藥物，攪拌混勻，保溫下倒入滴丸機中，保溫至藥液溫度達到要求為止，以適宜的滴速滴入互不相溶的冷卻劑中，冷卻固化成丸，取出擦干，即得。

2.2 單因素考察

基質：參考文獻和相關專利，根據銀杏內酯B的理化性質以及預試驗結果，可知聚乙二醇的成型性較好，PEG 4000和PEG 6000均具有良好的分散力和較大的凝聚力，所制得的滴丸硬度、流動性和耐熱性均較好。

藥物與基質配比：將銀杏內酯B與基質按不同的比例混合，制備滴丸。藥物與基質比例過大時，稠度偏大，不易滴制；藥物與基質比例過小時，患者服用量過多，依從性差，也不經濟。通過參考文獻和相關專利，結合大量預試驗，最終確定藥物與基質比例為1∶1.5～1∶4。

冷卻液：制備滴丸時，熔融的液滴成形、凝固于不相溶的冷卻液中，因此冷卻液對滴丸的質量影響很大。常用冷卻液有二甲基硅油、液體石蠟、植物油、水溶液、茶油和乙醇溶液等。預試驗發現，液體石蠟制備的滴丸不易粘連、成型性較好，因此選用液體石蠟。

滴距：滴距主要影響滴丸的圓整度[5]。滴距過小，滴液來不及收縮，丸型不圓整；滴距過大，液滴容易成扁形或跌散而產生細粒。因此兩者的滴距不宜超過5 cm。通過大量預試驗發現，滴距為2.5 cm可滿足要求。

2.3 質量評價指標確定

滴丸的質量考核項目包括客觀定量標準(如溶散時間、丸重差異等)和外觀質量指標(如圓整度、硬度、色澤均一等)。但上述指標帶有一定的主觀隨意性，為減少誤差，將各具體考核指標由差至優，分別記為1～5分，將各“主觀指標”加和后，作為滴丸的“外觀質量”與“溶散時間”“丸重差異”等客觀指標綜合評分，共同評價滴丸的質量。其中外觀質量評價指標包括以下幾個。硬度：由軟至硬分為1～5級(手按，由多人獨自評分，取平均值)；圓整度：從不圓到圓分為1～5級，用滴丸最短徑/最長徑來表示，比值在0.95以上為5分，0.9～0.95之間為4分，0.85～0.9之間為3分，0.8～0.85之間為2分，0.8以下為1分；拖尾情況：由差到好計分為1～5分；粘連情況：由差到好計分為1～5分。

2.4 工藝優化正交試驗

通過預試驗和參閱相關文獻[2，6]，選擇基質的種類及配比(因素A)、料溫(因素B)、冷卻液溫度(因素C)、藥物與基質比例(因素D)4個因素，取3個水平，采用L9(34)正交試驗設計，對影響滴丸的成型因素進行考察，優選最佳成型工藝。結果見表1至表3。

表1 成型工藝優化因素水平表

可見，影響滴丸外觀指標的因素由大到小為B＞C＞A＞D，優化條件為A1B1C2D3，即基質為PEG 4000，藥液溫度為80℃，冷卻液溫度為10℃，藥物∶基質=1∶4；影響滴丸丸重差異(越小越好)的因素由大到小為C＞D＞B＞A，優化條件為A3B3C3D1，即基質為PEG 4000∶PEG 6000=1∶1，料液溫度為85℃，冷卻液溫度為15℃，藥物∶基質=1∶2；影響滴丸崩解時限(越小越好)的因素由大到小為D＞C＞A＞B，優化條件為A3B1C2D2，即基質為PEG 4 000∶PEG 6000=1∶1，料液溫度80℃，冷卻液溫度10℃，藥物∶基質=1∶3。綜合考慮，因素A對丸重差異和崩解時限的影響均較小(為第3或第4影響因子)，結合實際及試驗選擇PEG 4 000∶PEG 6 000=1∶1作為優化條件；因素B為外觀指標的主要影響因素，因素B選80℃；因素C為影響丸重差異的主要因素，是外觀指標和崩解時限的第2影響因素，故因素C選15℃；因素D是崩解時限的主要影響因素，是外觀指標和丸重差異的次要因素，故因素D選藥物∶基質=1∶3。優化后的條件為A3B1C3D2，即基質為PEG 4000∶PEG 6000=1∶1，料液溫度為80℃，冷卻液溫度為15℃，藥物∶基質=1∶3。

表2 正交試驗設計與結果

表3 方差分析結果

2.5 質量控制

外觀質量：所制滴丸為白色球形固體，圓整飽滿，成型性好，色澤均勻，硬度較好，無拖尾、粘連現象。

重量差異：取供試品20丸，稱定總質量，求得平均丸重，再精密稱定每粒丸重。根據2010年版《中國藥典(二部)》規定，超出重量差異限度的不得多于2丸，并不得有1丸超出限度1倍。滴丸劑重量差異限度見表4，本次試驗中銀杏內酯B滴丸的重量差異見表5。可見，每粒滴丸的丸重在0.03g與0.1g之間，重量差異限度均符合藥典規定。

表4 質量差異限度標準

崩解時限：參照2010年版《中國藥典(二部)》，崩解時限檢查方法為，將吊籃通過上端的不銹鋼軸懸掛于金屬支架上，不銹鋼絲網的篩孔內徑應為0.425mm；浸入1 000mL燒杯中，并調節吊籃位置使其下降時篩網距燒杯底部25mm，燒杯內盛有溫度為(37±1)℃的水，調節水位高度使吊籃上升時篩網在水面下15mm處；升降的金屬支架上下移動距離為(55±2)mm，往返頻率為30～32次/min。除另有規定外，取供試品6粒，依法檢查，應在30 min內全部溶散，包衣滴丸應在1 h內全部溶散。如有1粒不能全部溶散，應另取6粒復試，均應符合規定。6批銀杏內酯B滴丸的崩解時限分別為5.2，8.9，7.4，10.8，13.0，6.6min，均在規定的范圍內(＜30min)，所制滴丸符合要求。

2.6 最佳工藝驗證試驗

取適量銀杏內酯B的原料藥，按照優化后的條件，即基質為PEG 4 000∶PEG 6 000=1∶1，料液溫度為80℃，冷卻液溫度為15℃，藥物∶基質=1∶3，制備滴丸。隨機抽取樣本進行考核，結果丸重差異變異系數為1.87%，平均崩解時限為4.5min，所制滴丸外觀質量好、丸形圓整、色澤均一、硬度較好，證明該工藝條件穩定可行。

表5 銀杏內酯B滴丸的質量限度表

3 討論

本試驗確立了滴丸成型的最佳工藝，并從影響滴丸的外觀指標、丸重和崩解時限3個方面考察了各因素的影響，確立了銀杏內酯B滴丸的最佳條件，按該工藝條件制成的滴丸符合2010年版《中國藥典》的規定。

試驗中發現，藥物在加入基質前應使基質充分融化，然后再加入藥物，攪拌混勻，可保證成品顏色均勻、光滑，藥物與基質均一。此外，冷卻液的溫度對滴丸的成型性有很大的影響，溫度太低會導致成型的丸粒不圓整，溫度高了會使丸粒凝固不完全，最終擠壓在一起，出現扁平的現象；冷凝管的長度同樣會影響滴丸的外觀，冷凝管太短，丸粒冷凝不完全便會凝結在一起，或者出現扁平的現象。

與膠囊劑相比，滴丸制備工藝簡單，生產周期較短，能夠提高藥物生物利用度。銀杏內酯B屬于難溶性藥物，而滴丸的制備方法是固體分散制備中的熔融法，藥物在基質中以微細狀態存在，有利于藥物的溶出和吸收，提高其生物利用度。

[1]Giovanni D’Andrea，Gennaro Bussone，Gianni Allais，at al.Efficacy ofginkgolide B in the prophylaxis of migraine with aura [J].Neurol Sci，2009，30：121－124.

[2]陳衛東，劉曉東，謝 林，等.銀杏內酯B滴丸及其制備方法：中國，ZL 200510134353.1[P].2009－05－27.

[3]胡向青，杜 青.滴丸劑的研究進展[J].藥學進展，2004，28(12)：537.

[4]鄭 鑫，邱曉莉，秦少容，等.中藥滴丸劑的研究進展[J].中國中藥雜志，2003，28(4)：292.

[5]王秋玲，楊信定.中藥滴丸劑的研究進展[J].微量元素與健康研究，2006，23(5)：56－58.

[6]紹勝榮，孫 俊，吳 明.正交試驗法優選銀杏內酯滴丸成型工藝研究[J].中國中醫藥信息雜志，2007，14(7)：54－55.