鹽酸曲美他嗪片溶出度測定方法的建立

杜松，周君龍，劉美鳳#，葉健文（.廣州漢方現(xiàn)代中藥研究開發(fā)有限公司，廣州5040；.華南理工大學(xué)化學(xué)與化工學(xué)院制藥工程系，廣州 50640）

鹽酸曲美他嗪是上世紀60年代開發(fā)的一種改善心肌缺血的藥物，早期制劑規(guī)格為每片3 mg，服用劑量為每天6～12 mg。國內(nèi)也有藥廠仿制該規(guī)格產(chǎn)品，稱為曲美他嗪片或三甲氧芐嗪片，均被收入地標升國標的部頒標準中[1，2]，目前國內(nèi)僅有1家生產(chǎn)。每片3 mg規(guī)格的曲美他嗪片目前在日本仍被沿用，且已被載入《日本藥典》[3]。施維雅公司之后推出了每片20 mg的規(guī)格，國內(nèi)也有多家仿制，因此目前市售曲美他嗪片也基本都為每片20 mg這種規(guī)格。

溶出度是評價口服固體制劑質(zhì)量的重要指標[4]。每片3 mg規(guī)格的曲美他嗪片的早期部頒標準中沒有溶出度測定項目。該規(guī)格制劑的《日本藥典》標準中是以900 mL水為溶出介質(zhì)，槳法，50 r·min－1，采用高效液相色譜法測定溶出度，溶出度限度為45 min溶出80%以上。而目前市售主流20 mg規(guī)格的片劑尚沒有公開的國家藥品標準。石海英等[5]曾對該規(guī)格制劑溶出測定方法開展研究，建立了以500 mL水為溶出介質(zhì)，籃法，轉(zhuǎn)速為75 r·min－1，紫外吸收系數(shù)法折算含量的溶出度測定方法。但籃法測定裝置多用于測定膠囊溶出，較少用于片劑的溶出度測定。另外，將溶出液以稀硫酸稀釋后進行紫外測定，再通過吸光系數(shù)折算含量的做法也較麻煩。筆者對20 mg鹽酸曲美他嗪片溶出度測定進行進一步研究，期望建立一種更方便、準確的測定方法。

1 儀器與試藥

ZRS-8G智能溶出儀（天大天發(fā)科技有限公司）；紫外分光光度計（美國熱電公司）；BS210S電子天平（德國賽多利斯公司）。

鹽酸曲美他嗪對照品（批號:20100612，純度:99.8%）、鹽酸曲美他嗪試驗片3批（規(guī)格:20 mg∶80 mg）均由廣州漢方現(xiàn)代中藥研究開發(fā)有限公司提供；市售鹽酸曲美他嗪片（商品名萬爽力，施維雅（天津）制藥有限公司，批號:20100915、20100916、20100919，規(guī)格:20 mg∶90 mg）；鹽酸、磷酸二氫鉀、氫氧化鈉等均為市售分析純；水為脫氣純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 含量測定方法

2.1.1 溶出介質(zhì)制備:介質(zhì)1為純化水（經(jīng)脫氣處理）；介質(zhì)2為0.1 mol·L－1鹽酸溶液（pH1.0），即9 mL鹽酸，以純化水稀釋至1 000 mL即得；介質(zhì)3為磷酸鹽緩沖液（pH6.8），即取0.2 mol·L－1磷酸二氫鉀溶液250 mL，加0.2 mol·L－1氫氧化鈉溶液118 mL，用純化水稀釋至1 000 mL，即得。

2.1.2 對照品溶液制備:精密稱取鹽酸曲美他嗪對照品27.78 mg，分別置于3個100 mL量瓶中，各加入適量介質(zhì)1、介質(zhì)2和介質(zhì)3，溶解稀釋并定容至刻度，作為鹽酸曲美他嗪對照品貯備液。分別精密吸取此貯備液2 mL，置于25 mL量瓶中，再用各介質(zhì)稀釋并定容至刻度，搖勻，即得。

2.1.3 輔料溶液制備:按鹽酸曲美他嗪處方稱取各輔料適量，按照“2.1.2”項下方法操作，以3種溶出介質(zhì)為溶劑制備輔料溶液，備用。

2.1.4 檢測波長的選擇:分別取“2.1.2”項下的鹽酸曲美他嗪各對照品溶液和“2.1.3”項下的輔料溶液，于200～400 nm波長范圍內(nèi)進行掃描。結(jié)果，對照品在203、232 nm波長處均有最大吸收，但是因為203 nm為末端吸收，且輔料有干擾，而輔料在232 nm波長處沒有吸收，不干擾測定，由此確定檢測波長為232 nm。紫外吸收光譜詳見圖1。

圖1 不同介質(zhì)中的紫外光譜圖Fig 1 UV spectrum of different media

2.1.5 標準曲線的制備:精密稱取鹽酸曲美他嗪對照品50 mg分別置于50 mL量瓶中，分別以介質(zhì)1、介質(zhì)2和介質(zhì)3稀釋并定容至刻度，從中分別精密吸取7.5 mL置于25 mL量瓶中，以上述3種介質(zhì)稀釋并定容，得到濃度為0.3 mg·mL－1的鹽酸曲美他嗪貯備液，分別量取各自貯備液1.5、2.5、3.0、4.0、4.5、5 mL置于50 mL量瓶中，以上述3種介質(zhì)定容至刻度，制得濃度分別為9、15、18、21、24、27、30 μg·mL－1的鹽酸曲美他嗪對照品溶液，以各自溶出介質(zhì)作空白，按照分光光度法在232 nm波長下測量其吸光度（A），將其與濃度（c）進行線性回歸，得標準曲線方程分別為:A水＝2.26×10－2c－7.6×10－3（r＝0.999 6，n＝7）；A鹽酸＝2.45×10－2c+8.42×10－3（r＝0.999 8，n＝7）；A磷酸鹽＝2.32×10－2c+4.25×10－3（r＝0.999 8，n＝7）。可見，鹽酸曲美他嗪檢測濃度線性范圍為9～30 μg·mL－1。

2.1.6 穩(wěn)定性試驗:取“2.2”項下供試品溶液，室溫下放置，分別于0、1、2、3、4、5 h測定吸光度，結(jié)果吸光度值無明顯變化，RSD水＝0.36%（n＝6），RSD鹽酸＝0.56%（n＝6），RSD磷酸鹽＝0.40%（n＝6），表明供試品溶液在5 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.1.7 精密度試驗:取同一對照品溶液5份，分別測定吸光度值，結(jié)果，RSD水＝0.31%，RSD鹽酸＝0.26%，RSD磷酸鹽＝0.22%。表明該方法的精密度能夠滿足測量要求。

2.1.8 方法回收率試驗:分別精密稱取鹽酸曲美他嗪對照品約16、20、24 mg，置于100 mL量瓶中，加入處方比例的輔料，用3種溶出介質(zhì)溶解并定容，濾過，精密吸取濾液2 mL置于25 mL量瓶中，再分別用溶出介質(zhì)定容，于232 nm波長處測定（每種濃度樣品3份，每份測定5次），計算回收率，結(jié)果見表1。

2.2 溶出度試驗

2.2.1 介質(zhì)選擇:取鹽酸曲美他嗪試驗片和市售片各6片，按《中國藥典》2010年版附錄ⅤC溶出度測定方法中槳法[6]進行測定，轉(zhuǎn)速為50 r·min－1，分別以介質(zhì)1、介質(zhì)2、介質(zhì)3為溶出介質(zhì)。分別于5、10、15、30 min取樣10 mL（同時補充同體積、同溫度的相應(yīng)介質(zhì)），經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過，濾液即為供試品溶液。于232 nm波長處檢測吸光度，與對照品溶液吸光度進行對比，計算累積溶出度，繪制溶出曲線，結(jié)果如圖2所示。

表1 回收率試驗結(jié)果（n＝5）Tab 1 Results of recovery test（n＝5）

圖2 2種片劑在3種介質(zhì)中的體外溶出曲線Fig 2 Dissolution curves of 2 tablets in 3 kinds of media

由圖2可知，試驗片與市售片在各介質(zhì)中溶出迅速，15 min時溶出均已達到85%以上。這與鹽酸曲美他嗪藥物水溶性強、在上述3種介質(zhì)中的溶解度均超過1 g·mL－1有關(guān)。綜合來看，片劑在水中溶出相對較慢，并且不同片之間溶出差異較顯著，故選擇水作為溶出介質(zhì)，有利于控制產(chǎn)品質(zhì)量。

2.2.2 轉(zhuǎn)速選擇:以水作為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速分別設(shè)為50、75、100 r·min－1，照“2.2.1”項下方法，于15 min取樣測定吸光度，同時計算累積溶出度。結(jié)果表明，在3種轉(zhuǎn)速條件下，鹽酸曲美他嗪片累積溶出度均大于85%，且片劑溶出度均一性均良好，因此選擇轉(zhuǎn)速為50 r·min－1。

2.2.3 溶出時間:由圖2可知，鹽酸曲美他嗪試驗片在15 min時累積溶出度均已85%以上，且15、30 min時2個點溶出度差異小于5%，故而確定最終溶出度取樣時間為30 min，溶出限度設(shè)定為30 min內(nèi)溶出80%以上。

2.2.4 樣品溶出度測定:以水為介質(zhì)，按“2.2.1”項下方法，對3批鹽酸曲美他嗪試驗片進行溶出度測定，計算各點的累積溶出度，結(jié)果見表2。

由表2可知，鹽酸曲美他嗪試驗片于30 min時溶出度分別為（100.07±1.8）%、（100.02±2.1）%、（100.78±2.0）%，均在80%以上，符合要求。

表2 3批試驗片累積溶出度結(jié)果（%，±s，n＝6）Tab 2 Accumulative dissolution rates of 3 batches of sample（s%，±s，n＝6）

表2 3批試驗片累積溶出度結(jié)果（%，±s，n＝6）Tab 2 Accumulative dissolution rates of 3 batches of sample（s%，±s，n＝6）

取樣時間/min 批號5 10 15 30 20100915 56.26±3.8 93.65±3.4 100.35±2.5 100.07±1.8 20100916 54.05±4.2 90.38±3.6 100.11±2.1100.02±2.120100919 61.49±3.2 96.28±2.4 101.36±1.9 100.78±2.0

3 討論

片劑溶出度測定最常用槳法。本試驗采用的溶出介質(zhì)體積為900 mL，得到的溶出溶液可以直接過濾測定，無需稀釋，較文獻[5]更為簡單；且本試驗的溶出度計算直接與對照品溶液的紫外吸光度進行對比，比文獻[5]中將溶出液用稀硫酸稀釋測定紫外吸收值，再由吸光系數(shù)折算含量計算溶出度更方便。鹽酸美他嗪具有特征的紫外吸收，本文含量測定時采用紫外分光光度計法，較《日本藥典》[3]中采用液相色譜法更為方便快捷。最終建立了槳法、轉(zhuǎn)速為50 r·min－1、900 mL水作為溶出介質(zhì)、溫度（37±0.5）℃、紫外分光光度法測定并與對照品溶液的紫外吸光度進行對比計算溶出度的測定方法，溶出限度確定為30 min時溶出80%以上。

《日本藥典》中曲美他嗪片溶出度限度為45 min溶出80%以上，這是根據(jù)日本的制劑處方中藥物溶出較慢，30 min左右才完全溶出的情況[7]制定的。而本試驗中試驗片和市售片在15 min已經(jīng)溶出完全，故而設(shè)定溶出度限度在30 min溶出80%以上。另一方面，由于制劑溶出迅速，也可以考慮以崩解度來評價藥品質(zhì)量。

[1]國家藥典委員會.化學(xué)藥品地方標準上升國家標準（第十三冊）[S].2002:179.

[2]國家藥典委員會.化學(xué)藥品地方標準上升國家標準（第十五冊）[S].2003:83.

[3]Japanese Pharmacopoeia Editorial Committee.Trimetazidine Hydrochloride Tablets.Japanese Pharmacopoeia（15th Edition）[S].Tokyo :The Society of Japanese Pharmacopoeia，2006:1 207-1 208.

[4]朱含涌，韋龍靜，丁 泉，等.藥物藥劑學(xué)評價因素研究[J].中國藥房，2008，19（26）:2 077.

[5]石海英，侯筱筠，李振志，等.鹽酸曲美他嗪片溶出方法的研究[J].齊魯藥事，2006，12（25）:736.

[6]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）[S].2010年版.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:附錄ⅤC.

[7]日本厚生省醫(yī)藥安全局編.國家食品藥品監(jiān)督管理局藥審中心譯.日本厚生省藥品體外溶出試驗信息庫[DB/OL].http://www.cde.org.cn/recommend.do?method=view ＆ id=65.2011-01.2011-02-24.