飼料中不同脂肪源對鯉魚生長性能、脂質代謝和抗氧化能力的影響

潘 瑜 毛述宏 關 勇 林 鑫 林仕梅，2＊ 高啟平 羅 莉，2

（1.西南大學動物科技學院，重慶400716；2.西南大學淡水魚類資源與生殖發育教育部重點實驗室，重慶400716；3.通威股份水產研究所，成都 610041）

我國水產養殖業高效、持續發展需要高能低氮的飼料策略，而飼料中的脂肪是魚類主要的能量來源。選擇恰當的脂肪源和脂肪水平，能節約蛋白質，降低飼料成本，減少環境污染［1］。魚油作為水產飼料的優質脂肪源一直備受青睞，但目前因其資源、價格以及含有二口惡英和多氯聯苯類不安全物質等問題，迫使飼料企業去尋找魚油替代品［2］。已有的研究表明，在滿足魚體必需脂肪酸需求的前提下，其他油脂替代魚油不僅不會對魚體生長產生負面影響［3］，而且適宜的替代還會有更好的促生長效果［4］，但是不同脂肪源會對魚類脂質代謝和抗氧化能力產生不同的影響［5－7］。鯉魚（Cyprinus carpio）是我國主要的經濟魚類，Schwarz等［8］和Steffens等［9］相繼報道了不同單一脂肪源對鯉魚生長和體組成的影響，但均未涉及脂質代謝和抗氧化能力方面的研究。結合本課題組近年來有關脂質代謝調控和機制方面的研究，本試驗以鯉魚為研究對象，通過測定其生長性能、體組成、脂質代謝和抗氧化能力等指標綜合評價魚油、豆油、菜籽油、亞麻籽油和豬油這5種脂肪源的營養效價，為油脂的科學使用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料

首先以秘魯紅魚粉（粗蛋白質含量64.5%）、豆粕（粗蛋白質含量43.0%，預壓浸提）、菜籽粕（粗蛋白質含量37.0%，預壓浸提）和棉籽粕（粗蛋白質含量43.0%，預壓浸提）作為蛋白質源配制基礎飼料，然后在基礎飼料中分別添加1.5%的魚油、豆油、菜籽油、亞麻籽油和豬油，制成5種等能等氮（粗蛋白質含量35%，總能15MJ／kg）的試驗飼料，其組成及營養水平見表1。各飼料原料均粉碎過40目篩并混合均勻，飼料調質溫度為80℃，制成直徑為1.5mm的硬顆粒飼料，60℃烘干后保存于－15℃冰柜中備用。

表1 試驗飼料組成及營養水平（風干基礎）Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets（air－dry basis） %

1.2 飼養管理

試驗魚選用當年培育的鯉魚苗，取自重慶璧山縣魚種場。試驗魚馴食適應環境10d后，選取體質健壯、規格整齊、平均初重為（5.83±0.01）g的鯉魚750尾，隨機分成5組，每組3個重復，每個重復50尾魚。試驗魚飼養在室內淡水循環玻璃水族箱（有效體積為300L）中，養殖水源為曝氣自來水，養殖全程水溫為（26.8±2.2）℃，pH 為7.2±0.3，溶 解 氧 為 ＞6.2mg／L，氨 氮 ＜0.50mg／L，亞硝酸鹽氮＜0.06mg／L。日投喂率為體重的4%～6%，每天08：30、12：30和17：30各投喂1次，每天早上清除箱內糞便，并換水1／4。飼養時間為8周。

1.3 樣品制備與分析

飼養試驗結束，禁食24h后稱重，每箱取5尾魚作為全魚樣品；每箱另取5尾魚采用搗毀脊髓法處死，分離出肝胰臟，并立即放入液氮罐中速凍，然后轉入－80℃低溫冰箱保存。肝胰臟用生理鹽水以1∶9的質量體積比冰浴勻漿，勻漿液在3 000×g 4℃條件下離心10min，取上清液作為酶活性分析樣品，－20℃保存備用。

飼料原料及魚體樣品均在105℃烘干至恒重，然后進行營養成分測定。粗蛋白質含量采用凱氏定氮法測定，粗脂肪含量采用索氏抽提法測定，粗灰分含量采用高溫（550℃）灰化法測定。

血清脂蛋白酯酶（LPL）、蘋果酸脫氫酶（MDH）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和總抗氧化能力（T－AOC）采用南京建成生物工程研究所生產的試劑盒進行測定。SOD的活性單位定義：每毫克組織蛋白質在1mL反應液中SOD抑制率達50%時所反應的SOD量為1個酶活性單位；TAOC單位定義：在37℃時，每分鐘每毫克組織蛋白質使反應體系的吸光度（OD）值增加0.01時為1個T－AOC單位；MDH的活性單位定義：每毫克組織蛋白質在本反應系統中1min內催化1μmol的底物轉變成產物為1個酶活性單位；LPL的活性單位定義：每毫克組織蛋白質每小時在反應系統中產生1μmol的游離脂肪酸（FFA）時為1個酶活性單位。組織中蛋白質含量采用考馬斯亮藍法測定。

1.4 計算公式

1.5 數據處理與分析

數據均以平均值±標準誤表示，采用SPSS 11.0對所得數據進行單因素方差分析（one－way ANOVA），若差異達到顯著水平，則采用Duncan氏法進行多重比較，顯著性水平為P＜0.05。

2 結果與分析

2.1 飼料中不同脂肪源對鯉魚生長性能的影響

由表2可知，SGR、PER均以魚油組最高，豬油組最低，其中SGR魚油組顯著高于其他各組，豬油組顯著低于除豆油組外的其他各組（P＜0.05）；PER豬油組顯著低于其他各組（P＜0.05），魚油組與豆油組、菜籽油組、亞麻籽油組間無顯著差異（P＞0.05）。FCR以豬油組最高，魚油組最低，且魚油組顯著高于其他各組（P＜0.05），豬油組顯著低于其他各組（P＜0.05）。SGR、PER和FCR在豆油組、菜籽油組、亞麻籽油組間無顯著差異（P＞0.05）。

表2 不同脂肪源對鯉魚生長性能的影響Table 2 Effects of different lipid sources on growth performance of common carp

2.2 飼料中不同脂肪源對鯉魚體組成的影響

由表3可知，全魚粗蛋白質含量魚油組顯著高于其他各組（P＜0.05），而其他各組間無顯著差異（P＞0.05）；全魚粗脂肪含量以魚油組最低，豬油組最高，其中魚油組顯著高于除亞麻籽油組外的其他各組（P＜0.05），豬油組顯著低于魚油組和亞麻籽油組（P＜0.05），豆油組、菜籽油組、亞麻籽油組間無顯著差異（P＞0.05）；全魚干物質和粗灰分含量組間無顯著差異（P＞0.05）。

表3 不同脂肪源對鯉魚體組成的影響Table 3 Effects of different lipid sources on body composition of common carp %

2.3 飼料中不同脂肪源對鯉魚肝胰臟脂質代謝和抗氧化指標的影響

由表4可知，LPL活性以魚油組最高，其次是豆油組、菜籽油組、亞麻籽油組，以豬油組最低，除菜籽油組與亞麻籽油組間差異不顯著（P＞0.05）外，其他組間差異均顯著（P＜0.05）。MDH活性以亞麻籽油組最高，顯著高于其他各組（P＜0.05）；以豬油組最低，顯著低于其他各組（P＜0.05）。SOD活性豬油組顯著低于其他各組（P＜0.05），而其他各組間差異不顯著（P＞0.05）。TAOC表現為魚油組＞豆油組＞菜籽油組＞亞麻籽油組＞豬油組，除菜籽油組與豆油組、亞麻籽油組差異顯著不顯著（P＞0.05）外，其余組間差異顯著（P＜0.05）。

表4 不同脂肪源對鯉魚肝胰臟脂質代謝和抗氧化指標的影響Table 4 Effects of different lipid sources on indices of lipid metabolism and antioxidant in hepatopancreas of common carp

3 討 論

3.1 不同脂肪源對鯉魚生長性能的影響

本試驗結果顯示，魚油、豆油、菜籽油、亞麻籽油和豬油作為單一脂肪源，對鯉魚的生長性能可產生不同的影響，以魚油促生長效果最好，而豬油不利于魚體的生長。類似的研究結果在草魚［10］、羅非魚［5］和異育 銀鯽［11］上已有 報道。然 而，Steffens等［9］卻發現在高魚粉（26%）飼料中添加魚油、玉米油、葵花籽油、菜籽油作為單一脂肪源對鯉魚的生長沒有影響，與本試驗結果存在差異，這可能是飼料配方差異所致。與Steffens等［9］的試驗相比，本試驗基礎飼料中魚粉的用量僅為9%，可能是高魚粉飼料中含有足夠的高不飽和脂肪酸（HUFA）可以滿足魚體正常生長的需求。

脂肪源的差異實質上就是脂肪酸組成及比例（n－3／n－6）的差異，脂肪酸組成及比例可對魚體生長產生不同的影響［12］。魚油富含具有重要生理功能的HUFA［13］，這可能是本試驗中魚油組鯉魚生長效果較好的原因。本試驗中菜籽油組和亞麻籽油組鯉魚也表現出較好的促生長效果，可能是由于菜籽油中豐富的油酸能優先被魚類β氧化供能［14］，加之，鯉魚能將亞麻籽油中的亞麻酸轉化為二十二碳六烯酸（DHA）和二十碳五烯酸（EPA）［15］。已有研究發現，黃鱔［16］和羅非魚［5］利用豆油的能力與魚油接近，優于菜籽油和豬油。這與本試驗的研究結果不一致，可能是魚種不同，或者是豆油中含有大量的亞油酸致使飼料中n－3／n－6過低所致。Giovanni等［17］在丁鱥的研究中也有類似的發現，即飼料中n－3／n－6越低，丁鱥生長效果越差。本試驗中豬油組鯉魚生長效果最差，可能與其含有大量飽和脂肪酸有關。已有研究表明，飼料中飽和脂肪酸C16∶0和C18∶0含量高會降低動物對飼料脂肪和干物質的消化率［18－19］，從而影響生長。

3.2 不同脂肪源對鯉魚體組成的影響

已有研究表明，飼料組成對魚體組成有重要影響［20］。本試驗發現，魚油組全魚粗脂肪含量最低，粗蛋白質含量最高；而豬油組全魚粗脂肪含量最高，粗蛋白質含量最低。類似的結果在草魚［10］上已有報道。魚油富含n－3HUFA，會抑制脂肪合成，繼而降 低脂肪 沉積量［21］，此 外，n－3HUFA 還能促進蛋白質在肌肉中的沉積［22］，這可能是魚油組全魚粗脂肪含量最低、粗蛋白質含量最高的原因。豬油影響脂肪和蛋白質沉積量的機理還未見報道，這可能與不同脂肪酸調控脂質代謝酶活性密切相關。

3.3 不同脂肪源對鯉魚肝胰臟脂質代謝的影響

魚類組織中脂質的積累和脂質合成與外源性脂質進入密切相關。動物體內MDH、葡萄糖－6－磷酸脫氫酶（G－6－PD）活性的高低直接關系到煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）的生成［23－24］，而體內 NADPH的含量會直接影響脂類物質的合成［25］。Shikata等［26］研究發現，n－3HUFA和硬脂酸（SA）比亞油酸更能抑制鯉魚肝胰臟MDH活性。隨后，周繼術等［6］的研究指出，魚油組鯉魚肝胰臟MDH活性顯著低于豆油組。本試驗中魚油或豬油較豆油和亞麻籽油能夠顯著降低鯉魚肝胰臟MDH活性，說明富含HUFA的魚油和富含SA的豬油抑制了鯉魚肝胰臟脂肪酸的合成。

LPL催化水解脂蛋白，并釋放出游離脂肪酸以供機體貯存或氧化，因而在機體脂質代謝調控上起關鍵作用［27］。目前，有關不同脂肪源對魚類肝胰臟LPL活性影響的研究在異育銀鯽［7］、虹鱒［28］、舌齒鱸［29］等魚類上已有報道，研究結果也因養殖品種不同而有所差異。本研究發現，魚油組肝胰臟LPL活性最大，而豬油組則最小。王煜恒等［7］的研究也證實不同脂肪源對異育銀鯽肝胰臟LPL活性產生不同的影響。這可能是由于隨著脂肪酸不飽和度的增加，脂肪酸促進LPL的基因mRNA表達的作用加強，進而誘導肝胰臟LPL合成增加所致［30］。魚類肝臟是脂質代謝和貯存的重要場所。已有研究證實，LPL活性的升高會增加魚類患脂肪肝的風險［30－31］。但王煜恒等［7］卻發現LPL活性最高的魚油組其肝脂含量最低。肝胰臟LPL活性的升高將導致肝胰臟游離脂肪酸含量的增加，而增加的游離脂肪酸是用于氧化供能還是用于貯存呢？這是值得我們進一步深入研究的問題。

3.4 不同脂肪源對鯉魚肝胰臟抗氧化能力的影響

脂質過氧化會破壞細胞膜的正常結構和功能［32］。一般認為，組織中多不飽和脂肪酸（PUFA）的含量及其不飽和程度直接決定了可能發生的脂質過氧化程度［33］。T－AOC是機體內抗氧化能力的總體體現，是酶促［SOD、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽硫轉移酶（GST）等］和非酶促（維生素、氨基酸和金屬蛋白等）2方面因子抗氧化能力的總和。SOD對機體的氧化與抗氧化平衡起著至關重要的作用，它能清除超氧陰離子（O－2），保護細胞免受損傷。本試驗中，豬油組SOD活性和T－AOC顯著低于其他各組，表明豬油作為鯉魚飼料單一脂肪源會損害鯉魚肝胰臟健康。魚油組SOD活性與植物油組（豆油組、菜籽油組、亞麻籽油組）間沒有顯著性差異，但T－AOC顯著高于其他各組，這與吉紅等［31，34］發現 HUFA能提高草魚和鯉魚肝胰臟T－AOC的研究結果類似。然而，Huang等［5］發現羅非魚肝胰臟脂質過氧化物丙二醛（MDA）的含量以HUFA組最高，其次是魚油組、豆油組，以豬油組最低。Peng等［35］也發現豆油替代魚油能降低黑鯛肝胰臟丙二醛含量。目前，有關脂肪源對組織抗氧化能力影響的研究結果存在矛盾，可能是由于魚種不同或飼料脂肪含量不同所致。

4 結 論

①飼料中脂肪源不同會影響鯉魚的生長性能、脂肪代謝和抗氧化能力。

② 作為鯉魚單一的脂肪源，魚油的促生長效果要優于豆油、菜籽油和亞麻籽油；而豬油不適宜作為鯉魚單一的脂肪源，會損害肝胰臟健康，進而阻礙魚體生長。

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