老年腫瘤患者血清鐵調素及細菌脂多糖和白細胞介素-6的表達

潘湘濤 陸 曄 程 旭 王金湖 李 蓉 嚴 敏 (蘇州大學附屬太倉醫院血液科，江蘇 蘇州 215400)

老年腫瘤患者血清鐵調素及細菌脂多糖和白細胞介素-6的表達

潘湘濤 陸 曄 程 旭 王金湖 李 蓉 嚴 敏 (蘇州大學附屬太倉醫院血液科，江蘇 蘇州 215400)

目的 研究鐵調素(Hepcidin)在老年腫瘤患者中的表達，以及在癌性貧血發生中的意義及其與炎癥介質因子細菌脂多糖(LPS)和白細胞介素-6(IL-6)之間的關系。方法 應用雙抗夾心生物素-親和素-酶聯免疫吸附試驗(ABC-ELISA)方法檢測86例老年腫瘤患者和104例非老年腫瘤患者(對照組)的血清Hepcidin和LPS和IL-6，并分析Hepcidin與IL-6以及LPS之間的相關關系。結果 老年腫瘤患者血清Hepcidin和IL-6與對照組無統計學差異(均為P＞0.05);而血清LPS則明顯低于對照組(P＜0.01)。老年組的貧血患者Hepcidin和IL-6均明顯高于無貧血患者(分別為t=1.997 0，P＜0.05和t=2.551，P＜0.05)，而LPS則兩組無統計學差異(t=0.392 8，P＞0.05)。對照組的貧血患者Hepcidin、LPS和IL-6均明顯高于無貧血患者(分別為t=2.110 4，P＜0.05;t=2.059 3，P＜0.05和t=3.554 1，P＜0.01)。老年組Hepcidin與LPS呈明顯的正相關關系(r=0.385 1，t=3.824 2，P＜0.01);Hepcidin與IL-6也呈正相關關系(r=0.228 3，t=2.1497，P＜0.05)。對照組的的Hepcidin與 IL-6呈呈正相關關系(r=0.223 9，t=2.342 1，P＜0.05)，但與LPS無相關關系(P＞0.05)。結論 老年腫瘤患者高表達Hepcidin和IL-6，Hepcidin與LPS和IL-6均呈正相關關系;它們在癌性貧血的發生發展過程中起重要的作用。

Hepcidin;脂多糖;白介素-6;腫瘤;貧血

鐵調素(Hepcidin)在慢性病貧血中的作用近來已受到廣泛重視，國外對此研究日益增多，而國內的研究文獻尚不多見。本文應用雙抗夾心生物素-親和素-酶聯免疫吸附試驗(ABCELISA)方法檢測癌性貧血患者的血清Hepcidin和炎癥介質因子細菌脂多糖(LPS)和白細胞介素-6(IL-6)水平，以探討Hepcidin在老年腫瘤患者的表達特點，特別是在老年癌性貧血發生中的意義，并探討與炎癥介質因子LPS和IL-6之間的關系。

1 資料與方法

1.1 病例資料 2009年6月至2010年5月住院癌癥患者190例，同時進行檢測血紅蛋白(Hb)、Hepcidin、LPS和 IL-6，男96例，女94例，年齡29～82歲，平均59.2歲，結直腸癌54例，乳腺癌45例，胃癌40例，肺癌16例，淋巴瘤14例，食道癌5例，子宮內膜癌4例，胰腺癌3例，腹膜間皮瘤、卵巢癌和宮頸癌各2例，上腭癌、肝癌和膽管癌各1例。

1.2 分組方法 ①將≥60歲的86例患者列為老年組，將＜60歲的104例患者作為對照組。②以 Hb值男性 ＜120.0×109g/L和女性＜110.0×109g/L作為貧血的診斷標準，分別將老年組和對照組再分為貧血和無貧血兩個小組進行分層分析。

1.3 試驗方法 Hepcidin試劑購自美國DRG International Inc.USA.，LPS和IL-6試劑均為R＆D公司生產，上海天馭生物科貿有限公司提供。同時清晨抽血分置于試管中，其中Hb測定應用常規方法即時檢測，而其余血清則超低溫冰箱保存，對190例患者血清標本同時應用ABC-ELISA方法檢測Hepcidin、LPS和 IL-6。

1.4 統計學處理 應用SPSS13.0軟件包進行統計學分析，分別采用t檢驗和Spearman等級相關法。

2 結果

2.1 各組血清 Hb、Hepcidin、LPS和 IL-6水平 老年組的Hepcidin、Hb和IL-6均明顯高于對照組。老年組血清LPS水平明顯低于對照組(t=2.502 4，P＜0.05);而IL-6高于對照組，但無統計學差異(t=1.251 2，P＞0.05);Hepcidin則兩組基本一致(t=0.392 8，P＞0.05)。老年組的貧血患者Hepcidin和IL-6均明顯高于無貧血患者(分別為t=1.997 0，P＜0.05和t=2.551 0，P＜0.05)，而 LPS則兩組無統計學差異(t=0.392 8，P＞0.05)。對照組的貧血患者 Hepcidin、LPS和 IL-6均明顯高于無貧血患者(分別為 t=2.110 4，P＜0.05;t=2.059 3，P＜0.05和 t=3.554 1，P＜0.01)。

表1 各組血清Hb、Hepcidin、LPS和IL-6測定結果(±s)

表1 各組血清Hb、Hepcidin、LPS和IL-6測定結果(±s)

分組 n Hb(×109 g/L)Hepcidin(μg/L) LPS(μg/L) IL-6(ng/L)老年組 86 125.0±22.5 39.64±33.54 57.44±19.92 22.73±29.94貧血 24 106.7±32.3 51.01±35.80 61.98±20.90 45.61±41.58無貧血 62 132.1±20.6 35.23±31.83 55.69±19.39 13.87±28.79對照組 104 123.7±25.3 41.52±33.25 74.12±59.08 14.07±13.97貧血 26 100.7±35.9 52.89±29.95 87.70±83.39 33.49±30.13無貧血 78 131.3±19.6 37.73±32.28 69.59±48.05 7.60±14.03

2.2 相關分析 老年組Hepcidin與LPS和IL-6均顯著相關(P＜0.01，P＜0.05)。對照組Hepcidin與IL-6顯著相關(P＜0.05)。見表2。

表2 各組相關分析結果

3 討論

慢性病貧血又名炎癥性貧血，是由慢性感染、炎癥、惡性腫瘤和自身免疫性疾病等所引起，臨床上以低血清鐵、低血清轉鐵蛋白、低轉鐵蛋白飽和度和高血清鐵蛋白為特征〔1〕，是缺鐵性貧血以外的第二個常見的貧血，并由Hepcidin所介導〔2〕。國外大量的研究資料表明許多炎癥介質因子參與了Hepcidin的表達以及調節鐵代謝的過程，炎癥介質因子和Hepcidin共同參與了慢性病貧血的發生和發展〔1〕。Sasu等〔3〕認為 Hepcidin濃度與癌性貧血患者的炎癥標志物相關，是炎癥性貧血的診斷和判斷治療療效的有效指標，是一個鐵轉運的負性調節劑〔4〕。

本文結果表明癌性貧血患者的血清Hepcidin、LPS和IL-6要明顯高于無貧血的患者，我們進一步的研究發現Hepcidin與LPS和IL-6均呈正相關關系，與文獻報道相一致，如Hohaus等〔5〕報道霍奇金淋巴瘤患者中Hepcidin表達與IL-6呈顯著的正相關(P＜0.001)，Igor等〔6〕則發現37例慢性病貧血中Hepcidin和IL-6與對照組和缺鐵性貧血比較均明顯增高，并且Hepcidin是由LPS和IL-6所介導的，支持Kanda等〔7〕提出的在炎癥狀態下，貧血由IL-6介導的Hepcidin過度增多所引起的觀點。Kemna等〔8〕的研究表明Hepcidin是由LPS和IL-6所介導，LPS注射給人體后導致IL-6的升高，之后在3～4 h Hepcidin分泌達到高峰，Lee等〔9〕則通過體外細胞培養也證明了LPS誘導生成的IL-6上調Hepcidin基因表達。

慢性病貧血的原因很多，諸如失血、營養不良、溶血、促紅細胞生成素生成減少或相對分泌不足和紅系祖細胞對其反應降低等等，但鐵代謝的異常也是一個重要的因素。從我們的研究結果和國外文獻資料來看，癌癥患者的LPS異常增高導致了IL-6的分泌增多，繼而誘導Hepcidin的增多。而Hepcidin的異常增多引起鐵代謝的異常變化，無論是通過內分泌機制還是通過體循環，都是將鐵留在儲鐵細胞中并阻止腸道鐵的吸收，因而血清鐵降低、轉鐵蛋白和轉鐵蛋白飽和度降低，造成鐵對紅系生成的限制，進而網狀內皮系統鐵的增加和血清鐵蛋白的增多。一系列的鐵代謝改變引起機體鐵的失利用，因而導致發生貧血。

慢性病貧血的發生中還有許多其他炎癥介質細胞因子的參與，我們下一步將較全面地研究IL-1、IL-10、TNF和IFN等在癌癥貧血患者中的表達特點及其與Hepcidin的關系，以期進一步深入探討Hepcidin在癌性貧血的發生發展中的真正意義。

1 Grotto HZ.Anema of cancer:an overview ofmechanisms involved in its pathogenesis〔J〕.Med Oncol，2008;25(1):12-21.

2 Demarmels BF.Anemia of chronic disorder-pathogenesis，clinical presentation and treatment〔J〕.Therumsch，2010;67(5):225-8.

3 Sasu BJ，Li H，Rose MJ，et al.Serum hepcidin but not prohepcidin may be an effective maker for anemia of inflammation(AI)〔J〕.Blood Cell Mol Dis，2010;45(3):238-45.

4 Guidi GC，Lechi S.Advancements in anemias related to chronic condition〔J〕.Clin Chem Lab Med，2010;48(9):1217-26.

5 Hohaus S，Massini G，Giachelia M，et al.Anemia in Hodgkin's lymphoma:the role of interleukin-6 and hepcidin〔J〕.J Clin Oncol，2010;28(15):2538-43.

6 Igor Theurl，Veren M，Markus S，et al.Dysregulaed monocyte iron homeostasis and erythropoietin formation in patientswith anemia of chronic disease〔J〕.Blood，2006;107(10):4142-8.

7 Kanda J，Uchiyama T，Tomosugi N，et al.Oncostatin M and leukemia inhibitory factor increase hepcidin expressin in hepatoma cell lines〔J〕.Int JHematol，2009;90(5):545-52.

8 Kemna E，Pickkers P，Nemeh E，et al.Time-course analysis of hepcidin，serum iron，and plasma cytokine levels inmuman injected with LPS〔J〕.Blood，2005;106(5):1864-6.

9 Lee P，Peng H，Gelbart T，et al.The IL-6 and lipopolysacchaide induced transcription of hepcidin in HFE，transferring receptor 2 and beta-2-microglobulin-deficient heptocytes〔J〕.PNAS，2004;101:9263-5.

R730.45

A

1005-9202(2012)16-3418-02;

10.3969/j.issn.1005-9202.2012.16.027

蘇州市2010年科技計劃項目(No.SYSD2010082)

潘湘濤(1963-)，男，教授，博士，主要從事血液腫瘤的基礎與臨床研究。

〔2011-02-28收稿 2011-06-10修回〕

(編輯 曹夢園)