復方坦索羅辛非那雄胺膠囊的含量測定方法研究

哈藥集團制藥六廠，黑龍江哈爾濱 150056

鹽酸坦索羅辛是一種強效和高選擇性的α1-腎上腺素受體抑制劑，它作用于血管平滑肌而不影響血壓，松弛尿道緊張狀態，使排尿障礙得到改善，臨床上可用于治療良性前列腺增生和前列腺肥大引起的排尿障礙[1]。非那雄胺為良性前列腺增生治療藥物，具有抑制5α-還原酶而阻斷雙氫睪酮（DHT）的合成作用[2]，臨床上用于治療老年男性前列腺炎和男性脫發[3-4]。目前，國內外暫未有復方坦索羅辛非那雄胺制劑上市。

1 儀器與試藥

濕法混合制粒機；GKF-900型膠囊充填機；ZES-8G型智能溶出試驗儀；Waters 515型高效液相色譜儀。鹽酸坦索羅辛；非那雄胺。

2 方法與結果

2.1 鹽酸坦索羅辛含量測定

2.1.1 色譜條件與系統適用性試驗色譜柱：KromasilC18（250nm×4.6mm，5μm），流動相為乙腈-0.2mol.L-1磷酸二氫鉀-0.2mol.L-1磷酸鹽溶液=5:7:7（v/v），流速為1mL.min-1，柱溫為30℃，進樣量為20μl，檢測波長225nm。在該色譜條件下，供試品中鹽酸坦索羅辛峰能達到基線分離，理論塔板數按鹽酸坦索羅辛峰計應不低于2000。

2.1.2 溶液制備

2.1.2.1 對照溶液精密稱取鹽酸坦索羅辛對照品25.12mg，加流動相溶解，并定容至25mL量瓶中，制成濃度為 1.0048mg·mL-1的鹽酸坦索羅辛對照品貯備液。精密量取5mL貯備液置10mL量瓶中，即得0.5024mg.mL-1的對照品溶液。

2.1.2.2 供試品溶液取本品20粒的內容物，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于鹽酸坦索羅辛25mg），置于50mL量瓶中，加流動相充分溶解并稀釋至刻度，搖勻即得。

2.1.3 專屬性試驗取空白溶劑和空白輔料，依法測定，結果空白溶劑對主峰和降解產物測定無干擾，表明此方法專屬性強。

2.1.4 線性關系考察精密稱取對照品貯備液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、7.0mL，分別置于10mL量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20μl注入液相色譜儀。結果鹽酸坦索羅辛50.24～351.68μg·mL-1濃度范圍內，呈良好的線性關系（r=0.9999）。

2.1.5 精密度試驗精密稱取對照品貯備液適量，按“2.1.1”項下色譜條件連續進樣6次，結果鹽酸坦索羅辛的峰面積RSD=1.2%（n=6），表明該方法的精密度良好。

2.1.6 穩定性試驗取“2.1.2”項下供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、12、16、24h進樣測定。結果鹽酸坦索羅辛峰面積RSD=1.3%（n=8），表明供試品溶液在24h內穩定。

2.1.7 重復性試驗取同一批供試品 6份，按“2.1.1”項下色譜條件測定。結果鹽酸坦索羅辛的含量平均值為99.23%，RSD=1.2%。

2.1.8 加樣回收率試驗精密稱取已知含量的同一批樣品細粉（相當于鹽酸坦索羅辛5mg）6份，置于20mL量瓶中。再精密量取鹽酸坦索羅辛對照溶液（1.0048mg·mL-1）5mL加至上述20mL量瓶中，加甲醇適量，超聲使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取濾液1mL置10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，即得供試品溶液。依法測定，結果平均回收率99.1%，RSD=0.48%（n=6）。

2.1.9 含量測定按“2.1.2”項下供品溶液的制備方法制備三批樣品的供試品溶液，按“2.1.1”項下色譜條件測定鹽酸坦索羅辛峰面積，并計算其含量。結果三批樣品的含量分別為99.8%、99.7%、99.8%，平均含量為99.77%。

2.2 非那雄胺含量測定（高效液相色譜法）

2.2.1 非那雄胺色譜條件及系統適應性試驗色譜柱：WatersC18（250mm×4.6mm，5.0μm），流動相為甲醇-水（75:25），流速為1mL·min-1，檢測波長220nm，理論塔板數按非那雄胺峰計算大于1500。

2.2.2 溶液制備

2.2.2.1 對照溶液精密稱取非那雄胺對照品50mg，置100mL的量瓶中加流動相70mL，超聲5min使非那雄胺溶解。加流動相稀釋至刻度，搖勻，備用。

2.2.2.2 供試品溶液取本品20粒的內容物，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于非那雄胺5mg），置于50mL量瓶中，加流動相適量，超聲5min使溶解并用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，備用。

2.2.3 線性關系考察精密稱取2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml對照品溶液分別置25mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，配成0.04、0.08、0.12、0.16、0.20mg·mL-1的溶液。結果非那雄胺在0.04～0.20mg·mL-1濃度范圍內，呈良好的線性關系（r=0.9996）。

2.2.4 精密度試驗稱取對照品溶液適量，連續進樣6次，結果峰面積RSD=0.61%，結果表明該方法的精密度良好。

2.2.5 穩定性試驗取供試品溶液分別于0，2，4，6，8，12，24h進樣測定，結果RSD=0.68%測定溶液在24h內穩定。

2.2.6 回收率試驗精密稱取非那雄胺對照品5mg六份，分別置于50mL量瓶中，再分別按處方比例加入相應的空白輔料，加流動相超聲溶解并稀釋至刻度，濾過。精密量取濾液2mL置10mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，依法測定，結果平均回收率（n=6）為99.24%，RSD=0.38%。

2.2.7 含量測定依法測定本品三批，按峰面積以外標法計算含量，結果三批樣品的含量分別為99.7%、99.6%、100.1%，平均含量為99.8%。

3 小結

試驗結果表明，復方坦索羅辛非那雄胺膠囊中主藥含量采用高效液相色譜法外標法進行測定，方法準確，專屬性強，雜質不干擾主藥的測定，是可以控制產品質量的。

[1]劉艷紅,徐文奎,馬德保,等.鹽酸坦洛新胃漂浮緩釋小丸的制備與體外釋放[J].沈陽藥科大學學報,2009,26(11):852-856.

[2]Mconnell JD,Wrlson JD,George FW,et al.Prostate volume predicts outcome of treatment of benign prostatic hyperplasia with finasteride:Meta–analysis of randomized clinical trisls[J].Urology,1996,48(3):398.

[3]Beisland HO,Brekkan E,et al.Scandinavian clinical study of finateride in the treatment of begign prostatic hyperplasia[J].Ear Urol,1992,22(4):271.

[4]Stoner E.The Finasteride Study Group.The clinical effects of 5α-reductase inhibitor,finasteride,on begign prostatic hyperplasia[J].J Urol,1991,147(5):1298.