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豬圓環病毒病的流行診斷和控制進展

2012-01-26 12:59:18王憲文王麗榮姚四新杭柏林劉興友
中國獸醫雜志 2012年4期
關鍵詞:檢測

王憲文,王麗榮,姚四新,杭柏林,劉興友

(河南科技學院動物科學學院,河南 新鄉453003)

豬圓環病毒(PCV)是一種小而無囊膜、二十面體對稱、共價閉合、環狀、單股DNA病毒,病毒粒子直徑平均為17nm,是目前發現的最小的動物病毒。1974年由Tischer等首次報道。隨后發現PCV2可引發豬斷奶后仔豬多系統衰竭綜合征(PMWS)、豬皮炎腎病綜合征、母豬繁殖障礙、先天性震顫、豬呼吸道綜合征和PCV2相關性腸炎等多種疾病,給養豬業帶來很大的經濟損失。在此我們講述了PCV2相關疾病的流行、診斷和控制最新進展,為進一步防控該病打下良好基礎。

1 PCV2流行新特點

病毒分子流行病學調查表明,養豬國家的大多數豬場均存在PCV2感染。病豬、健康帶毒豬、康復帶毒豬以及公豬精液、流產胎兒均是本病的傳染源。Patterson A R[1]從人工或自然感染豬的排泄物、鼻腔、口腔和扁桃體拭子和患豬的尿液和糞便中均檢測到PCV2DNA;加之PCV2對消毒劑耐受性強,病毒在環境中很穩定,并對易感動物造成持續的威脅。病毒主要通過消化道(如飼料、飲水和初乳等)和呼吸道感染易感豬,也可通過精液感染易感豬,感染PCV2的懷孕母豬可經胎盤垂直傳播感染胎豬,引起繁殖障礙。家豬和野豬是PCV2的自然宿主,各個日齡階段的豬均易感染,但保育豬和育肥豬多見;小鼠對PCV2易感并可作為PCV2感染的動物模型[2];最近有報道稱PCV2可感染牛,并參與形成牛出血性疾病綜合征[3]。

PCV2感染造成免疫抑制,使豬群抵抗能力下降,容易感染其他疾病。與PCV2相關性最強且目前正在對豬場造成經濟損失的疾病有:副豬嗜血桿菌病,鏈球菌病,附紅細胞體病和喘氣病等。姜平等[4]報道,我國2002~2005年間,5周齡以下的豬,PCVD發病特點為發病率低,死亡率高;其中6~9周齡發病率最高達35%,死亡率達15%;10~12周齡發病率仍達22%,12周齡以上時,發病率不到5%。而2006~2009年間,9周齡及以下的豬發病率和死亡率顯著下降;10~12周齡,PCV2豬的發病率和死亡率較以前同期豬顯著上升;12周齡以上時,發病率也較以前顯著上升。

PCV2變異較快,Firth C 等[5]研究發現,PCV2核酸的進化率為1.2×10-3位點/年,是單鏈DNA病毒中最高的。根據對PCV2毒株的序列分析結果,可將PCV2病毒分離株分為5個亞型(PCV2a-e),近年來,世界范圍內主要流行PCV2亞型已從PCV2a轉化為PCV2b[10],即PCV2b為現時主要流行亞型、毒力也最強。Li W等[4]對2001~2009年間報道的中國136株PCV2進行了分析,結果表明,PCV2b占127株;PCV2a占9株;其中2001年中國流行株以PCV2a為主,以后PCV2b占絕大部分。Harding報道[6],PCV2a-PCV2b各1劑量混合接種小豬后造成的病變大于2倍劑量PCV2b或PCV2a單獨接種形成的病變。

2 豬圓環病毒病診斷技術

PCV2相關疾病的診斷是控制該病的前提。根據發病動物或豬群的臨床癥狀和流行病學特點,可以初步診斷PCV2感染。但是要做到對豬PCV2感染的確切診斷還需要借助實驗室診斷技術,這些技術包括病理組織學檢測、免疫組化技術、核酸探針、PCR技術和酶聯免疫吸附試驗等。

病理組織學檢測主要是通過顯微鏡技術,根據感染豬是否出現PCV2特異的病變,來確定待檢動物是否屬PCV2感染,這些特異病變包括淋巴結、脾臟、肺臟淋巴細胞嚴重缺失,淋巴小結萎縮,上皮樣巨噬細胞浸潤,巨噬細胞胞漿內有病毒包涵體,出現以巨噬細胞浸潤為主的間質性肺炎病變等;免疫組化技術操作快速簡便,特異性強,可用于PCV2病毒分離的鑒定、毒價的測定及病變組織感染情況的檢測等[7];核酸探針技術可用來檢測標本核酸中與它具有互補的堿基順序,常用于PCV2相關疾病的回顧性診斷和病原在組織中的分布和致病機理研究[8];PCR技術的優點是敏感、特異,是PCV病原檢測和定型的常用方法,在病豬臟器中檢測出的陽性率比較高,可以對單個豬精確檢測診斷,但對人員的操作技能和實驗室水平有一定要求,而多重PCR、巢氏PCR和定量PCR的出現使得PCR技術的應用更為廣泛[9-10];酶聯免疫吸附試驗快速、靈敏、特異,可適用于大規模的普查,但往往存在假陽性偏高的問題,而且抗體水平與疾病發生發展之間的關系尚不清楚。

檢測方法多種多樣,各有優缺點,結果也不完全一致。Reiner G[11]分別用病理組織法、免疫組化、巢式PCR和定量PCR來研究德國境內349頭野豬和308頭商品豬的PCV2的定量和定性分布情況,經病理組織法和免疫組化法認定1頭野豬(占0.3%)和8.7%的商品豬為豬圓環病毒病;用巢式PCR和定量PCR在野豬體內的PCV2DNA檢出率分別為63.1%和45.4%;商品豬體內檢出率分別為100%和98.8%。Hansen M S[12]在用構建的免疫組化法和定量PCR法檢測與PCV2相關的繁殖障礙綜合征的研究中,認為免疫組化適用于診斷發病嚴重的繁殖障礙疾病,而定量PCR可診斷各種病癥的繁殖障礙。臨床實踐中,我們應根據檢測對象、檢測目的和試驗條件等實際情況選擇適當的檢測方法。

3 豬圓環病毒病的控制

3.1 衛生管理(1)實施全進全出制度:避免將不同日齡的豬混群飼養,減少和降低豬群之間圓環病毒的接觸感染機會。(2)建立豬場完善的生物安全體系:將消毒衛生工作貫穿于養豬生產中的各個環節;最大限度地降低豬場內污染的病原微生物,減少和杜絕豬群繼發感染的機率;選用廣譜消毒劑。(3)加強飼養管理,降低應激因素:避免飼喂發霉變質或含有真菌毒素的飼料;秋冬季節要注意豬群的保暖;作好豬舍的通風、換氣工作,改善豬舍的空氣質量,降低氨氣濃度;保持豬舍干燥;降低飼養密度。

3.2 營養 抗氧化飼料添加劑、共軛亞油酸和噴霧干燥血清加入到保育豬飼料中能加重PMWS的臨床癥狀,這與田間試驗研究和體外試驗中得出的蛋氨酸以濃度依賴性方式降低PK15細胞中PCV2復制的結果相一致。由于PCV2感染導致豬群的免疫功能下降,所以提高飼料的質量,提高蛋白質、氨基酸、維生素和微量元素的水平,提高斷奶豬的采食量,給仔豬喂濕料或粥料(可飲用食用檸檬酸),同時保證仔豬獲得充足的飲水。

3.3 藥物預防 針對目前我國豬群中斷奶后仔豬多系統衰竭綜合征的發病特點和生產實際情況,建議已發病經相應治療剛剛痊愈的豬群或遭受較大的應激(如斷奶、轉群、受涼、食用發霉飼料等)、免疫力下降的豬群,要及時選用廣譜抗菌藥物,特別是呼吸道敏感藥物,做好藥物保健工作,并精心飼養,防止豬群發生繼發感染。

3.4 免疫 預防本病的商品化疫苗主要有桿狀病毒表達的PCV2衣殼蛋白亞單位疫苗、以PCV1為載體表達PCV2衣殼蛋白的嵌合病毒、完整的PCV2滅活疫苗等幾種類型疫苗。母豬和后備母豬免疫PCV2疫苗后可提高動物血清和初乳中的PCV2抗體水平,以保護仔豬不形成PMWS。仔豬3周齡后免疫PCV2疫苗,這時母源抗體消退,仔豬產生中和抗體反應并降低或阻止斷奶或育肥時期的PCV2感染;商品化疫苗在試驗條件和田間條件下均有效,它們可降低PMWS的發生率、提高日增重和飼料轉化率,而且免疫接種可降低混合感染和淋巴組織病變的程度。同時應做好豬場豬瘟、偽狂犬、豬細小病毒、氣喘等疫苗的免疫接種工作。規模化豬場應提倡使用豬氣喘病滅活疫苗免疫接種,有利于提高豬群呼吸道和肺臟的免疫力,減少呼吸道病原體的繼發感染。

3.5 治療 發病后建議中西結合,標本兼治,以毒菌兼制,增強抗病力為治療原則,從控制繼發、并發感染和提高機體抗病力兩方面著手選藥用藥。使用細菌控制制劑(如頭孢噻呋鈉、替米考星等);飼料或飲水中添加中草藥(如板藍根、黃芪和淫羊藿等)和免疫增強劑黃芪多糖等。對發病豬群中未發病豬和病情較輕的豬可在飼料中添加革蘭陽性殺菌藥(如大環內酯類等)或廣譜殺菌藥(如喹諾酮類)、多維素和紅糖(增加適口性);對病情較重(發熱、咳喘、不食)但仍可飲水的豬,可在飲水中添加可溶性殺菌藥如頭孢噻呋鈉、免疫增強劑黃芪多糖、口服補液鹽、電解多維素等,用藥時間一般為1~2周;待豬群病情穩定后再注射圓環病毒疫苗,痊愈后再注射其他疫苗。

[1]Patterson A R,Opriessnig T.Epidemiology and horizontal transmission of porcine circovirus type 2(PCV2)[J].Anim Health Res Rev,2010,11(2):217-234.

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[4]Li W,Wang X,Ma T,etal.Genetic analysis of porcine circovirus type 2(PCV2)strains isolated between 2001and 2009:genotype PCV2bpredominate in postweaning multisystemic wasting syndrome occurrences in eastern China[J].Virus Genes,2010,40(2):244-251.

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