奶牛乳房炎診斷技術研究進展

張慶林 林 源 何 敏

（1.寧夏石嘴山市動物衛生監督所，石嘴山 753000；2.西北農林科技大學，楊凌 712100）

奶生乳房炎是一種常見多發病之一，給奶牛養殖業造成嚴重經濟損失。分為臨床型和隱性型2種。其中，隱性乳房炎發病率較高。奶牛一旦患病后，不但產乳量和乳的品質明顯下降，而且，還可能造成產后發情期和妊娠期延長，甚至可能危及到人的健康。

1 癥狀

1.1 臨床型乳房炎

臨床型乳房炎癥狀明顯，輕者表現為乳房皮膚發紅、乳汁稀薄，有少量絮狀物，用手觸摸患牛乳房，患牛乳房疼痛不明顯。重者患牛表現為體溫升高，食欲減退，乳區腫脹、質地硬，用手觸摸，患牛疼痛明顯，產奶量明顯下降，且乳汁內混有大量絮狀物、血液或凝乳塊。因此，臨床型乳房炎根據臨床表現的癥狀，極易做出判斷。

1.2 隱性乳房炎

隱性乳房炎不表現臨床癥狀，乳汁也無肉眼可見的變化，只是產奶量下降，實驗室檢測乳汁略偏堿性，體細胞數多達5×105U∕ml以上。

2 診斷

隱性乳房炎要早診斷、早治療，以降低養殖戶的經濟損失。

2.1 病原微生物檢查

乳房炎是乳腺受到物理、化學、微生物學等刺激所發生的一類炎性變化。主要由多種非特定的病原微生物引起，如細菌、真菌、病毒等。較常見的有27種，其中細菌12種，霉形體2種，真菌和病毒7種。將奶牛乳汁樣品進行病原微生物的分離培養和鑒定是實驗室診斷奶牛乳房炎病原的一種主要方法。將無菌采集的新鮮奶樣接種于培養基，經細菌培養、乳汁涂片、革蘭氏染色、鏡檢等反復純化病原菌。然后，對已經純化的細菌用生化微量鑒定管進行鑒定。如果能檢出乳汁中有病原微生物就可初步診斷為隱性乳房炎。但是，對于非特異性隱性乳房炎，乳房和乳汁不但沒有肉眼可見的變化，而且乳汁中檢測不到病原菌。有些病原菌雖然經常存在于乳房內，但不一定引起發病。

乳汁的細菌培養法只能根據檢測出病原菌的種類、數量大致進行判斷，而且用生化鑒定管進行鑒定至少需要 28 h 才能確診，費時、費力、檢測速度慢。

2.2 乳汁細胞學檢查

奶牛患乳房炎后，乳汁中體細胞數目，特別是白細胞數顯著增加。在乳腺感染細菌后，細菌的代謝產物誘導大量的多形核白細胞（PMN）進入乳腺細胞。同時，損傷脫落的上皮細胞也進入乳中，致使乳汁中的體細胞增加。因此，可以通過檢測乳汁中體細胞的多少來判斷奶牛是否患有隱性乳房炎，常用的有乳中體細胞直接計數法和間接計數法。

2.2.1 乳中體細胞直接計數法

國外專家發明了直接顯微鏡計數法，明確規定乳汁中細胞數超過5×105/ml診斷為乳房炎。有人認為超過2.5×105/ml即可診斷為乳房炎。但是，中國農科院中獸醫研究所根據試驗，提出治療乳房炎判定療效標準，每毫升乳汁中細胞數降至1×106/ml以下就可定為正常，國外也有類似的報道。白細胞分類記數的刻度管檢驗法，這是一種根據噬中性分葉核白細胞占白細胞總數的多少來判定乳房炎的方法。如果噬中性分葉核白細胞占白細胞總數的12%～20%就定為可疑，20%以上定為乳房炎。另外，國外已研制的體細胞自動記數儀，已在乳汁檢測中得到應用。此外，還有熒光電子細胞計數法。

2.2.2 乳汁體細胞間接計數法

CMT（加州乳房炎測試法），在CMT試液的作用下，乳汁細胞中的脂類物質發生乳化，乳汁細胞被破壞，釋放出的DNA發生沉淀或凝塊，根據其量的多少來間接判定乳中細胞數的多少而達到診斷的目的方法。中國農業大學以普通洗衣粉為主要成分配制的乳房炎簡易診斷液，更方便于在牛場推廣使用。另外，東北農學院潘軍等利用十二烷基磺酸鈉加以指示劑制成改進CMT試液。這種方法使凝聚反應易于判定，同時可檢出酸度高的乳汁來。歐陽五慶等（1995）在現有各種診斷方法的比較試驗的基礎上，采取各種不同新合成的國產表面活性劑組成多種配方進行篩選，選定了SMT-Ⅰ，SMT-Ⅱ，SMT-Ⅲ3種隱性乳房炎診斷液。試驗結果表明，SMT系列診斷液反應敏感，尤其是SMT-Ⅰ試液，只需5 s即可顯示結果。其他間接檢驗，有 2%苛性鈉凝乳法和過氧化氫酶法。過氧化氫酶法就是通過檢測乳中白細胞的過氧化氫酶，來推斷白細胞的含量。

2.3 乳汁pH檢驗法

泌乳奶牛乳汁的正常pH在6.2～6.6之間，牛奶pH值的變化與體細胞和炎性細胞的含量呈正相關，因此可以通過檢測乳汁pH值的方法來檢測乳房炎。通常使用的方法有溴麝香草酚藍（BTB）法和乳房炎試紙法。

2.3.1 磨香草酚蘭檢驗法（BTB法）

乳房炎發生時，乳汁中的pH值上升，通過測定乳汁pH值便可以達到判定目的。在檢驗pH值的方法中，操作比較簡單而且常用的是BTB法。BTB法有2種操作方法即試管法和玻片法。

2.3.2 試紙法

Joshis V等報道了用奶牛乳房炎試紙進行隱性乳房炎現場診斷。現在這一方法已在美、德、法等多個國家作為檢測和控制隱性乳房炎的主要措施，受到牛場主的很大重視。在國內，王林安等在1985年研制出奶牛乳房炎試紙并在我國養牛業中應用。日本早已研制出BPB濾紙片診斷乳房炎的方法。這種方法需要把乳汁中的乳清分離出來作為檢查病樣。張蔓茹等對BPB法進行改進，探討了全乳加醋酸和全乳不加醋酸處理的BPB濾紙片快速診斷法。結果表明，全乳BPB診斷法的準確性可靠而且靈敏性較高。

2.4 乳汁導電性檢查法

乳腺感染后，血-乳屏障的滲透性改變，Na+、Cl-進入乳汁，使乳汁電導率值升高。乳汁電導率法由于乳房炎乳汁理化性質發生改變，可以通過檢測乳汁的電導率來監測隱性乳房炎。祁克宗等（1996）研究表明，隱性乳房炎乳汁的電導率均高于正常值，但在不同的個體及不同的飼養管理狀況下，乳汁的電導率變化較大，因此，判斷隱性乳房炎的關鍵是確定不同牛群正常乳汁電導率的閾值。

從20世紀20年代開始，人們就開始研究利用隱性乳房炎乳汁的導電性增強的原理來檢測隱性乳房炎，但直到20世紀80年代才開始走向實用化。日本首先生產出便攜式的袖珍電子診斷儀。1983年，山西農業大學郝慶銘教授推出同類產品SX-IE型乳牛乳房炎診斷儀。這種儀器不但能區分健康乳、可疑乳、隱性乳房炎輕度感染乳、中度乳、重度乳等五類乳汁，還可初步測定出乳汁的營養成分。隨之，他又研制出具有國際領先水平的ZRD（以前稱CN）型乳牛乳腺炎電子檢測儀。這種儀器除了能區分上述五類乳外，對健康乳還能區分為最佳健康乳、一般健康乳和次健康乳，它體積小，重量輕，可在牛棚旁進行測定。西北農林科技大學研制出的XND-A型奶檢儀，是以導電極為傳感器的便攜式奶檢儀，它體積小，能快速、綜合的檢出摻假奶、酸敗乳和乳房炎乳。

相信隨著科技的發展，畜牧科研人員一定能研究出診斷更為準確，便于操作和掌握的新方法，為奶牛養殖戶做出貢獻。