三種不同染色方法在TCT(液基細胞學)檢查中的應用

蔡中文

湖北省蘄春縣人民醫院，湖北 蘄春 435300

近幾年來，采用液基細胞學取樣進行陰道脫落細胞檢查在國內外得到很大的普及，它改變了傳統的手工涂片的方法，制片效果好，利于觀察，陽性檢出率高，是細胞病理學檢查的一大改革。液基制片后的染色效果直接關系到檢測的結果，細胞學的常用染色方法有瑞氏染色、巴氏染色、H-E染色，效果都不錯。但對于液基細胞學來說，通過比較，H-E染色效果是最理想的選擇。

1 材料與方法

1.1 液基細胞制片，使用的是孝感亞光醫用電子技術有限公司生產的細胞保存液 (成分為：乙醇、甲醇、氯化鈣、碳酸氫鈣、葡萄糖等)通過VCT-2000細胞制片機、95%酒精固定30min、水沖洗，分別用瑞氏、巴氏、H-E三種染色法。

1.2 瑞氏染色：在液基細胞涂片上滴數滴瑞氏染液，覆蓋整個細胞薄層，后再按1∶2加倍沖液，染色10min。

1.3 巴氏染色：液基細胞涂片置蘇木素3min、水沖洗、鹽酸酒精分化5S，水沖洗堿水反藍，95%酒精一過，桔黃一過，95%酒精洗3次，EA-50染色2min，95%酒精1min、無水酒精2min、無水酒精5min、二甲苯2min中性樹膠封片。

1.4 H-E染色，液基細胞涂片置蘇木素5min，水沖洗，10%鹽酸酒精分化5S，水沖洗0.5%，伊紅染色2min，水沖洗，95%酒精1min，無水酒精2min，無水酒精5min，二甲苯2min，中性樹膠封片。

2 結果

染色后鏡下發現

瑞氏染色：偏藍灰，細胞核、細胞漿對比不明顯;

巴氏染色：大部分著色較好，色彩鮮艷，不足部分為部分細胞偏紅核周有伊紅著色較深處，與核分界不清;

H-E染色：細胞核、細胞質染色分明，紅蘭適度。

3 討論

在傳統的細胞涂片中，瑞氏染色效果較好，因其省時、方便、快捷，而被廣泛采用，但此法適用于血片，胸腹水，淋巴穿刺液涂片，但在液基細胞保存液中，細胞保存時間可較長，適合大批量細胞學篩查，因含防腐劑對細胞的影響而對染色的要求較高，細胞學檢查中，核的變化是主要因素，把細胞核染好，核漿對比鮮明是最重要的。瑞氏染液對液基細胞染色不好，核漿對比不鮮明，瑞氏染色過程中不易掌握，易污染，故不采用。巴氏染液對大部分來自上皮和間皮的標本染色較好，細胞核結構清晰，分色明顯，透明度好，胞漿著色鮮艷，色彩豐富鮮艷，胞內結構清晰，染色效果好，是細胞病理學檢查常用的方法，尤其是觀察女性雌激素水平對陰道上皮細胞的影響。少數有部分細胞核偏紅，核周有伊紅著色較深處，與核分界不清的情況，并且染色時間長、操作繁瑣。H-E染色透明度好，核漿對比鮮明，染液的滲透性強，適合液基細胞染色。

H-E染色不理想的彌補，如染色較淺，可分別進行蘇木素及伊紅復染;如用蘇木素使涂片染色過深，后用鹽酸酒精處理，可以去除過多的染色，隨時用顯微鏡觀察涂片，直到背景干凈、至滿意為止。

［1]張賽霞，張立群.幾種血涂片染色方法比較［J].實用醫技雜志，2007，3(14)7.

［2]栗艷玲，朱東新，等.液基細胞學及TBS診斷報告系統［J].中外醫學研究，2010，(8)：190.