胸4～5椎間隙直視下硬膜外頭端置管建立上胸段硬膜外阻滯大鼠模型

馬新宇，李 玄，霍 星

(哈爾濱醫科大學附屬第三醫院 麻醉科，哈爾濱 150040)

早在1966年Otton PE，Wilson EJ．等就報道過胸段硬膜外阻滯(high thoracic epidural anaesthesia，HTEA)通過降低心率和心肌應答改善心臟功能作用［1］。作為一種傳統的方法 HTEA應用于多數胸腹手術和創傷病人［2］，并提供有效的術后鎮痛［3-4］。比起單純全麻，全麻加HTEA能減少心、肺相關的死亡率［5-6］。近年來，HTEA在外科學、婦產科、急慢性損傷、癌痛治療等方面得到廣泛應用。大量報道顯示它能提供良好的術中及術后鎮痛，加快胃腸功能恢復，減輕應激反應及改善術后心、肺功能。為探尋它的作用機制及應用，HTEA動物模型相關的實驗逐年增多，建立模型的方法各具特色，本模型在前期試驗［7］的基礎上，經 T 4～5向頭端置管建立胸段硬膜外阻滯大鼠模型，主要對導管制作和固定方法及管理措施加以改進。

1 材料和方法

1.1 動物選擇

清潔級健康成年雄性Wistar大鼠(250～300)g，由哈爾濱醫科大學附屬第二醫院動物實驗中心提供(實驗動物許可證號:SCXK(黑)2006-010)。

1.2 材料準備

剪取經拉撕并細針造孔后的外徑為0.6 mm的臨床用硬膜外導管(由哈醫大三院麻醉科提供)約8 cm，導管頭端標記1.5 cm置入長度，另一端留取原管外徑長度1 cm，與臨床用硬膜外導管接頭連接，消毒備用。

1.3 硬膜外導管置入與固定

大鼠腹腔注射10%水合氯醛0.3 mL/100 g麻醉后，俯臥位固定，將胸部用軟墊稍墊起，以T4-6棘突為中心備皮、消毒，縱行切開皮膚約1～1.5 cm，以T2椎體為標志，暴露T4-5棘突及其韌帶，用眼科剪刀銳性剪開棘上韌帶、棘間韌帶并暴露黃韌帶，由助手持小鑷子將T4棘突稍向頭側上方提起，用7號注射器針頭挑開黃韌帶，因大鼠解剖差異，分離棘突間韌帶時很容易損傷附近血管，尤其是挑開黃韌帶時，術前備黃豆粒大小棉球若干，助手提起胸4椎體棘突良好暴露，可見白色硬膜，導管置入前頭端涂抹少量液體石蠟潤滑。導管椎旁肌肉縫扎固定時，結扎松緊適度。尾向牽拉皮膚測量皮下隧道導管緩沖長度2～3 cm，引出皮膚處固定，松緊適度，并確認導管未堵塞。將已備好并處理后的硬膜外導管直視下向頭端緩慢置入硬膜外腔1.5 cm。導管經皮下隧道留出2～3 cm緩沖長度，另一端引出背部，接微量注射泵或注射器。逐層固定后，先抽取0.9%生理鹽水50 μL注入硬膜外導管，確認沒有堵塞后吸出管內鹽水，并注入加導管容量(平均為 60 μL)的 1% 里多卡因 100 μL/kg，15 min 后大鼠可出現上肢松軟，胸腹部松弛，有的可見眼瞼下垂，蘇醒后大鼠活動正常，表明無明顯的脊髓或神經損傷，可明確導管位于硬膜外腔，尸檢可見導管頭端位于T1～3，注入等量1%亞甲藍，其染色范圍在頸段至T5節段視為模型成功。硬膜外注藥前測量出接頭及導管的容量，約60 μL。因大鼠較小，故術野小，手術操作過程中避免擠壓其胸部，經常觀察大鼠呼吸，當出現呼吸不暢如痰鳴鼻塞等氣道分泌物增多時，可用干棉球擦拭鼻部，或用接20 mL注射器的小軟管于大鼠口咽部吸引1～2次，呼吸通暢后繼續手術操作。硬膜外注藥期間，如出現導管脫出，感染，堵塞及意外死亡棄之不用。

2 結果

試驗終止共用大鼠120只，2例在導管置入后注藥3 min呼吸心跳驟停，后解剖發現導管置入硬膜下，明確為全脊髓麻醉所致;4例在操作過程中呼吸抑制致意外死亡;2例在硬膜外給藥后出現痙攣抽搐后呼吸心跳驟停死亡;6例導管脫出;3例導管堵塞;103只成功，成功率85.8%，硬膜外腔感染率為0，導管脫出率5%。

3 討論

上胸段硬膜外阻滯可能的作用機制是通過阻滯相應節段軀體神經和交感神經傳入和傳出纖維的興奮傳導，產生阻滯區域感覺、運動神經麻痹和交感神經功能障礙。近年來，應用動物試驗建立硬膜外阻滯模型逐漸豐富起來，并且成功與否直接影響與其相關的實驗研究，細致的操作充分的準備是關鍵。其中豬，狗，家兔等費用較高，可能造成資源浪費，或因某些特殊研究需較大樣本量而局限。大鼠模型操作簡便，經濟實惠。目前大鼠胸段硬膜外置管的 方 法 有:T6-7［8］，L3-4［9］頭 端 置 管、寰 枕 關節［10］及寰樞關節尾端置管［11］等。T6-7方法在實際操作中暴露硬膜困難，置管后導管固定不牢靠，易脫出，導管置入深度較長約3 cm，硬膜損傷幾率增加。L3-4置管到T6椎體距離長，損傷脊髓及神經或置入蛛網膜下腔的幾率大大增加，后兩種方法可因大鼠解剖差異而使得阻滯范圍偏向胸中段或下段。活體大鼠在硬膜外持續治療期間，硬膜外導管穩定性是持續硬膜外模型的另一關鍵，本模型采用硬膜外導管置入點肌肉和皮膚的雙重固定，皮下留出緩沖長度，以及單籠飼養等方法基本保證治療期間的導管穩定性，適量抗生素及無菌操作技術的應用確保了治療期間的低感染率。通過活體硬膜外腔注入100 μL/kg美藍，尸檢染色范圍在頸段至T5節段之間表明硬膜外劑量與阻滯范圍。

本試驗通過胸4～5間隙頭端置管并特殊導管固定方法建立大鼠的胸段硬膜外阻滯模型證實了此模型的可行性，并具有損傷小，穩定性好，成功率高，費用低、周期短等優點。同時也顯示了模型大鼠的術后管理措施及試驗治療的可行性，對于從事HTEA動物實驗工作者有借鑒意義，使HTEA的作用機制及對各系統疾病作用的深入研究成為可能。

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