淋巴組織細針吸取細胞HE染片褪色后作免疫組化的探討

羅教秀

淋巴組織細針吸取細胞HE染片褪色后作免疫組化的探討

羅教秀

目的探討淋巴組織細針吸取細胞(FNAC)HE染片褪色后作免疫組化的效果。方法12例淋巴組織細針吸取細胞學HE染片，采用高錳酸鉀-草酸褪色后應用免疫組織化學S-P法，對12例淋巴組織針吸細胞涂片進行標記，光學顯微鏡下觀察染色效果。結果HE染色細胞學診斷:5例無惡性細胞，4例核異質細胞，3例可疑惡性細胞;HE染片褪色行免疫組化標記后診斷:3例轉移性癌，3例可疑惡性淋巴瘤，6例無惡性細胞。結論FNAC檢查對初篩淋巴結疾患的良惡性判斷及腫瘤分型有重要意義;淋巴組織細針吸取細胞HE染片褪色后行免疫組化染色，方法簡便易行，在病理診斷中有一定的應用價值。

淋巴組織;細針吸取細胞;涂片

細針吸取細胞學(FNAC)對于淋巴結各類疾病的分類診斷已有較多文獻報道［1］。本文主要探討淋巴組織細針吸取細胞涂片蘇木精-伊紅(HE)染片褪色后，行免疫組化染色輔助診斷的效果，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 標本和試劑 選用我科細針抽吸淋巴組織細胞標本(HE染色)12例，一抗使用廣譜CK、LCA、CD20三種抗體，二抗采用Dako公司的REALTM EnvisionTM通用型二步法檢測試劑盒，褪色劑用0.25% 高錳酸鉀及0.5%草酸。

1.2 方法 ①選用20ml一次性無菌注射器，注射用7號針頭，無需麻醉。操作時沿頸部淋巴結長軸方向進針，進針深度以穿入淋巴結假想半徑1/3～2/3為宜。進針后，形成負壓，并向不同方向反復提插吸取幾次后，用無菌棉球壓迫進針部位出針，立即作厚薄均勻的涂片，浸入95%乙醇中固定，HE染色。②將玻片放入I、Ⅱ號缸二甲苯內各30min;先后置入無水酒精、95% 酒精、70%酒精各5min，蒸餾水洗3min。③將水化的玻片浸入0.25%高錳酸鉀中5min，蒸餾水洗3min;再置入0.5% 草酸漂白2min，蒸餾水洗3min。④褪色后的玻片放入PBS液漂洗3次。不進行抗原修復，未加阻斷劑。加一抗各50μl，置濕盒內4℃孵育過夜。PBS液漂洗3次，滴加Envision二抗50μl，置濕盒內37℃孵育30min。PBS液漂洗3次，滴加DAB顯色劑50μl，顯微鏡下控制顯色程度，待陽性染色明顯，背景未著色前，放入蒸餾水中終止顯色。

2 結果

12例淋巴組織針吸細胞涂片經HE染色細胞學診斷:5例無惡性細胞，4例核異質細胞，3例可疑惡性細胞;HE染片褪色行免疫組化標記后診斷:3例轉移性癌，3例可疑惡性淋巴瘤，6例無惡性細胞。活檢石蠟切片診斷證實12例病變中良性病變6例，惡性病變6例。針吸細胞涂片經HE染色組良性符合率83.33%，惡性符合率50%。HE涂片褪色行免疫組化標記組良性符合率100%，惡性符合率100%。

3 討論

免疫組化技術對淋巴瘤的分型較為準確，特別是對淋巴結造血系統與上皮源性腫瘤的鑒別起到至關重要的作用。本實驗12例針吸細胞涂片標本HE染色細胞學診斷有分歧的經褪色行免疫組化標記后均都明確診斷，并經組織病理學證實。說明針吸細胞涂片作免疫細胞化學染色在日常病理工作中是有意義的，免疫細胞化學為細胞學診斷和鑒別診斷提供了一個較為可靠的手段。為正確的細胞學診斷提供了依據，提高了疾病診斷的準確率。所以本褪色方法行之有效，可以在實踐工作中加以運用。

［1］沈銘昌，徐維萍，王龍富，等.細針吸取細胞病理學.北京:人民衛生出版社，2000:271-306.

ObjectiveTo observe the clinical effects of immunohistochemistry of cell from lymph tissue by fine needle aspiration after HE staining section fading.MethodsThe cell from lymph tissue by fine needle aspiration after HE staining section fading for 12cases，using immunohistochemical S-P method after potassium permanganate and ethanedioic acid fade to mark the lymph tissue by fine needle aspiration after HE staining section fading.ResultsThe cytologic diagnosis by HE stain as follows.ConclusionFNAC is very important to the first screening in the benign malignant lymph node lesions and tumor type.

Adenoid tissue;Fine needle aspiration cell;Smear

528402廣東省中山市人民醫院病理科