uPA和VEGF在子宮內膜癌中的表達及臨床意義

李彩紅，李志偉，時志民，王 蕾，席 豐

(1.邯鄲市婦幼保健院 婦科，河北 邯鄲 0569002；2.邯鄲市第一醫院 檢驗科，河北 邯鄲 056002；3 河北工程大學醫學院 病理科， 河北 邯鄲 056001)

子宮內膜癌為女性生殖系統常見的三大惡性腫瘤之一，占女性生殖系統惡性腫瘤的20%～30%，發病率僅次于子宮頸癌[1]。近年來，研究發現尿激酶型纖溶酶原激活劑(uPA)是降解細胞外基質的重要因子，血管內皮生長因子(VEGF)在淋巴管生成及癌細胞淋巴道轉移中起重要作用，VEGF與uPA關系研究較為少見。本研究擬用免疫組化SP方法檢測正常子宮內膜、子宮內膜癌組織中uPA和VEGF表達情況，分析這兩種蛋白表達與子宮內膜癌生物學行為的關系，探討它們在子宮內膜癌中發生、發展、轉移及生物學行為，為臨床治療和預后提供科學依據。

1 材料和方法

1.1 材 料

選取2008年1月-2011年6月河北邯鄲市婦幼保健院婦科子宮內膜癌手術切除子宮標本60例，平均年齡52.22歲，所有子宮內膜癌患者術前均未行放、化療及激素治療；取因子宮肌瘤或子宮脫垂而手術切除子宮的正常子宮內膜標本32例，平均年齡48.25歲。子宮內膜癌按2000年FIGO標準進行臨床病理分期及組織分級:Ⅰ期15例，Ⅱ期24例，Ⅲ期12例，Ⅳ期9例；G1級36例，G2級13例，G3級11例。病灶局限于內膜層及浸潤<1/2肌層44例，浸潤>1/2肌層16例。

1.2 試劑與方法

常規免疫組化試劑盒SP、二硝基聯苯胺(DAB)顯色液及鼠抗人uPA單克隆抗體和鼠抗人VEGF單克隆抗體(北京中杉金橋生物技術有限公司)。采用SP免疫組化法，方法操作按試劑盒說明書進行，取已知切片作為陽性對照，以PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照。

1.3 結果判斷

uPA和VEGF陽性定位于細胞漿，以細胞漿內出現棕黃色顆粒為陽性信號。參照Parenti等[2]的標準，每張切片均隨機觀察5個高倍視野(×400)，3陽性細胞數<5%為(-)，5%～25%為(+)，25%～50%為(++)， >50%為(+++)。以(+～+++)均視為陽性表達，(-)視為陰性表達。

1.4 統計學方法

應用SPSS 12. 0統計軟件，計數資料采用χ2檢驗,相互關系用等級相關分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 uPA和VEGF在正常子宮內和子宮內膜癌組織中的表達情況

在32例正常的子宮內膜中uPA無表達，60例子宮內膜癌中表達31例，表達率為51.67%(31/60)，兩者比較差異有顯著性意義(P<0.05)；32例正常的子宮內膜中有4例VEGF表達，表達率為12.50%(4/32)，60例子宮內膜癌中表達40例，表達率為43.33%(26/60)，兩者比較差異有顯著性意義(P<0.05)。見圖1、2及表1。

圖1 uPA在子宮內膜癌組織中的表達(SP×400)Fig 1 Expression of uPA in endometrial carcinoma(SP×400)

圖2 VEGF在子宮內膜癌組織中的表達(SP×400)Fig 2 Expression of VEGF in endometrial carcinoma(SP×400)

2.2 uPA和VEGF在子宮內膜癌中的表達與臨床病理指標的關系

uPA和VEGF在子宮內膜癌中的表達與組織學分級、臨床病理分期、肌層浸潤深度以及淋巴道轉移有關(P<0.05)。見表1。

表1 uPA和VEGF在正常子宮內膜及子宮內膜癌中的表達與臨床病理指標的關系Tab1 The expression of uPA and VEGF in normal endometrium and endometrial carcinoma and correlation with clinicopathologic factor n(%)

2.3 uPA和VEGF在子宮內膜癌組織中表達的相關性分析

uPA和VEGF在子宮內膜癌組織中的表達呈顯著正相關，r=0.509，P=0.000。見表2。

表2 uPA和VEGF在子宮內膜癌組織中的相關性

Tab 2 The relationship between uPA and VEGF in the endometrial carcinoma

VEGF(n=26)uPA(n=31)+-+215-1024

3 討 論

尿激酶型纖溶酶原激活劑(uPA)是一種絲氨酸蛋白水解酶，位于10號染色體的長臂上，由10個內含子和11個外顯子構成，成熟的mRNA長度為2.4 kb[3]，具有水解蛋白和信號傳導等多種功能。uPA可以將纖溶酶原激活故為纖溶酶，纖溶酶可以降解基質和基底膜等成份，在腫瘤侵襲、轉移過程中發揮著重要的作用[4]。另外uPA還參與信號轉導通路，促進腫瘤細胞發生、增殖等活動[5]。有報道uPA在多種惡性腫瘤中均有過表達[6-7]，它主要是在生理、病理的條件下，參與各種細胞的分化、增殖、遷移、細胞周圍基質降解以及組織重建等。本實驗結果顯示uPA蛋白陽性表達主要位于細胞漿，在子宮內膜癌組織中表達率較高(51.67%)，在正常子宮內膜組織中不表達，差異有顯著性意義(P<0.05)；uPA的表達與FIGO分期及組織學分級有關，隨著FIGO分期及組織學分級的增加，uPA在內膜癌中的表達率增高；而且有淋巴結轉移及浸潤深度>1/2肌層的內膜癌uPA表達率高于無淋巴結轉移和浸潤深度<1/2肌層者(P<0.05)，uPA的高表達可以使子宮內膜癌中惡性細胞降解細胞外基質和基膜能力加強，誘使惡性細胞向組織深層和淋巴管中浸潤，并發生遠處轉移。本研究證實，uPA隨著組織學分級的升高、浸潤深度的增加而表達增加，這與王淑敏等[8]的報道一致。同時本研究還發現uPA的表達與是否有淋巴結轉移有關，雖與王淑敏等的研究結論存在異議，但結果都提示uPA在子宮內膜癌的侵襲轉移過程中發揮著重要作用。

惡性腫瘤組織在向周圍組織侵襲、向遠處器官轉移時，必須同時伴隨新生血管的形成，新生血管為腫瘤的侵襲性生長提供充足的營養與氧氣，兩者相互促進，相互協調，加劇了腫瘤細胞的侵襲力，使得惡性腫瘤發生更廣泛的侵襲與轉移。血管內皮生長因子(VEGF)是一種具有肝素結合活性的生長因子，作用于血管內皮細胞，在腫瘤血管生成中起到非常重要的作用，對血管內皮細胞的促有絲分裂作用十分強烈，到目前為止，VEGF被認為是所知道的最強的直接作用于血管內皮細胞的生長因子。本研究發現VEGF在子宮內膜癌組織中表達明顯高于正常內膜組織(P<0.05)，VEGF的表達與有無淋巴結轉移、病理分期、浸潤深度及組織學分級有關，與腫瘤的病理組織類型無關。當腫瘤生長到一定程度時，造成局部缺氧，血管生成不足，從而刺激腫瘤細胞分泌VEGF，而促進新生血管生成，增加血管通透性，故VEGF可以加速腫瘤的生長，促進腫瘤發生轉移，說明VEGF在子宮內膜癌的發展及浸潤轉移過程中發揮重要作用。

有研究顯示在MAPK通路中，通過對uPA的調控表達可以誘導VEGF在人臍靜脈內皮細胞的遷移[9]。VEGF也可以促進內皮細胞分泌和激活uPA來降解基質[10]，uPA也可以直接激活VEGF，促使VEGF的釋放[11]，從而為腫瘤細胞的轉移和腫瘤的新生血管形成提供條件。通過二者相關性分析，本研究發現uPA和VEGF在子宮內膜癌組織中的表達呈顯著正相關。提示uPA和VEGF在子宮內膜癌的新生血管形成和細胞外基質降解中是相互聯系、相互促進的，形成正反饋調節環，為新生血管形成提供有利的微環境，uRA通過激活VEGF而誘導腫瘤血管的生成，同時也有利于腫瘤細胞脫落進入脈管或向鄰近組織擴散，為腫瘤侵襲、轉移創造條件。

總之，子宮內膜癌組織中uPA和VEGF處于過表達狀態，與子宮內膜癌的發生、發展和轉移密切相關，本研究對控制子宮內膜癌患者的復發和轉移提供了新的治療思路和方法。

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