電針次髎穴對膀胱過度活動癥大鼠尿動力學的影響

孫衛兵，楊 帆，齊清會

(1.大連醫科大學 附屬第二醫院 泌尿外科， 遼寧 大連 116027；2.大連醫科大學 附屬第一醫院 普外科， 遼寧 大連 116011)

膀胱過度活動癥(overactive bladder，OAB)是一種以尿急癥狀為特征的癥候群，常伴有尿頻和夜尿癥狀，可伴或不伴有急迫性尿失禁；尿動力學上可表現為逼尿肌過度活動(detrusor instability，or detrusor overactivity，DO)。

OAB的發病機制尚不十分清楚，引發逼尿肌不穩定收縮可能是OAB的主要病理生理改變。但臨床上應用作用于逼尿肌的抗膽堿藥物治療OAB未能取得滿意的療效[1]，因此許多學者開始探討OAB的傳入神經機制并尋找新的治療靶點。有研究表明傳入性C纖維活動過度是逼尿肌反射亢進的關鍵病理機制[2-3]。

電針治療OAB遠期療效顯著，副作用小，優于目前OAB的一線治療方法[4-5]。動物實驗顯示：電針次髎穴能減少OAB大鼠的排尿頻率，增加最大膀胱容量，抑制逼尿肌自發收縮[6]。但是否通過影響膀胱傳入神經，特別是傳入性C纖維活動而產生效應目前尚未明確。

本實驗采用腹腔內注射環磷酰胺誘導膀胱過度活動大鼠模型，部分經辣椒辣素脫敏，通過研究電針次髎穴前后大鼠尿動力學相關參數的變化，探討電針治療OAB的傳入神經機制。

1 材料和方法

1.1 動物及分組

健康、雌性、無孕史SD大鼠24只，體重180～220 g，由大連醫科大學動物實驗中心提供，許可證號：SCXK(遼)2008-0002。隨機分成3組：OAB組、辣椒辣素組和對照組，每組8只。

1.2 主要試劑和儀器設備

氨基甲酸乙酯(天津市光復精細化工研究所)，環磷酰胺(江蘇恒瑞醫藥股份有限公司)，多道生理信號采集處理系統(成都儀器廠，RM6240CD型)；生物血壓傳感器(成都泰盟科技有限公司，PT-100型)；微量注射泵(德國貝朗公司，Perfusor compact S)；多用電子穴位治療儀(北京市海淀東華電子儀器廠，WQ-IOPI型)。

1.3 膀胱過度活動模型的建立

參照Juszczak K等[8]報道的方法建立OAB動物模型，腹腔內一次性注射環磷酰胺(CYP)誘導，環磷酰胺的劑量選擇為150 mg/kg。注射后，將小鼠放入籠內，可自由飲食和飲水，4 h后成模。

1.4 分組處理

OAB組：環磷酰胺誘導膀胱過度活動模型后行電針治療，成模后及電針后測量排尿間期，基礎膀胱壓，膀胱最大充盈壓和最大排尿壓。

辣椒辣素組：環磷酰胺誘導膀胱過度活動模型經辣椒辣素脫敏化后電針治療。膀胱排空后自硬膜外導管注入0.3 mL 100 mmol/L辣椒辣素，壓迫尿道開口以防液體溢出直至30 min后排空膀胱，尿動力學測量同模型組。

對照組：對照組腹腔注射相同劑量的生理鹽水。電針治療, 尿動力學測量同模型組，兩次尿動力學測量時間間隔30 min。

1.5 針刺方法

以比較解剖和骨度分寸法為依據進行穴位定位。大鼠次髎穴的定位：脊髓骶椎2、3節段旁開約0.5 cm處，不銹鋼毫針以直插所選部位，進針約30～40 mm，接電針儀,刺激頻率為20 Hz，連續波，針刺時間30 min。

1.6 尿動力學檢查方法

尿道插入硬膜外導管與T型管相連并接壓力傳感器與灌注泵，以0.2 mL/min膀胱灌注生理鹽水，至大鼠開始排尿時停止注水，連續測定3個排尿周期。

1.7 統計學方法

2 結 果

2.1 排尿間期變化

電針前，與對照組相比，OAB組大鼠排尿間期明顯縮短(P<0.01);與OAB組相比，辣椒辣素組大鼠排尿間期明顯延長(P<0.05)。電針后,OAB組大鼠排尿間期比電針前明顯延長(P<0.01)，而辣椒辣素組與對照組無明顯變化。

2.2 基礎膀胱壓變化

電針前，OAB組大鼠基礎膀胱壓與對照組相比明顯增加(P<0.01)，電針后，OAB組大鼠基礎膀胱壓降低，與電針前相比,P<0.05；對照組電針后基礎膀胱壓較電針前明顯升高(P<0.01)；辣椒辣素組膀胱灌注后基礎膀胱壓明顯下降(P<0.05)，電針前后比較無明顯變化。

2.3 最大膀胱充盈壓和最大排尿壓變化

3組電針前最大膀胱充盈壓與最大排尿壓比較無明顯差異(P>0.05)，電針前后上述參數比較也無明顯差異(P>0.05)，見表1。圖1～3為3組典型的電針前后膀胱壓力圖。

表1 治療前后各組排尿間期及膀胱壓力Tab 1 Inter-contraction interval and cystometry in different groups before and after treatment

1)與對照組比較,P<0.01；2)與OAB組比較,P<0.05；3)與電針前比較,P<0.05；4)與電針前比較,P<0.01

圖1 OAB組電針前后膀胱壓力變化Fig 1 The changes of cystometry before and after electroacupuncture (EA) in OAB group

圖2 辣椒辣素組電針前后膀胱壓力變化Fig 2 The changes of cystometry before and after electroacupuncture (EA) in capsaicin group

圖3 對照組電針前后膀胱壓力變化

3 討 論

OAB治療目前主要是通過對傳出神經的作用實現的。逼尿肌分布著M受體，膀胱傳出神經興奮分泌乙酰膽堿作用于M受體使逼尿肌收縮。臨床上廣泛使用的抗膽堿藥都是節后神經纖維毒覃堿受體拮抗劑。藥物治療的有效率僅為40%，服藥6個月后78%的病人因副作用放棄治療。抗膽堿藥物治療的局限性說明傳出神經阻斷并不是解決OAB癥狀唯一的途徑[1]。

近年來傳出神經纖維在OAB中的作用越來越受到重視。膀胱和尿道壁內組織傳入神經纖維 (感覺纖維)存在著兩種感覺神經末梢，一種感覺神經傳入纖維稱A-δ纖維，其主要存在于逼尿肌及尿道平滑肌細胞間的膠原纖維組織內，A-δ纖維傳入的信號主要來自機械感受器(膀胱脹滿或膀胱壁張力)，對排尿功能作用較大。另一種是染色較弱的無髓鞘C纖維，其數量占膀胱傳入纖維的60%～70%，含大量P物質，主要位于膀胱和尿道黏膜及黏膜下層組織內。此類感受器傳導疼痛、溫度覺和觸覺，對化學性刺激很敏感，而對機械性刺激(膀胱牽拉作用)不敏感。C纖維主要感受傷害信號和初級痛覺。兒童時膀胱C纖維豐富，隨年齡增長逐漸退化。當發生急慢性感染或長期刺激性病變時，膀胱C纖維數量將明顯增多[9]。

關于C纖維傳入神經對膀胱過度活動的作用,de Groat[10]的研究已較明確,他在實驗中發現,貓的脊髓離斷后最初膀胱反射消失(不能排尿)。幾周后C纖維短路傳導重新建立,膀胱自動排空。人類有同樣的機制,各種原因引起的膀胱過度活動都是C纖維短路傳導重新建立所致。在神經源或炎性膀胱的排尿控制中,既然是無髓鞘C纖維傳入刺激起到重要作用,以羥丁寧(oxybutynin) 和托特羅定(tolterodine) 阻斷傳出神經就不能都緩解癥狀。

環磷酰胺(CYP)誘導的膀胱上皮炎癥可能引起膀胱的異常感覺，通過C纖維引起膀胱的疼痛和刺激使排尿頻率增加，排尿膀胱容量減少，最大排尿壓力減少以及膀胱基礎壓增加[11]。本研究結果顯示：電針前，與對照組相比，OAB組大鼠排尿間期明顯縮短，辣椒辣素組灌注后排尿間期延長；OAB組大鼠基礎膀胱壓與對照組相比明顯增加，辣椒辣素灌注后膀胱基礎壓下降。電針后，OAB組大鼠排尿間期延長，而辣椒辣素組與對照組無明顯變化；電針后，OAB組大鼠基礎膀胱壓降低，對照組電針后基礎膀胱壓升高，辣椒辣素組電針前后膀胱基礎壓無明顯變化。結果提示CYP誘導OAB大鼠排尿間期縮短，基礎膀胱壓升高，OAB大鼠膀胱灌注辣椒辣素后排尿間期延長，基礎膀胱壓降低。電針次髎穴可延長OAB大鼠排尿間期，升高或降低基礎膀胱壓，辣椒辣素能阻斷電針效應。

本實驗結果顯示，與OAB模型不同，對照組大鼠電針刺激可誘發平均膀胱壓力高于膀胱基礎壓，可能與完好的傳入神經將感覺信號傳入中樞系統，增強傳出神經從脊髓向膀胱傳到的興奮性有關。電針可能通過神經反射雙向調節交感和/或副交感神經對膀胱逼尿肌和尿道括約肌的影響,從而調整膀胱功能[12]。這種療法與骶叢神經電刺激療法可能有相同或相似的作用機理。而在辣椒辣素脫敏的大鼠中，電針沒有引起膀胱基礎壓力的變化，進一步證實了電針的效應與辣椒辣素影響傳入神經活動有關。

辣椒辣素是辣椒中最具刺激性的成分,主要特征是在某些初級感覺神經元上的特異性作用。而高濃度(0.1～1.0 mmol/L)辣椒辣素能作用于周圍感覺神經末端,主要是感受傷害的無髓鞘C纖維,可以通過耗盡神經肽引起膀胱感覺傳入神經脫敏[13],初級傳入神經纖維喪失活性, 膀胱活動受到抑制，繼而增加膀胱容量、改善梗阻和非梗阻性不穩定膀胱的癥狀。因此骶部神經刺激能降低環磷酰胺誘導的逼尿肌過度活動可能作用在傷害性感受的C纖維。

關于針刺的作用機制研究，Sato A等[14]研究證實針刺可引起節律性排尿性收縮，傳出神經節律性爆發性放電。會陰區麻醉的烏拉坦大鼠，腹下神經的活動無任何變化，提示針刺會陰部區域抑制節律性排尿收縮是一種反射反應以節段性分布為特征，與盆神經反射有關。Yu[15]報道電針次髎穴可以降低骶髓排尿中樞c-fos的表達, c-fos基因表達增多是傳入性C纖維活動過度的檢測指標，提示電針次髎穴能抑制C纖維活動。本文研究結果提示，電針次髎穴能抑制CYP誘導大鼠膀胱過度活動，可能與抑制辣椒辣素敏感的C纖維活性有關。

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