野甘草的生藥學(xué)研究

楊 全， 唐曉敏

(廣東藥學(xué)院， 廣東 廣州 510006)

野甘草又名冰糖草、香儀、假甘草等，為玄參科植物野甘草(ScopariadulcisL.)的全株，主要分布在廣西、廣東、福建、臺灣等地，具有清熱解毒，疏風(fēng)止咳，利尿消腫的功效[1]。我國主要用于治療感冒發(fā)熱、肺熱咳嗽、暑熱吐瀉、腳氣浮腫、小兒麻疹、濕疹、熱痱、高血壓和丹毒等證[2]。目前，國內(nèi)外對野甘草的研究集中在化學(xué)成分及藥理作用方面[3～4]，先后發(fā)現(xiàn)了野甘草酸(scopadulcic acid)A、B[5]、野甘草屬酸(scoparic acid)A、B、C、野甘草都林(scopadulin)[6]等活性成分，但尚未見野甘草生藥學(xué)方面的研究報道，本文就其生藥學(xué)特征展開研究，為該藥的鑒別、質(zhì)量控制和進(jìn)一步的開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 儀器與試劑

XSP-ZCA生物顯微鏡；SK3300H超聲波清洗器(上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司)；HH-6恒溫水浴鍋(江蘇金壇市宏華儀器廠)；YH系列規(guī)格1000ml電熱器(江蘇近湖鎮(zhèn)教學(xué)儀器廠)；ZF-20C暗箱式紫外透射儀(上海顧村光電儀器廠)。所用試劑均為分析純。

2 材料與方法

2.1 試驗材料 野甘草采于廣東省廣州市和肇慶市，經(jīng)廣東藥學(xué)院藥用植物教研室楊全副教授鑒定為玄參科植物野甘草(ScopariadulcisL.)。

2.2 試驗方法 運用徒手切片、粉末裝片、表面制片方法進(jìn)行野甘草的顯微鑒別；采用試管定性反應(yīng)及薄層色譜法進(jìn)行理化鑒別。

3 結(jié)果與分析

3.1 藥材性狀鑒別 主根呈圓錐形，平直或帶彎曲，木化，長10～30cm，表面棕黃色，常具側(cè)根，質(zhì)脆易折斷，斷面淡黃綠色，皮部薄。莖多分枝，基部圓柱形，黃褐色，上部灰綠色，莖節(jié)明顯，體輕；嫩莖表面具6條縱棱，質(zhì)脆易折斷，斷面髓部中空；分枝由葉腋伸出，光滑無毛。葉片多，皺縮易碎，灰綠色，完整葉浸潤展開后為菱狀卵形或菱狀披針形，葉緣具齒或細(xì)小缺刻，網(wǎng)狀脈序，草質(zhì)，兩面無毛。花黃白色，生于葉腋處，偶見卵圓形至球形的蒴果，黃褐色，皺縮，多開裂，散出極小粉狀種子。

3.2 顯微鑒定

3.2.1 根橫切面 木栓層由4～5列細(xì)胞組成，多呈扁平狀，類長方形，排列整齊，往往多層相迭，細(xì)胞壁木栓化，呈褐色。皮層較寬，為數(shù)層薄壁細(xì)胞組成，細(xì)胞呈長卵圓形、圓形以及不規(guī)則多角形，排列疏松，有明顯的細(xì)胞間隙，偶見大型裂隙，斷續(xù)排列成環(huán)。韌皮部較狹窄，細(xì)胞小而不規(guī)則。形成層為2～3列排列整齊的扁平細(xì)胞組成。木質(zhì)部較寬，約占2/3左右，導(dǎo)管多單個散在，偶見幾個相連，木射線明顯。見圖1。

1.木栓層；2.皮層；3.韌皮部；4.形成層；5.木質(zhì)部

3.2.2 莖橫切面 莖的橫切面略呈圓柱形，有六條縱棱，棱角處為厚角組織。表皮由一列排列整齊緊密、扁平的細(xì)胞組成，外壁稍厚，常見由4～5個細(xì)胞組成的非腺毛。皮層所占比例較小，細(xì)胞大，壁薄，多為球形或橢圓形，排列疏松，靠近表皮的細(xì)胞具有葉綠體，有斷續(xù)排列成環(huán)狀的不規(guī)則小型裂隙。維管束為外韌型，呈放射狀排列，韌皮部較狹窄，約占莖的1/8，由篩管、伴胞、韌皮薄壁細(xì)胞和韌皮纖維組成，細(xì)胞小且不規(guī)則。木質(zhì)部比例較大，約占莖的1/4，由導(dǎo)管、管胞、木薄壁細(xì)胞和木纖維組成。髓部較寬，約為莖的1/2，呈類三角形，常有針晶束分布。見圖2。

1.表皮；2.厚角組織；3.裂隙；4.皮層；5.韌皮部；6.木質(zhì)部；7.髓

3.2.3 葉片橫切面 上下表皮細(xì)胞各一列，排列緊密，均有氣孔和腺鱗分布，上表皮細(xì)胞較大，外壁厚，多不規(guī)則，下表皮細(xì)胞類方形。柵欄組織1列，細(xì)胞內(nèi)含有大量葉綠素，與海綿組織分化明顯。主脈維管束為半月形，外韌型，維管束上下方均有厚角組織，木質(zhì)部位于向莖面，導(dǎo)管呈放射狀徑向排列。見圖3。

1.非腺毛；2.厚角組織；3.下表皮；4.韌皮部；5.木質(zhì)部；6.海綿組織；7.氣孔；8.柵欄組織；9.上表皮；10.腺鱗

3.2.4 葉表皮片 上下表皮細(xì)胞不規(guī)則，側(cè)壁(垂周壁)呈波浪狀，彼此互相嵌合，有腺鱗分布，由6～8個細(xì)胞組成；上表皮氣孔器為不定式，下表皮為不等式，偶見直軸式。見圖4。

A B

A.上表皮;B.下表皮 1.腺鱗;2.氣孔;3.表皮細(xì)胞

圖4野甘草葉片上下表皮片

3.2.5 粉末 灰綠色，淀粉粒多為單粒淀粉，偶見復(fù)粒，直徑10～30 μm。導(dǎo)管多為螺紋導(dǎo)管，直徑20～34 μm。纖維有2種，一種細(xì)長，壁厚，另一種壁薄，兩頭稍尖，直徑12～32 μm。腺鱗成群存在，腺頭由6～8個細(xì)胞組成，直徑85～120 μm。非腺毛偶見，由3～4個細(xì)胞組成。可見木栓細(xì)胞碎片，細(xì)胞呈正方形及多角形。見圖5。

1.淀粉粒;2.螺紋導(dǎo)管;3.非腺毛;4.腺鱗;5.纖維管胞;6.纖維;7.木栓細(xì)胞

3.3 理化鑒別

3.3.1 顯色試驗

3.3.1.1 生物堿類成分鑒別 取本品根部粉末6 g，用40 mL乙醇加熱回流2 h，過濾，濾液加熱濃縮至10 mL過濾，濾液用3倍量水稀釋后加30 mL乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯層，水浴蒸干，殘渣用4 mL乙醇溶解。溶液置于3支試管中，1號試管加入2 mL苦味酸試劑，有黃色沉淀產(chǎn)生；2號試管加入2 mL碘化鉍鉀試劑，有黃棕色沉淀產(chǎn)生；3號試管加入2 mL碘-碘化鉀試液中，有紅棕色沉淀產(chǎn)生。

3.3.1.2 黃酮類成分鑒別 取本品地上部分粗粉10 g，用 60 mL 95%乙醇加熱回流2 h后蒸餾水稀釋至含醇量為70%，濾過，濾液用石油醚萃取，水浴蒸干，加30 mL 50%乙醇溶解，25 mL水飽和正丁醇洗滌2次，取水層水浴蒸干，加4 mL乙醇溶解[7]。吸取0.5 mL上述樣品溶液乙醇稀釋至2 mL，加少量的鎂粉，滴入2滴濃鹽酸，溶液顯紅色。用毛細(xì)管吸取上述樣品溶液約4 μL，點于濾紙上，晾干，噴1%的三氧化鋁乙醇試液，熱風(fēng)吹干，置于紫外365 nm下觀察，顯鮮黃色熒光。

3.3.2 薄層色譜鑒別

3.3.2.1 黃酮類薄層層析 ①根部供試液制備：取根部粉末2 g，用20 mL乙醇加熱回流2 h，過濾，濾液加熱濃縮至約2 mL；②地上部供試液制備：取對照樣品粉末3 g，用30 mL乙醇加熱回流1 h過濾，揮干濾液，用2 mL甲醇溶解；③對照樣品制備：取對照樣品粉末4 g，具體方法參考3.3.1.2。取上述供試液各1 μL，點于同一聚酰胺薄層板上，以乙酰丙酮-乙醇-丁酮-水(1∶3∶3∶13)為展開劑，展開，晾干，噴1%三氯化鋁乙醇試液，吹干，置紫外燈下檢視。②和③供試液在Rf值為0.53、0.33處呈現(xiàn)藍(lán)色熒光斑點，Rf值為0.56、0.47、0.40處呈現(xiàn)亮黃色熒光斑點，①供試液黃色熒光斑點不明顯。

3.3.2.2 生物堿類薄層層析 根部及地上部供試液制備方法參考3.3.2.1；對照樣品制備同3.3.1。取上述供試液各8 μL，點于同一聚酰胺薄層板上，氯仿-環(huán)己烷-甲醇(19∶1.5∶1)為展開劑，展開，取出晾干。①依次噴碘化鉍鉀和亞硝酸鈉乙醇試液，105 ℃烘至斑點清晰[8]，根部及對照樣品在Rf值0.35、0.65處呈現(xiàn)紅棕色斑點，地上部分未見斑點；②取同條件下展開后的薄層色譜，噴1%鉬酸鈉硫酸試液，105 ℃烘至斑點清晰[8]，3種供試液均在Rf值0.64處呈現(xiàn)藍(lán)色斑點，根部和對照樣品更清晰。

4 結(jié)論與討論

顯微鑒別中，野甘草莖的髓部存在草酸鈣針晶束。葉片為異面葉，上下表皮均有腺鱗和非腺毛存在，氣孔軸式為不定式和不等式。理化鑒別初步判斷野甘草的主要化學(xué)成分為生物堿、黃酮類化合物。其中，生物堿類主要分布在根部，黃酮類主要分布在地上部分。

[1]中藥大辭典編纂委員會.中藥大辭典[M].下冊.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2006：2954.

[2]李宗友，倪暮云.野甘草的化學(xué)、藥理[J].國外醫(yī)學(xué)中醫(yī)中藥分冊，1994，16(2)：11～14.

[3]盧小曼，陳建華.野甘草痱子水的制備與臨床應(yīng)用[J].廣東藥學(xué)，1996，(2)：56.

[4]蔡幼清譯.野甘草提取物和粘霉烯酮在嚙齒動物中的鎮(zhèn)痛和抗炎特性[J].國外醫(yī)學(xué)中醫(yī)中藥分冊，1994，16(4)：42.

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[6]Hayashi T，Kawasaki M，Miwa Y.Antiviral agents of plant origin.III.Scopadulin，a novel tetracyclic diterpene from Scoparia dulcis L[J].Chem Pharm Bull(Tokyo)，1990，38(4)：945～947.

[7]鄒海艦，唐自明，韋群輝，等.鳳尾茶的生藥研究[J].中國民族民間醫(yī)藥雜志，1999，6：359～363.

[8]匡海學(xué).中藥化學(xué)[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2003：323～327.