肌酐與血脂試劑對總膽汁酸檢測的影響及對策

周 寧，祝 峰，劉金波

肌酐與血脂試劑對總膽汁酸檢測的影響及對策

周 寧，祝 峰，劉金波

目的探討肌酐(creatinine，CR)、膽固醇(cholestoenone，TC)、三酰甘油(triacylglyceride，TG)和高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)試劑對血清總膽汁酸(total bile acid，TBA)檢測結果的影響。方法先單獨檢測30次混合血清標本TBA含量;之后檢測CR、TC、TG、HDL試劑對TBA檢測結果的影響及其持續時間;設定特殊清洗程序后再檢測CR、TC、TG、HDL試劑對TBA檢測結果的影響。結果CR、TC、TG、HDL試劑對TBA檢測有明顯的交叉污染。結論合理安排檢測順序及設定特殊清洗程序能有效地消除CR、TC、TG、HDL試劑對TBA檢測的影響。

總膽汁酸;全自動生化分析儀;試劑;交叉污染

全自動生化分析儀具有微量、快速、精密度高、準確性好等優點，但在臨床運用中，由于生化分析儀共用試劑針、攪拌棒及比色杯等易引起交叉污染。筆者在工作中發現常規生化多項目檢測中TBA出現假性升高現象，復查后結果正常，提示部分檢測項目對TBA的檢測可能存在交叉污染，經分析后初步認為CR、TC、TG、HDL對TBA的檢測存在影響。本研究進一步探討以上項目對TBA的檢測影響并提出改進措施。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 羅氏Modular生化免疫一體分析系統，美國羅氏公司生產;堿性清洗液、酸性清洗液和 CR(酶法)、TC、TG、HDL、TBA 試劑為羅氏公司原廠配套產品。

1.2 混合血清 取當天本院100份正常體檢者血清混合備用。

1.3 方法

1.3.1 參數設定 各檢測項目按試劑生產廠家提供的參數進行設定。

1.3.2 對照組 連續檢測混合血清TBA 30次，計算TBA的均值作為參考值。

1.3.3 檢測 CR、TC、TG、HDL 試劑中的 TBA 含量

為去除基質效應，將CR、TC、TG、HDL試劑(雙試劑按比例混合)與混合血清按1∶4混合作為樣本檢測TBA含量;對照組采用生理鹽水與混合血清按

1∶4混合。

1.3.4 檢測順序 按 CR→TBA→TBA→TBA→TBA→TBA、TC→TBA→TBA→TBA→TBA→TBA、TG→TBA→TBA→TBA→TBA→TBA、HDL→TBA→TBA→TBA→TBA→TBA的順序分別先檢測混合血清中CR、TC、TG、HDL含量，再檢測TBA含量，每個項目重復檢測30次。

1.3.5 特殊清洗程序和檢測順序 每次試劑針吸樣完成后，先用堿性清洗液清洗，再用去離子水進行清洗;檢測前用酸性清洗液與堿性清洗液對比色杯進行清洗。用混合血清先檢測CR再檢測TBA，重復檢測20次。TC、TG、HDL按以上程序重復。

2 結 果

2.1 CR、TC、TG、HDL試劑對 TBA直接干擾 混合血清中加入CR、TC、TG、HDL試劑后時行TBA測定，共檢測30次取其均值(表1)。

2.2 CR、TC、TG、HDL 試劑對 TBA 測定中的干擾及持續時間 先測定CR 1次后連續測定TBA 5次，再將以上程序重復30次。TC、TG、HDL按以上程序重復。結果表明，CR、TC、TG、HDL試劑對TBA測定存在明顯干擾，其中以HDL對TBA檢測干擾影響最大，持續時間最長，經過5次測定后仍存在統計學差異(P＜0.05，表2)。

表1 混合血清加入CR、TC、TG、HDL試劑后TBA檢測結果(±s)

表1 混合血清加入CR、TC、TG、HDL試劑后TBA檢測結果(±s)

組別±s t P對照組5.11 ±0.29 － －加入 CR試劑 161.37 ±5.32 160.64 P ＜0.05加入 TC 試劑 85.66 ±2.21 207.15 P ＜0.05加入 TG試劑 112.56 ±2.66 219.95 P ＜0.05加入 HDL 試劑 261.84 ±12.84 109.49 P＜0.05

表2CR、TC、TG、HDL試劑對TBA測定的干擾及持續時間(±s)

表2CR、TC、TG、HDL試劑對TBA測定的干擾及持續時間(±s)

注:與對照組比較，①P ＜0.05

組別檢測次數1次 2次 3次 4次 5次對照組6.43 ±0.42 － － － －先測定 CR 41.20±2.63① 23.26 ±1.34① 12.60 ±0.76① 8.72±0.46① 6.48±0.45先測定 TC 23.85±1.32① 12.74 ±1.18① 7.33 ±0.63① 6.45±0.42 6.43±0.42先測定 TG 26.42±1.36① 14.81 ±1.17① 8.98 ±0.67① 6.56±0.45 6.43±0.42先測定 HDL 62.39 ±3.74① 36.77 ±2.38① 19.68 ±1.26① 9.69±0.72① 6.92±0.56①

2.3 設定特殊清洗程序與檢測程序 采取特殊清洗程序與檢測程序后，TBA檢測結果與對照組比較，差異無統計學意義，表明特殊清洗程序可以有效地去除CR、TC、TG、HDL所引起的交叉污染(表3)。

表3 采取特殊清洗程序與檢測程序后TBA檢測結果(±s)

表3 采取特殊清洗程序與檢測程序后TBA檢測結果(±s)

組別±s t P對照組6.43 ±0.42 － －先測定 CR 6.62 ±0.53 1.26 ＞0.05先測定 TC 6.44 ±0.48 0.07 ＞0.05先測定 TG 6.42 ±0.49 0.07 ＞0.05先測定HDL 6.64 ±0.63 1.24 ＞0.05

3 討 論

生化分析儀廣泛使用給檢驗人員帶來工作便利的同時也產生了交叉污染的新問題，包括樣品針、試劑針、攪拌針、比色杯污染。部分全自動生化分析儀在檢測過程中吸取不同樣本與試劑后，樣本針和試劑針僅用去離子水進行沖洗，很難完全清洗干凈，如果前一樣本某項待檢測物含量較高，或前一檢測項目試劑中含有后一檢測項目的成分，或含有對后一檢測項目有干擾的物質時，就會不可避免地會產生攜帶污染的問題［1］。

TBA以膽固醇為原料在肝細胞內合成，協助脂類物質的消化吸收，能反映肝臟的代謝水平，因此，準確測定TBA含量對疾病的診斷有重要的臨床意義［2］。本研究通過 CR、TC、TG、HDL 試劑作為樣本進行檢測，發現部分試劑中可能含有TBA或者干擾TBA檢測的成分，其中HDL試劑中TBA的檢測結果高達261.84μmol/L。引起TBA檢測結果升高的原因，可能是CR試劑中含有活性較高的抗壞血酸氧化酶，影響了 TBA 氧化還原過程［3］。文獻［1，3］認為，TC、TG、HDL試劑中含有的膽酸鈉具有與膽汁酸相同的反應特性，從而對TBA的檢測產生干擾;也有研究認為，TC、TG、HDL試劑中含有高濃度的TBA成分［4］，但本研究試劑說明書未發現其含有TBA的成分，可能與不同生產廠家其生產配方和工藝不同有關。

本研究表明，先行測定CR、TC、TG、HDL后再進行TBA測定會對檢測產生極大的干擾，TBA檢測值較對照組檢測結果上升了4～10倍。各種不同的試劑對TBA檢測產生干擾的持續時間也不同，其中HDL影響時間最長，連續檢測5次后仍然存在明顯干擾。設定特殊清洗程序與檢測程序后再進行檢測，與對照組比較，其他各檢測結果未發現有統計學差異，進一步證實，致TBA假性升高的原因是試劑間的攜帶污染所引起。

目前，部分生化分析儀已采用通過多管道噴嘴加樣、超聲混勻等多種方式，可有效地避免交叉污染。鑒于試劑成分的復雜性，部分廠家由于保密等原因，其說明書不能如實反映試劑成分，故開設新增檢驗項目前應做攜帶污染試驗，防止交叉污染發生。文獻［5］表明，在做好儀器日常保養工作的同時，采取特殊清洗程序與檢測程序可以減少或清除攜帶污染事件的發生，但由于部分生化分析儀無此功能，執行合理的檢測順序也可以減少攜帶污染引起的檢測誤差［6］。筆者認為，TBA 檢測應在 CR、TC、TG、HDL檢測之前進行，或在檢測結束后進行多個其他檢測項目檢測后方可進行。如能兩者相配合，既采取特殊清洗程序與檢測程序，又能按一定順序合理地安排檢測項目，則能有效地去除交叉污染，保證檢測結果的準確可靠。

［1］崔 軍.三酰甘油和總膽固醇試劑對總膽汁酸檢測結果的影響［J］.華西醫學，2010，25(7):1328 －1329.

［2］謝小兵，李 萍，夏 歷，等.血脂與谷丙轉氨酶試劑對總膽汁酸檢測的攜帶污染觀察［J］.實用預防醫學2008，15(4):1246 －1247.

［3］朱武軍，邰 飛，邵燕麗，等.循環酶法測定總膽汁酸試劑交叉污染及預防措施［J］.國際檢驗醫學雜志，2011，32(9):990 －991.

［4］丁雙雙，汪 浩，沈 霞.HDL－C試劑干擾血清膽汁酸測定結果的原因分析與對策［J］.檢驗醫學，2011，26(3):215－216.

［5］顧光煜，郭 群，高 磊.肌酐和總膽固醇試劑對總膽汁酸測定結果的影響［J］.臨床檢驗雜志;2005(23)5:361－362.

［6］吳 健.全自動生化分析儀測定順序對檢測結果的影響［J］.貴州醫藥，2004，28(2):124 －125.

Analysis of effect of creatinine and blood lipid reagents on detection of total bile acid

ZHOU Ning，ZHU Feng，and LIU Jinbo.Jiangsu Provincial Corps Hospital，Chinese Police’s Armed Police Forces，Yangzhou 225003，China

ObjectiveTo study the effect of creatinine，triglyceride，cholesterol and high－density lipoprotein reagents on determination results of serum total bile acid.Methods WTBZTBA content of 30 serum samples(mixed serum)was independently detected.The impact of CR，TC，TG，and HDL reagents on detection of TBA was investigated and detected again after special cleaning procedures.Results There was clear cross－contamination in detection of TBA using CR，TC，TG，HDL reagents.Conclusions

Rational detection order and special testing and cleaning procedures can effectively eliminate the effect of CR，TC，TG，and HDL reagents on TBA examination.

total bile acid;full automatic biochemical analyzer;reagent;cross contamination

R446.1

周 寧，男，1964年出生。本科學歷，主任技師。主要從事醫院管理和臨床檢驗工作。

225003 揚州，武警江蘇總隊醫院

(2012－01－16收稿 2012－08－01修回)

(責任編輯 尤偉杰)