HPLC法測(cè)定三九胃泰顆粒中芍藥苷的含量*

林月英，董憲鳳

(天津市大港區(qū)藥品檢驗(yàn)所，天津 300270)

HPLC法測(cè)定三九胃泰顆粒中芍藥苷的含量*

林月英1，董憲鳳2

(天津市大港區(qū)藥品檢驗(yàn)所，天津 300270)

目的:建立HPLC法測(cè)定三九胃泰顆粒中芍藥苷的含量。方法:采用HPLC方法，Diamonsil C18分析柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，以異丙醇 －甲醇 －醋酸 －水(2∶25∶2∶71)為流動(dòng)相，流速0.8 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm，柱溫30℃。結(jié)果:芍藥苷在0.211 6 ～5.29 μg范圍內(nèi)線性良好(r=0.999 9)，平均回收率在97.43%，RSD 為0.65%(n=9)。結(jié)論:本方法靈敏準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，適用于三九胃泰顆粒中芍藥苷的含量測(cè)定。

三九胃泰顆粒，芍藥苷，HPLC

三九胃泰顆粒是由白芍、三叉苦、九里香、兩面針、木香和黃芩等8味中藥材組成，具有清熱燥濕、行氣活血、柔肝止痛的作用，用于濕熱內(nèi)蘊(yùn)、氣滯血瘀所致的胃痛，癥見脘腹隱痛、飽脹反酸、惡心嘔吐、嘈雜納減等癥。現(xiàn)有的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)［1］為檢測(cè)黃芩苷的含量。為了更加有效的控制該藥的質(zhì)量，對(duì)此方中芍藥苷含量進(jìn)行測(cè)定，利用高效液相色譜法定量，方法操作簡(jiǎn)便易行，具有分離好、靈敏度高、穩(wěn)定性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，適用于三九胃泰顆粒的質(zhì)量控制。

1 儀器與試藥

島津高效液相色譜儀 LC－2010AHT，島津高效液相色譜儀工作站LC－Solution。芍藥苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110736－201035);三九胃泰顆粒(規(guī)格:20 g/袋，湖南三九南開制藥有限公司，批號(hào)1104271N、1201006H、1110022H);異丙醇、甲醇和醋酸均為色譜純，水為純化水。

2 方法和結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱為Diamonsil C18分析柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，流動(dòng)相:異丙醇 － 甲醇 － 醋酸 －水(2∶25∶2∶71)，流速為0.8 ml/min，柱溫30 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為 230 nm，進(jìn)樣量 20 μl［2］。

2.2 溶液制備

2.2.1 對(duì)照溶液的制備 精取芍藥苷對(duì)照品10.58 mg至50 ml棕色量瓶中，加甲醇溶解稀釋至刻度，制成芍藥苷對(duì)照品溶液。

2.2.2 樣品溶液的制備 取“裝量差異”項(xiàng)下本品，研細(xì)，混勻，精取約 1.1 g，精密加入甲醇 25 ml，稱定重量，超聲處理30 min，放冷，稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，作為供試品溶液。

2.2.3 陰性對(duì)照溶液制備 按處方工藝制備不含白芍的陰性樣品，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法制成陰性對(duì)照品溶液。

2.3 專屬性考查 分別精取對(duì)照品溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，結(jié)果陰性對(duì)照品溶液無干擾，見圖1。

圖1 對(duì)照品(A)供試品(B)陰性對(duì)照品(C)HPLC色譜圖

2.4 線性考查 精取 1、5、10、15、20 和 25 μl的對(duì)照品溶液，在“2.1”項(xiàng)下色譜條件下分別進(jìn)樣，以峰面積為橫坐標(biāo)，樣品濃度為縱坐標(biāo)進(jìn)行回歸，回歸方程為Y=3.615 5 ×105X+1.094 4 ×104(r=0.999 9)，結(jié)果芍藥苷在 0.211 6～5.29 μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取一定濃度的對(duì)照品溶液，按上述色譜條件連續(xù)進(jìn)樣5次，進(jìn)樣量為20 μl，測(cè)得芍藥苷峰面積，RSD為0.55%。

2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn) 取同批號(hào)的樣品1.1 g，按樣品配制方法制備5份，進(jìn)樣量為20 μl，測(cè)定芍藥苷的含量，RSD 為 1.14%(n=5)。

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取同一濃度的供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件于 0、1、2、4、8、12 及 24 h 分別進(jìn)樣20 μl進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果表明供試品在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 回收率試驗(yàn) 取已知含量批號(hào)1104271N的樣品9份，精密稱定，至25 ml量瓶中，分別加入芍藥苷對(duì)照品，依“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，結(jié)果平均回收率為97.43%，RSD 為 0.65%，見表 1。

表1 芍藥苷加樣回收試驗(yàn)結(jié)果

2.9 樣品測(cè)定 取3批三九胃泰顆粒樣品，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶液和樣品溶液各20 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測(cè)定峰面積，結(jié)果見表2。

表2 三九胃泰顆粒中芍藥苷的測(cè)定結(jié)果(n=3)

3 討論

3.1 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇 芍藥苷對(duì)照品溶液，以試劑為空白，用紫外分光光度計(jì)選擇波長(zhǎng)，在190～400 nm范圍內(nèi)掃描，結(jié)果芍藥苷在230 nm處有最大吸收，故采用230 nm波長(zhǎng)作為芍藥苷的測(cè)定波長(zhǎng)。

3.2 本方法對(duì)樣品流動(dòng)相進(jìn)行了探索，將異丙醇－甲醇－醋酸－水(2∶25∶2∶71)、甲醇－0.3%磷酸溶液(25∶75)、乙腈－水(15∶85)三種流動(dòng)相進(jìn)行比較，結(jié)果以異丙醇－甲醇－醋酸－水(2∶25∶2∶71)為流動(dòng)相分離度最好。

1 中國(guó)藥典.一部.2010:452，506

2 胡娟娟，張德偉，李潔玉.高效液相色譜法測(cè)定寶寶樂顆粒中芍藥苷含量.中國(guó)藥業(yè)，2008，17(17):24

R927.2

A

1006-5687(2012)04-0012-02

2012-04-01