蘋果葉片總蛋白提取及其雙向電泳分析

摘要: 蛋白質提取方法和電泳條件的建立是蛋白質組學研究中雙向電泳分析的關鍵。通過比較不同提取方法，包括酚/SDS 抽提、TCA-丙酮沉淀法、甲醇/醋酸銨沉淀法以及改良HB-酚抽提方法。此外，還優化了樣品上樣量、等電聚焦程序設置等條件。從所得2-D圖譜分離效果來看，改良HB-酚抽提方法所得蛋白點數最多，2-D圖譜背景清晰、分離效果好，明顯優于其他3種方法。300 μg上樣量可作為蘋果葉片總蛋白2-DE分析的理想的上樣量，同時優化了等電聚焦程序，最終得到的2-D圖譜分離效果較為理想。該研究的開展也為蘋果葉片蛋白質組學后續研究奠定了基礎。