雜環取代苯并[4,5]呋喃[3,2-d]嘧啶類衍生物的合成及其抗癌活性*

趙 云， 歐陽貴平， 杜才富， 秦信蓉， 金林紅， 袁 凱

(1. 貴州省油菜研究所，貴州 貴陽 550008; 2. 貴州大學 精細化工研究開發中心 綠色農藥與 農業生物工程國家重點實驗室培育基地 教育部綠色農藥與生物工程重點實驗室，貴州 貴陽 550025)

苯并[4,5]呋喃[3,2-d]嘧啶及其衍生物是一類廣譜生物活性化合物，如抗炎[1]、抗菌、抗腫瘤[2，3]等。近年來，苯并[4,5]呋喃[3,2-d]嘧啶類化合物在有機合成和醫藥上倍受關注，如SuperGen 公司研制的抗癌候選藥物、酪氨酸激酶抑制劑MP470(Chart 1)，具有廣譜抗癌活性，與化療和放療具有協同作用，已經進入一期臨床試驗。

為了尋找具有高效抗癌活性的新化合物，本文在前期工作[4，5]的基礎上，以MP470為先導化合物，將1,3,4-三唑等引入苯并[4,5]呋喃[3,2-d]嘧啶中，合成了7個未見文獻報道的雜環取代苯并[4,5]呋喃[3,2-d]嘧啶類衍生物(4a～4e,5f和5g, Scheme 1)，其結構經NMR, IR和MS表征。

or

Scheme1

Chart1

初步生物活性測試結果表明，4和5對人前列腺癌細胞PC3都具有一定的抑制活性，其中4e的抗癌活性最為顯著，接近對照藥品阿霉素。

本工作對苯并[4,5]呋喃[3,2-d]嘧啶衍生物進行結構修飾以提高其抗癌活性，為篩選出具有高抗癌活性的化合物奠定了一定的技術基礎。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

X-4型數字顯示顯微熔點儀(溫度計未校正);JOEL-ECX 500 Hz型核磁共振儀(CDCl3為溶劑,TMS為內標);VECTOR 22型紅外光譜儀(KBr壓片);Agilent 1100 MSD-Trap-VL型質譜儀。

1按文獻[6,7]方法合成；其余所用試劑均為國產化學純或分析純。

1.2 4和5的合成(以4a為例)

在三口瓶中加入(1-苯基)-5-(2-氯-苯基)-2-巰基-1,3,4-均三唑(2a) 143.5 mg(0.5 mmol),乙腈10 mL和無水碳酸鉀140 mg(1 mmol),攪拌下于室溫反應3 min;加1100 mg(0.5 mmol),于78 ℃～79 ℃反應9 h。旋蒸脫溶，殘余物用水洗除碳酸鉀，抽濾，濾餅用乙酸乙酯重結晶得4a。

用類似方法合成4b～4e,5f和5g。4和5的實驗結果見表1,表征數據見表2。

表 1 合成4和5的實驗結果

*ESI-MSm/z{[M+Na]+}

1.3 體外抗癌活性測試

培養環境:飽和濕度,37 ℃, 5%CO2。種細胞在96孔板上(2 000細胞/孔)培養24 h;去除上清廢液，在殘余物中加帶藥培養基(供試藥預溶在DMSO中，使用時用血清培養基稀釋成10 μmol·L-1) 200 μL/well，培養72 h;去除上清廢液，在殘余物中加0.5 mg·mL-1MTT溶液100μL/well,培養4 h;加10%十二烷基硫酸鈉溶液100 μL/well，培養12 h。冷卻至室溫，靜置20 min～30 min后測其吸光度值(OD)，并按下式計算供試藥的抑制率(%)。

表 2 4和5的表征數據

續表2

2 結果與討論

每樣本用藥劑量重復六個孔，每個實驗重復三次，取平均值，實驗結果見表3。由表3可知，在用藥劑量為10 μmol· L-1時，4b和4e對PC3的抑制率分別為59.2%和88.1%;4e的體外抗癌活性比較接近對照藥阿霉素(93.5%)，總體上4和5對PC3癌細胞都具有一定的抑制效果。

表 3 4和5對PC3癌細胞的抑制率*

*c10 μmol·L-1

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