屋塵螨變應原結膜激發試驗的影響因素分析

李曉鸞 孟文霞 張小平 王燕 劉艷梅 孫長春

結膜激發試驗(CPT)是一種在人為嚴格控制下用少量可疑致敏物激發臨床癥狀，以觀察試驗物與變應病相關性的方法，易于操作及觀察。變態反應科近年來開展了大樣本屋塵螨變應原結膜激發試驗，進行了詳細的觀察，分析屋塵螨變應原結膜激發試驗(CPT)的主要影響因素，為臨床工作中客觀評估屋塵螨變應原CPT結果提供依據。

1 資料與方法

1．1 一般資料 選擇2008年1月至2009年12月在河北醫科大學第一醫院變態反應科就診的符合變應性鼻炎、結膜炎和(或)支氣管哮喘診斷的患者357例，其中男174例，女183例;年齡4～72歲，平均年齡(38±16)歲;所有患者均有病史以及皮膚點刺試驗提示可疑對屋塵螨過敏。

1．2 方法

1．2．1 試驗前期準備:試驗避開患者急性發作期及飲酒后;試驗前未進行免疫治療;試驗前2周未做過結膜激發試驗;試驗前停用眼部局部用藥2周以上，停用全身用抗組胺藥物1周及糖皮質激素類藥物2周以上;遇有急性上呼吸道感染、變應性結膜炎以外的眼部疾患、佩戴角膜接觸鏡者待愈后2周進行結膜激發試驗。

1．2．2 屋塵螨變應原 CPT:專業檢查室，室溫約20℃，患者進入室內休息10 min，取端坐位，檢查并記錄雙眼基礎情況，確定無急性結膜疾病，雙眼結膜狀況無明顯差異后進行激發試驗。以微量移液管取10 μl陰性對照液(由ALK公司提供除無屋塵螨變應原蛋白外所含成分與變應原試劑相同)于患者一眼中，隨即另以微量移液管取10 μl變應原試劑(為ALK公司提供屋塵螨變應原試劑30 HEP/2 ml)于另一眼下結膜囊中?；颊唛]目頭后仰30 s，于激發后5、10、15 min參照北京協和醫院評估標準觀察并記錄。對照側出現明顯速發相反應或有遲發相反應者另作記錄，不列入統計范圍。

1．2．3 屋塵螨變應原特異性免疫球蛋白E(d1-sIgE)檢測:采用Pharmacia公司Uni CAP系統-100型進行熒光酶聯免疫法測定(所有試劑均為南京美瑞公司提供)，在Uni CAP系統-100型中自動完成。

1．3 觀察及評價項目 所有入選者均進行屋塵螨變應原CPT，采用北京協和醫院眼結膜激發試驗評估標準分別記錄為－、+、++、+++、++++，以++及以上為陽性。結膜激發試驗操作由我科醫師專人進行，結果觀察記錄由我科另一醫師(第3方)進行雙盲評判。

1．4 統計學分析 應用SPSS 13．0統計軟件，計數資料采用χ2檢驗，相關性采用pearson相關分析，P ＜0．05為差異有統計學意義。

2 結果

357例患者，均有可疑屋塵螨過敏病史。屋塵螨變應原CPT結果陽性率為20．7%(74/357)，結合專業知識選擇性別、年齡、累及器官、病程、受試季節等可能影響屋塵螨變應原CPT結果的因素，賦值采用pearson相關分析法進行分析，見表1、2。

表1 屋塵螨變應原結膜激發試驗可疑影響因素的定義及賦值

3 討論

變態反應性疾病已成為新世紀的流行病，發病率超過20%，且發病率呈逐年增高趨勢，變態反應科學越來越受到重視。變態反應性疾病雖可以表現在不同器官發病，究其病因就是變態反應在局部的表現，正確的病因診斷是有效治療的前提。激發試驗是一種在人為嚴格控制下用少量可疑致敏物激發臨床癥狀，以觀察試驗物與變應病相關性的方法。結膜激發試驗能模擬自然發病狀態，為診斷相關疾病提供了多時相、多角度觀察機會，其敏感性、特異性及有效性已得到許多學者的共識［1－5］，但是目前國內缺乏規范化、客觀化的操作以及評估的統一標準。

表2 各可疑影響因素與屋塵螨變應原CPT的pearson相關分析

CPT的本質就是模擬結膜接觸變應原的自然狀態，人為制造出由一定量變應原引起的變應性結膜炎的急性發作，是IgE介導的Ⅰ型變態反應。IgE主要由呼吸道、消化道和扁桃體部位的黏膜下漿細胞產生。IgE最明顯的特性是親細胞性，能牢固而持久地吸附在細胞表面，局部的肥大細胞和血液中的嗜堿細胞是IgE的靶細胞。人結膜上皮含有豐富的血管和許多特殊的炎癥和免疫細胞，正常情況下結膜固有層每平方毫米含5 000～20 000個肥大細胞［5］，其中瞼結膜高于球結膜。從本研究結果推斷，由于IgE具有親細胞性，結膜局部肥大細胞結合的特異性IgE與血清中游離特異性IgE存在相對平衡，就是說結膜局部肥大細胞結合的特異性IgE密度取決于血清特異性IgE水平，患者的性別、年齡、受累器官、病程、受試季節的差異在影響血清中游離特異性IgE水平的同時也影響結膜局部肥大細胞結合的特異性IgE密度。以此解釋屋塵螨變應原CPT的結果與血清特異性IgE水平明顯相關(P＜0．05)，以及本研究統計結果顯示患者的性別、年齡、受累器官、病程、受試季節均與屋塵螨變應原CPT結果無相關(P＞0．05)，其中受累器官一項與我們先前資料的結果相符［6］，由此推斷，結膜上皮肥大細胞上結合特異性IgE的情況只受血清特異性IgE水平的影響，不受性別、年齡、受累器官、病程、受試季節的差異的影響，判定屋塵螨變應原CPT結果時不需考慮這些因素的存在。

綜上所述，我們認為屋塵螨變應原CPT不受患者的性別、年齡、受累器官、病程、受試季節的影響，判定屋塵螨變應原CPT結果時不需考慮這些因素的存在。

1 韓德民主編．變應性鼻炎．第1版．北京:人民衛生出版社，2007．197-203．

2 Bernstein IL，Li JT，Bernstein DI，et al．Allergy Diagnostic Testing:An updated practice parameter．Ann Allergy Asthma Immunol，2008，100:1-148．

3 Chelminska M，Niedoszytko M，Jassem E．Clinical value of conjunctival allergen challenge in diagnosing allergic conjunctivitis related to latex．J Allergy Clin Immunol，2007，20:207-208．

4 Garcla-Medina JJ，Garcla-Medina M，Zanon-Moreno VC，et al．Conjunctival provocation test for the diagnosis of ocular hypersensitivity to Chlorobutanol．Cornea，2007，26:94-97．

5 Mortemousque B，Fauquert JL，Chiambaretta F，et al．Conjunctival provocation test:practical recommendations for the diagnosis of allergic conjunctivitis．J Fr Ophtalmol，2006，29:837-846．

6 李曉鸞，孟文霞，王燕，等．屋塵螨變應原結膜激發試驗在上、下氣道變態反應性疾病的臨床比較．河北醫藥，2010，32:663-664．