HPLC測定女貞子及其制劑益腎靈顆粒中紅景天苷的含量

2011-11-01 03:57:10李輝張艷徐漢斌邵曉霞

中國現代藥物應用 2011年18期

李輝張艷徐漢斌邵曉霞

中藥女貞子為木犀科植物女貞(Ligustrum lucidum Ait.)的干燥成熟果實，是我國傳統的扶正固本藥物，含多種活性成分，其中紅景天苷亦為其成分之一［1］。紅景天苷具有擴張阻力血管、抗心肌缺血［2］、抗纖維化等多種藥理作用［3］。但由于紅景天藥材資源匱乏，價格昂貴。女貞子藥材主產于江蘇、河南、山西、甘肅等地，極易得到，且價格便宜。如能對女貞子中的紅景天苷進行有效利用，其開發價值不言而喻。益腎靈顆粒為《中國藥典》2010版一部品種［4］，含有梔子、女貞子等多味藥材。其中紅景天苷的TLC鑒別作為該品種錄入《中國藥典》2010版時的質量標準中新增的鑒別項目，由此可以看出女貞子中紅景天苷的成分正在逐漸被認可。為此，我們對女貞子藥材和益腎靈顆粒中所含的紅景天苷進行含量測定。

1 儀器、試劑與樣品

1.1 儀器 756-MC型分光光度計，KQ-50B型超聲波振蕩儀，FW80微型高速萬能粉碎機，島津LC-10ATVP高效液相色譜儀，檢測器SPD-M10AVP。

1.2 試劑與樣品紅景天苷對照品:購自中國藥品生物制品檢定所(編號110810-200404，供含量測定用);女貞子藥材、益腎靈顆粒樣品:南京中山制藥有限公司提供。試藥:均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件色譜柱:Hypersil C18柱(250 mm×4.6 mm);流動相:甲醇-水(15∶85);流速:1.0 ml/min;進樣量:10 μl;檢測波長:275 nm。

1.2 女貞子藥材供試品溶液的制備取女貞子藥材粉成細粉，粉末過3號篩。精密稱取藥材粉末約2 g，加甲醇50 ml，超聲處理30 min，過濾，濾液蒸干后，殘渣用流動相使溶解，移至10 ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，作為藥材供試品溶液。

1.3 益腎靈顆粒供試品溶液的制備取本品粉成細粉，精密稱取粉末約20 g，按照“女貞子藥材供試品溶液的制備”方法制備，作為制劑供試品溶液。

1.4 對照品溶液的制備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相制成1 ml含有0.1344 ml的紅景天苷的溶液，作為對照品溶液。見色譜圖1～3。

1.5 標準曲線的制備分別精密吸取紅景天苷上述對照品溶液1、3、5、6、7、9 ml至 10 ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度。按上述色譜條件分析，每次進樣10 μl，以進樣量(X)為橫坐標，峰面積(Y)為縱坐標，繪制標準曲線，得線性回歸方程為Y=295594X-20771，R2=0.9994(n=7)，紅景天苷在0.134～1.344 g范圍內呈良好線性關系。

1.6 精密度實驗精密吸取對照品溶液，按上述色譜條件，重復進樣5次，測定峰面積積分值，其RSD為1.7%。

1.7 重復性試驗取女貞子藥材樣品6份，分別按藥材供試品溶液的制備方法制備、測定，結果紅景天苷的含量分別為:0.424、0.426、0.432、0.441、0.431、0.444 mg/g，平均為0.432 mg/g，RSD為1.9%，證明該方法重現性良好。

1.8 穩定性試驗取同一藥材供試液，按上述色譜條件測試5次，每次間隔2 h，測得峰面積積分值，其RSD為1.7%。證明該供試液8 h內穩定。

1.9 回收率測定精密稱取已知紅景天苷含量的女貞子藥材5份，分別加入一定量的紅景天苷對照品，照2.2項下方法進行供試品溶液的制備并如法測定，計算加樣回收率，測得紅景天苷的平均回收率為96.3%，RSD為1.5%。結果見表1。