滅菌溫度和pH值對克林霉素磷酸酯注射液穩定性的影響

陳美田，董雪菊，張孝瑩

(1.山東大學藥學院，山東 濟南250012;2.辰欣藥業股份有限公司，山東濟寧272031)

克林霉素磷酸酯注射液的臨床應用主要適用于革蘭陽性菌和厭氧菌引起的多種感染性疾病.其化學名稱為:6－(1－甲基－4－丙基－2－吡咯烷碳酰胺基)－1－硫代－甲基－7－氯－6，7，8－三脫氧－L－蘇式－α－D－半乳糖吡喃糖苷－2－二氫磷酸酯，化學結構式為:

根據其化學結構式分析其可能存在的雜質:林可霉素、克林霉素、林可霉素－2磷酸酯等.我們根據克林霉素磷酸酯結構式及其可能存在的雜質進行了研究分析.

克林霉素磷酸酯分子結構中含有磷酸酯鍵，硫甲基，鹵素等活潑基團，易發生水解，氧化，取代，消除，重排等反應.分子中含有硫原子，易被氧化產生高價硫.或在酸性條件下磷酸酯鍵和硫甲基易水解.在堿性或受熱時化合物容易產生鹵素水解和消除反應.在上述降解過程中還會發生異構化反應.根據以上的結構分析，確定影響本產品質量的影響因素，并進行對比實驗.

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀(日本島津);pH計(上海雷磁儀器廠);電子恒溫水浴鍋(上海精宏實驗設備有限公司).克林霉素磷酸酯(山東魯抗辰欣藥業自制).

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱:用辛烷(C8)基硅烷鍵合硅膠為填充劑;檢測波長:210 nm;流速:1.0 mL·min－1;流動相:磷酸二氫鉀溶液(取磷酸二氫鉀10.54 g溶于775 mL水中，用85%磷酸溶液調節pH值至2.5)－乙腈(775∶225).理論板數按克林霉素磷酸酯峰計算，應不低于1 500.

2.2 pH值 根據克林霉素磷酸酯的結構判斷，該藥的磷酸酯鍵和7位氯容易水解，較不穩定.中性環境有利于抑制磷酸酯鍵的水解生成克林霉素，酸性環境有利于抑制7位氯的水解，因此對pH做了詳細的考察.

根據對本產品的質量考察得出:克林霉素磷酸酯注射液在生產、貯藏過程中變化最大的雜質是相對保留時間為0.6的林可霉素－2磷酸酯和相對保留時間為1.4的克林霉素，它們分別是克林霉素磷酸酯7位氯和2位磷酸酯水解產物.我們將這兩個雜質作為主要考察對象，配制了一系列pH值的樣品，100℃滅菌15 min后進行HPLC分析，結果如下:

表1 克林霉素磷酸酯的pH測定結果

圖2 不同滅菌時間主要雜質含量變化圖

2.3 滅菌時間 我們將產品放入100℃水浴中滅菌，分別放入 5、10、15、20、30、45、60 min 后取樣進行有關物質檢查，同時檢測0時數據.對兩個主要雜質在100℃滅菌時隨時間的變化情況進行了研究，結果見圖2、表2.

表2 滅菌實驗測定結果

由圖2可知，這兩個雜質的量均隨滅菌時間增加而增大，同時可以看出本品不能耐受高溫滅菌，高溫下本品還會產生許多新雜質，并且會放出硫化氫的氣味.

3 結論

克林霉素是克林霉素磷酸酯的特定雜質，它是克林霉素磷酸酯在體內代謝產生的藥效成分.林可霉素－2磷酸酯屬于非特定雜質，其藥理作用也未知，屬于需要嚴格控制的雜質.根據雜質隨pH值變化圖，應該選擇盡可能低的pH值，但在實際生產中發現料液在pH值6.1以下變得特別粘稠，克林霉素磷酸酯很容易析出，所以實際生產pH值控制在6.1左右比較合適.從滅菌實驗可以看出，本品注射劑不適合在高溫條件下生產.因此采用凍干粉針和無菌生產工藝除菌過濾的小針劑在臨床使用上更安全.