奧曲肽對高脂誘導不同程度肥胖小鼠自由基和血糖的影響

吳 聰，朱麗麗，施用暉，，樂國偉，，*

(1.食品科學與技術國家重點實驗室，江蘇無錫 214122;

2.江南大學食品學院，食品營養與功能因子研究中心，江蘇無錫 214122)

奧曲肽對高脂誘導不同程度肥胖小鼠自由基和血糖的影響

吳 聰1，朱麗麗2，施用暉1，2，樂國偉1，2，*

(1.食品科學與技術國家重點實驗室，江蘇無錫 214122;

2.江南大學食品學院，食品營養與功能因子研究中心，江蘇無錫 214122)

目的:研究奧曲肽對高脂誘導不同程度肥胖小鼠自由基(ROS)和血糖(BG)的影響。方法:雄性C57BL/6小鼠80只，分為正常(control)、高脂(HFD)兩組，飼喂5w后將HFD組分為肥胖(Obesity，OB)、高脂中體重(Middle Weight，MW)、肥胖抵抗(Obesity Resistance，OR)三組，每組各取8只分別腹腔注射奧曲肽(OCT，20μg/kg)和0.9%生理鹽水0.1mL，注射10min后小鼠斷尾取血測ROS和BG。小鼠稱重后處死，取腹部脂肪稱重并計算腹脂率。結果:飼喂5w后，與正常組相比，OB組小鼠體重顯著增加，OR組顯著降低(p＜0.05)，OB、MW、OR組小鼠腹脂重、腹脂率均顯著增加(p＜0.05);OR組小鼠血ROS與正常組相比顯著升高(p＜0.05)，注射OCT之后，各組小鼠血ROS與注射NS相比均有所降低(p＞0.05);OR、MW、OB組小鼠BG與正常組相比顯著升高(p＜0.05)，注射OCT之后，OB、MW、OR組小鼠BG與注射NS相比均顯著下降(p＜0.05)。結論:飼喂5w的高脂飼料后小鼠出現了肥胖和肥胖抵抗，血ROS升高，其中肥胖抵抗組ROS顯著升高，BG顯著升高，OCT通過降低血ROS水平而顯著降低高脂飼養組小鼠BG。

奧曲肽，高脂，肥胖，自由基，血糖

高脂飲食會導致營養性氧化應激，導致胰島素抵抗、肥胖等代謝綜合癥的發生［1－2］。生長抑素是一種在體內主要起抑制作用的激素，本文主要研究了生長抑素類似物奧曲肽對高脂誘導不同程度肥胖小鼠自由基和血糖的影響。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

奧曲肽 購于無錫市第四人民醫院;其余試劑均為國產分析純。

MP1－B多參數化學發光分析測試系統 西安瑞邁分析儀器公司。

1.2 實驗動物

清潔級雄性 C57BL/6小鼠80只，分為正常(control，16 只)、高脂(HFD，64 只)兩組，正常和高脂飼料配方如表1所示。飼喂5w后將HFD組分為肥胖(Obesity，OB組，前25%體重小鼠，16只)、高脂中體重(M iddle Weight，MW組，中間50%體重小鼠，32只)、肥胖抵抗(Obesity Resistance，OR 組，后25%體重小鼠，16只)，每組各取8只分別腹腔注射奧曲肽(OCT，20μg/kg)和 0.9% 生理鹽水 0.1m L，注射10m in后小鼠斷尾取血測自由基(ROS)和血糖(BG)。小鼠稱重后斷頸椎處死，取腹部脂肪稱重并計算小鼠腹脂率。

表1 正常組和高脂組飼料配方

1.3 血自由基檢測方法

參照魯米諾化學發光法［3－4］測定，方法如下:取新鮮血25μL 稀釋于855μL Krebs－Hepes(pH7.4)緩沖液中，加入20μL辣根過氧化物酶(HRP)(12.4U/m L)作為催化劑，混勻反應體系，啟動發光后注射100μL魯米諾(5mmol/L)于整個反應體系中，以發光強度峰面積表示自由基水平的高低。

2 結果與分析

2.1 5w時小鼠體重、腹脂重及腹脂率

由表2可知，飼喂5w后，OB組小鼠體重與正常組相比顯著增加，差別有統計學意義(p＜0.05)，MW組小鼠體重與正常組相比變化不大，差別無統計學意義(p＞0.05)，OR組小鼠體重與正常組相比顯著降低，差別有統計學意義(p＜0.05)。

飼喂5w后，OB組、MW組、OR組小鼠腹脂重與正常組相比顯著增加，差別有統計學意義(p＜0.05)，其中OR組小鼠與MW組相比腹脂重顯著增加，但差別無統計學意義(p＞0.05)。

飼喂5w后，OB組、MW組、OR組小鼠腹脂率與正常組相比顯著增加，差別有統計學意義(p＜0.05)，其中OR組小鼠腹脂率處于OB組和MW組之間，與這兩組相比差別無統計學意義(p＞0.05)。

2.2 注射OCT對高脂誘導不同程度肥胖小鼠血ROS的影響

由表3可知，OR組小鼠ROS與正常組相比顯著升高，差別有統計學意義(p＜0.05)，注射OCT之后，各組小鼠血ROS與注射NS相比均有所降低，但差別無統計學意義(p＞0.05)。

2.3 注射OCT對高脂誘導不同程度肥胖小鼠BG的影響

由表4可知，OR組、MW組、OB組小鼠BG與正常組相比顯著升高，差別有統計學意義(p＜0.05)，各組BG依次升高，差別有統計學意義(p＜0.05)，注射OCT之后，OB組、MW組、OR組小鼠BG與注射NS相比均顯著下降，差別有統計學意義(p＜0.05)。

表2 小鼠體重、腹脂重及腹脂率(n=16±s)

表2 小鼠體重、腹脂重及腹脂率(n=16±s)

注:同行中不同字母標注表示顯著性差異(p＜0.05);表3、表4同。

正常組OB MW OR體重(g) 27.36±1.23b 30.21±1.13c 27.47±0.91b 26.43±1.07a腹脂重(g) 0.52±0.14a 0.90±0.18c 0.69±0.17b 0.74±0.25b腹脂率 0.019±0.004a 0.030±0.006c 0.025±0.006b 0.027±0.009bc

表3 注射OCT對高脂誘導不同程度肥胖小鼠血ROS的影響(n=8，±s)

表3 注射OCT對高脂誘導不同程度肥胖小鼠血ROS的影響(n=8，±s)

正常組 正常組+OCT OB OB+OCT MW MW+OCT OR OR+OCT血ROS(106cd/mL) 1.60±0.21a 1.68±0.19ab1.77±0.33ab 1.64±0.23a 1.90±0.27ab1.77±0.33ab 1.99±0.25b 1.70±0.43ab

表4 注射OCT對高脂誘導不同程度肥胖小鼠BG的影響(n=8±s)

表4 注射OCT對高脂誘導不同程度肥胖小鼠BG的影響(n=8±s)

正常組 正常組+OCT OB OB+OCT MW MW+OCT OR OR+OCT BG(mmol/L) 7.53±0.17a 7.57±0.18ab 9.56±0.17f 9.13±0.30e 9.48±0.25ef 8.75±0.13d 8.36±0.36c 7.93±0.77b

3 討論

Bernd等［5］報道，分泌性肽類激素如促黃體生成素釋放激素、腦啡肽、血管緊張素、催產素可以清除過氧化氫自由基，預防低密度脂蛋白的過氧化，抑制腦細胞膜的脂質過氧化，它們可能是組成機體抗氧化防御體系重要的一部分。SS對消化功能的生理性調節主要是作為抑制因子，表現出對胃的運動以及胃、胰腺內、外分泌功能的明顯的抑制作用［6－7］。經過5w的高脂飼料喂養后，HFD小鼠體重出現了不同的變化，其中OR組與正常組小鼠相比體重顯著降低，但其腹脂重及腹脂率顯著升高，說明OR組出現了營養過剩，能量均以脂肪的形式儲存起來，供給機體其他組織器官的能量較少，影響了機體的生長。OB組小鼠在出現腹部脂肪堆積同時機體的生長并未受到影響，只是腹部脂肪堆積的速度較生長的速度快，可以看出在OR組和OB組之間存在著不同的脂肪代謝途徑。

飼喂5w的高脂飼料后，小鼠血ROS出現升高，其中OR組小鼠血ROS顯著升高，說明在OR組小鼠出現了嚴重的氧化應激，OB、MW、OR組小鼠BG顯著升高，出現了糖代謝紊亂，而注射OCT之后，以上各組小鼠血糖均出現顯著下降，說明OCT通過降低血ROS水平而顯著降低高脂飼養組小鼠BG，改善高脂飼養小鼠的糖代謝紊亂。

［1］沈秀華，蔡威，湯慶婭，等.營養性肥胖大鼠氧應激水平的改變［J］.衛生研究，2007，36(4):440－442.

［2］Goodarzi MT，Varmaziarl，Navidi A A，et a1.Study of oxidative stress in type2 diabetic patients and its relationship with glycated hemoglobin［J］.Saudi Med J，2008，29:503－506.

［3］Esfandiari N.Utility of the nitroblue tetrazolium reduction test for assessment of free radical production by seminal leukocytes and spermatozoa［J］.Andrology，2003，24:862－869.

［4］Li Y，Zhu H，Michael A.Detection of mitochondria－derived free radical production by the chemilumigenic probes lucigenin and luminol［J］.Biochim Biophys Acta，1999，1428:1－12.

［5］Bernd Moosmann，Christian Behl.Secretory Peptide Hormones Are Biochemical Antioxidants:Structure－Activity Relationship［J］.Mol Pharmacol，2002，61(2):260－268.

［6］Patel Yc.Somatostatin and its receptor family［J］.Frontiers in Neuroendocrinology，1999，20:157－198.

［7］Van Op Den Bosch J，Adriaensen D，Van Nassauw L，et al.The role(s)of somatostatin，structurally related peptides and somatostatin receptors in the gastrointestinal tract:a review［J］.Regulatory Peptides，2009，156:1－8.

Effect of octreotide on free radicals and blood glucose of various degrees of obesity induced by high－fat diet in mice

WU Cong1，ZHU Li－li2，SHI Yong－hui1，2，LE Guo－wei1，2，*

(1.The State Key Laboratory of Food Science and Technology Jiang Nan University，Wuxi214122，China;
2.Jiangnan University，School of Food Science and Technology，the Study Center of Food Nutrition and Functional Factors，Wuxi214122，China)

Objective:To study the effects of octreotide on free radicals and blood glucose of various degrees of obesity induced by high－fat diet in mice Method:80 of Male C57BL/6 mice were assigned to two groups:the control group(n=16)were administrated with an ordinary diet;the HFD group(n=64)were fed with high fat diet，after 5 weeks feeding，the HFD group were divided into three groups:the OB group(Obesity，n=16，the top 25%body weight)，the MW group(Middle Weight，n=32，the middle 50%of body weight)，the OR group(Obesity Resistance，n=16，the last 25%body weight)，8 mice in each group were injected by intraperitoneal injection of octreotide(OCT，20μg/kg)and 0.9%saline 0.1m L，10m in after injection，free radical(ROS)and blood glucose(BG)were determined.After weighting，all the mice were sacrificed by being broken cervical vertebrae，the weights of abdominal fat in were recorded and the abdominal fatpercentages were calculated.Results:After5 weeks feeding，com pared with the normal group，The body weight of mice in OB group significantly increased，and the OR group significantly decreased(p ＜0.05)，the abdominal fat weight and fat rate in OB，MW and OR group significantly increased com pared with the normal group(p＜0.05);the blood ROS level of mice in OR group significantly increased com pared with the normal group(p ＜0.05)，after injection of OCT，the blood ROS level decreased com pared with injection with NS(p ＞0.05);the BG of mice in OR，MW and OB group significantly increased com pared with the normal group(p ＜0.05)，the blood ROS level decreased compared with injection with NS(p ＞0.05).After injection of OCT，The BG of mice in OB、MW and OR group significantly decreased Compared with the injection of NS(p ＜0.05).Conclusion:5 weeks high－fat diet leads obesity and obesity resistance to mice.Increase ROS level of whole blood，with significantly increase in obesity－resistant group，significantly increase inBG，injection of OCT significantly decrease BG.Levelby reducing the level of blood ROS in mice fed with high－fat diet.

octreotide;high－fat diet;obesity;free radicals;blood glucose

2010－07－01 *通訊聯系人

吳聰(1986－)，女，碩士研究生，研究方向:營養代謝與調控。

國家自然科學基金(30571347)。

TS201.4

A

1002－0306(2011)07－0389－03