甘肅省一新記錄蟲草

何蘇琴 王三喜 羅進倉 金秀琳 馬福全 王生榮

作者簡介： 何蘇琴（1965-），女，江西修水人，學士，副研究員，主要研究方向植物真菌病害及資源微生物利用。E-mail:gshesuqin@sina.com

王生榮為通訊作者。

摘要： 報道了甘肅省新發現的蛇形蟲草屬真菌細蛇形蟲草，并對其有性型(Ophiocordyceps gracilis)和無性型羽束孢(Paraisariadubia)的形態特征進行了描述。采集自甘肅夏河的細蛇形蟲草的寄主為一種蝠蛾幼蟲(Hepialus sp.)，采集地海拔3 500 m。僵蟲體表包裹黃褐色菌索；子座單生，從僵蟲頭前端或頭背部長出，可孕部卵圓形或近球形，暗黃褐色，柄部淡黃褐色，圓柱形；子囊殼褐色，埋生，袋囊狀或瓶狀，子座少見。

關鍵詞： 細蛇形蟲草；羽束梗孢；形態特征

中圖分類號： S 567.35文獻標識碼： A文章編號： 1009-5500(2011)04-0015-04

2006～2008年在甘肅冬蟲夏草主產區的甘南藏族自治州調查采樣時發現當地蟲草交易市場中的部分冬蟲夏草交易品中混雜有僵蟲體表包裹黃褐色菌索、子座可孕部卵圓形或近球形的不同種類的蟲草，經查證，該種類蟲草均采挖自甘肅甘南藏族自治州夏河縣。對10枚該種類蟲草的內菌核進行了組織分離，羽束梗孢(Paraisariadubia)的分出率達100%，結合子座形態，將其鑒定為細蛇形蟲草(Ophiocordyceps gracilis)，為甘肅省新紀錄蟲草。

1 材料和方法

1.1 培養基及配方

PDA培養基 馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂12 g，水1 000 mL。

SPPDA培養基 馬鈴薯200 g，產地土20 g，蛋白胨2 g，葡萄糖20 g，瓊脂12 g，水1 000 mL

1.2 標樣采集

蟲草標樣于2008年5月采集自甘肅甘南藏族自治州夏河縣高寒草甸，海拔3 500 m。

1.3 相關無性型真菌的分離

以每株蟲草為單位，采用常規組織分離方法對內菌核進行分離培養。去除標樣表面土粒及雜物，將分離組織剪成長5 mm節段，75%乙醇表面消毒后，滅菌水沖洗4～5次，用滅菌濾紙吸干表面水分后，在放于SPPDA平板上，20 ℃培養，每日檢查，長出真菌及時轉出純化。30 d后統計分出率。

分出率（%）=（分出該菌的標樣數/標樣總數）×100

1.4 形態學鑒定

根據蟲草子座的形態，及分離出的無性型菌株的產孢細胞和孢子形態（SPPDA和PDA平板上，20 ℃培養30 d），依據相關資料進行蟲草種類的鑒定。

2 結果與討論

依據有性型子座及其無性型產孢細胞和分生孢子的形態特征（圖1），并與相關資料^[1-3]進行比對，將采自甘肅夏河的蟲草鑒定為細蛇形蟲草。無性型羽束梗孢的分出率達100%。

有性型(Ophiocordyceps gracilis)子座（近成熟）僵蟲體表包裹黃褐色菌索，子座單生，從僵蟲頭前端或頭背部長出，不同于冬蟲夏草的子座從僵蟲頭骨縫中長出。可孕部呈卵圓形或近似球形，暗黃褐色，柄部淡黃褐色，圓柱形，柄長10 mm，柄寬2.6 mm，可孕部4.4 mm×4 mm。

子囊殼（近成熟） 近成熟子囊殼褐色，埋生，袋囊狀或稱瓶狀，(386.1～455.4) μm×(99.0～128.7) μm，av.(412.5±22.5) μm×(114.9±11.3) μm。

無性型(Paraisariadubia)培養性狀 在SPPDA和PDA平板上，20 ℃培養，菌落乳白至鵝黃色，生長緩慢，初茸狀，后呈束羽狀。

產孢細胞 無色，瓶狀小梗單生于產孢菌絲（寬約2.5 μm）上，或形成單至多層的輪枝，每輪著生3～6個小梗，或數個小梗生于棒狀至頭狀孢梗上，小梗近中部

圖1 細蛇形蟲草(Ophiocordyceps gracilis)及其無性型羽束梗孢(Paraisaria dubia)的形態特征

Fig.1 Morphological characters of Ophiocordyceps gracilis and Paraisaria dubia

1,2. 示內菌核、根狀菌索及近成熟的子座；3～4. 無性型羽束梗孢菌落形態（PDA,20 ℃,30 d）；5. 示埋生的子囊殼；6. 子囊殼孔口頂面觀；7～10. 羽束梗孢分生孢子梗和產孢細胞形態；11,12. 羽束梗孢分生孢子形態。

標尺：1～4=10 mm；5,6=150 μm；7～12=20 μm

膨大，頂部尖。瓶狀小梗(6.2～14.9) μm×(1.3～2.5) μm，av.(9.5±2.3) μm×(1.7±0.3) μm。

分生孢子 分生孢子無色，擬梭形，細桿狀，針狀，直或稍彎，(3.7～10.0) μm×(0.5～1.0) μm，av.(6.4±1.7) μm×(0.7±0.1) μm。

寄主昆蟲 一種蝠蛾幼蟲(Hepialus sp.)。

3 討論

雖然筆者未獲得細蛇形蟲草的成熟子座，但依據近成熟子座及其無性型的形態特征，且其寄主為鱗翅目的蝠蛾幼蟲，可與形態近似種，寄生于鞘翅目昆蟲的擬細蛇形蟲草區分開^[4-6]。

須要提及的是，Samson 等^[1]中描述的Paraisariadubia的分生孢子大小為(3.2～4.8) μm×0.8 μm，但在文中插附的形態線條圖和電鏡掃描圖上，其分生孢子長度的量度可達8.2 μm。

細蛇形蟲草分布于歐洲、中國、日本、北美洲、南美洲、北非等多個國家和地區^[7]，2003年Shresthal等^[8]在尼泊爾也采集到了該蟲草。

細蛇形蟲草已知分布于我國云南、江蘇、新疆、安徽^[9,10]。在我國新疆等地，作為冬蟲夏草入藥使用^[11]，其發酵菌絲體所含成分與新疆產天然細蟲蛇形蟲草和青海產冬蟲夏草所含成分性質相同，是替代天然冬蟲夏草緩解市場急需的理想產品^[12]。在新疆，細蛇形蟲草產于阿爾泰林區的雪線附近，海拔1 250～2 000 m，生于半陽半陰坡，僵蟲體外有菌索，子座少見^[13]，我們采集到的標本的形態特征與新疆的相似，在采集到的30枚標樣中，只有2枚生有子座。采挖自甘肅夏河的部分冬蟲夏草交易品中，細蛇形蟲草混雜的比例可達1.00%～2.13%。

甘肅地處黃土高原、內蒙古高原和青藏高原的交匯地帶，海拔大多在1 000m以上，四周為群山峻嶺環抱。北有六盤山、合黎山和龍首山，東為岷山、秦嶺和子午嶺，西接阿爾金山，和祁連山，南壤青泥嶺。境內地勢起伏、山嶺連綿、江河奔流，地形地貌復雜^[14]。多樣的生態和氣候條件下，一定蘊藏有豐富的蟲草種類資源，尚有待人們去探索發現。

參考文獻：

[1] Samson R A, Brady B L.Paraisaria,a new genus for Isaria dubia,the anamorph of Cordyceps gracilis[J]. Trans British Mycol Soc,1983,81(2):285-290.

[2]梁宗琦. 中國真菌志第32卷蟲草屬[M]. 北京：科學出版社,2007：1-190.

[3]Sung G H,Hywel-Jones N L,Sung J M,et al. Phylogenetic classification of Cordyceps and the clavicipitaceous fungi[J]. Stud Mycol,2007,57(1):5-59.

[4] Kobayasi Y.Keys to the taxa of the genera Cordyceps and Torrubiella[J]. Trans Mycol Soc Jap,1982,23:329-364.

[5]Fan M Z,Li C R,Chen Y Y,et al. Cordyceps gracilioides,a new record for China[J]. Mycosystema,2001,20(2):273-274.

[6] Li C R, Ming L,Fan M Z,et al. Paraisaria gracilioidescomb.nov,the anamorph of Cordyceps gracilioides[J]. Mycosystema,2004,23(1):165-166.

[7]Vaillant.Cordyceps gracilis.from: MycoBank, the fungal website[EB/OL].[2007-06-24].http://www.mycobank.org/MycoTaxo.aspx?Link=T&Rec;=504277.

[8]Shresthal B,Sung J M.Notes on Cordyceps species collected from the central region of Nepal[J]. Mycobiology,2005,33(4):235-239.

[9] 梁宗琦，劉愛英，樊美珍，等. 西北地區的幾種蟲草[J]. 菌物學報，1995,14(3)：237-240.

[10] 宋斌，林群英，李泰輝，等. 中國蟲草屬已知種類及其分布[J]. 菌物研究，2006，4（4）：10-26.

[11]丘翠娥，戴斌，王少珩. 新疆蟲草的生藥鑒定及氨基酸分析[J]. 中藥材，1991，14（12）：19-22.

[12]常瑋，張慧濤，楊新平. 新疆蟲草理化性質的研究[J]. 新疆農業科學，2004，41（專刊）：24-25.

[13] 常瑋，龍濤，馮懷蓉，等. 新疆蟲草的生物學特性[J]. 新疆農業科學，2002，39(4)：227.

[14]甘肅省地理地貌. 甘肅年鑒[EB/OL]. [2009-11-16]. http://www.gansu.gov.cn/GsglItemQw.aspid=32493.

Ophiocordyceps gracilis, a new record in Gansu Province

HE Su-qin1,2,WANG San-xi3,LUO Jin-cang2,JIN Xiu-lin2,MA Fu-quan3,WANG Sheng-rong1

(1. College of Pratacultural Science,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China; 2. Institute of Plant Protection,Gansu Academy of Agricultural Sciences,Lanzhou 730070,China; 3. Institute of Agricultural Sciences of Gannan Prefecture,Hezuo 747000,China)

Abstract: In this paper,Ophiocordyceps gracilis is reported as a new record in Gansu Province,and the morpha both teleomorph on Hepialus larva and anamorph on culture are described.Samples were collected from Xiahe County with altitude of 3 500 m. Infected-larvae are covered by several yellow brown synnemata.Stroma are produced in solitary per host,usually from head or thorax region.Stroma consists of a stout cylindrical stipe, with a pale yellow brown,and ovoid to subglobose,dark yellow brown-colored head.Perithecia are completely immersed in head,brown-colored,saccate or flask shaped.Stroma are formed infrequently.

Key words: Ophiocordyceps gracilis；Paraisaria dubia；morphological characters