氣相色譜法測定甲磺酸胺銀杏內酯B中的大孔樹脂有機溶劑殘留

武曉靜 徐 慧 莊件兵 趙厚民

(江蘇省理化測試中心，江蘇省食品營養成分與有毒有害物質檢測中心，南京 210042)

氣相色譜法測定甲磺酸胺銀杏內酯B中的大孔樹脂有機溶劑殘留

武曉靜 徐 慧 莊件兵 趙厚民

(江蘇省理化測試中心，江蘇省食品營養成分與有毒有害物質檢測中心，南京 210042)

建立了氣相色譜法測定甲磺酸胺銀杏內酯B中正己烷、苯、甲苯、萘等大孔樹脂有機溶劑殘留量的方法。以正庚烷為內標，樣品經溶解直接進樣測定，色譜柱為DB－1毛細管柱(30 m×0．25 mm，0．25μm)。在一定濃度范圍內，有機溶劑濃度與其色譜峰面積與正庚烷色譜峰面積之比呈良好的線性，線性相關系數r＞0．999。有機溶劑添加回收率為93．8% ～100．7%，檢出限為0．125～0．5μg/mL。該方法快速、準確、操作簡便，能滿足大孔樹脂中苯等有機溶劑殘留的定量檢測。

甲磺酸胺銀杏內酯B 大孔樹脂 氣相色譜 有機溶劑殘留 內標法

DM－130型大孔樹脂為苯乙烯骨架，根據大孔樹脂的基本骨架、填充劑和致孔劑的性質，其大孔樹脂中可能含有烷烴類、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙烯基苯、萘等殘留［1，2］，因甲磺酸胺銀杏內酯B的起始原料銀杏內酯B((80%)原料在其提取過程中采用了DM－130型大孔樹脂，根據中國藥典2005年版二部附錄Ⅷ P《殘留溶劑測定法》［3］，其中苯屬于第一類溶劑，限度要求為0．000 2%，正己烷、甲苯、二甲苯屬于第二類溶劑，限度要求分別為0．029%、0．089%、0．217%，其它幾種溶劑在 2005年版藥典中未作具體要求，參照SFDA(The State Food and Drug Administration)對大孔樹脂的限度規定，以0．0020%計，對氣相色譜法測定樣品中可能殘留的正己烷、癸烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙烯基苯、萘等有機溶劑殘留進行了研究。

目前有關大孔樹脂有機溶劑殘留的測定方法多數采用頂空氣相色譜法［4，5］。筆者采用直接進樣法，建立了大孔樹脂溶劑殘留的試驗方法。直接進樣法不受頂空裝置的限制，具有操作簡單、快速、準確等特點，可以滿足大多數生產廠家苯乙烯型大孔樹脂有機溶劑殘留的檢測要求。

1 實驗部分

1．1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀:Varian CP－3800型，配CP－8410自動進樣器，氫火焰離子化檢測器(FID)，美國Varian公司;

正己烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、正庚烷內標物:均為分析純，南京化學試劑有限公司;

二乙烯基苯:含量55%，上海安譜科學儀器有限公司;

萘:含量不低于99．0%，上海化學試劑一廠;甲醇:色譜純;

甲磺酸胺銀杏內酯B供試品:批號分別為071101、071212、091201，由某生產廠家提供。

1．2 色譜條件

色譜柱:DB－1毛細管柱(30 m×0．25 mm，0．25μm);氣化室溫度:220℃;柱溫:50℃，保持 3 min，以10℃/min升至200℃，再以20℃/min升至230℃，保持30 min;檢測器溫度:260℃;氮氣流速:1 mL/min;氫氣流速:30 mL/min;空氣流速:300 mL/min;分流比為 1∶10;進樣體積:1 μL。

1．3 標準儲備溶液配制

分別精密量取正己烷、癸烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙烯基苯、萘適量，置于10mL容量瓶中，用甲醇溶液稀釋，配制成正己烷(1 000μg/mL)、癸烷 (800 μg/mL)、苯 (500 μg/m)、甲 苯 (400 μg/mL)、二甲苯 (8 000 μg/mL)、苯乙烯 (800 μg/mL)、二乙烯基苯(800 μg/mL)、萘(800 μg/mL)標準儲備溶液，以及正庚烷內標儲備溶液(2500μg/mL)，放在4℃冰箱內保存。使用時分別精密量取適量上述標準儲備液和內標儲備液，配制成實驗所需系列標準溶液。

1．4 供試品溶液的配制

精確稱取銀杏內酯衍生物供試品粉末約1．0 g于10 mL容量瓶中，準確加入正庚烷內標儲備液100μL，加入適量甲醇，超聲10 min，用甲醇稀釋定容至刻度，混勻即得。

2 結果與討論

2．1 系統適用性

選用DB－1色譜柱，對有機溶劑標準混合溶液進樣分析。其中二乙烯基苯中添加乙基乙烯基苯作為穩定劑，故色譜圖中在8．766、8．907 min處有兩個乙基乙烯基苯峰，但不影響分離，目標物均達到了良好的分離。分離度(R s)依次為 9．6、9．9、10、16、1．6、5．0、1．2、33、19、2．1、4．5、2．8、12，色譜分離結果見圖1。在相同的實驗條件下，甲磺酸胺銀杏內酯B供試品均無干擾峰。

圖1 有機溶劑色譜分離圖

2．2 標準曲線方程

分別精密量取1．3中配制的各標準儲備液適量與正庚烷內標儲備液100μL，稀釋配制成系列標準溶液，編號分別為1#～5#，按1．2色譜條件分別測定。以有機溶劑與正庚烷色譜峰的峰面積之比為縱坐標(y)，以有機溶劑濃度為橫坐標(x)進行線性回歸，各有機溶劑的線性方程、線性范圍及其相關系數見表1。

表1 有機溶劑的標準曲線及其相關系數

2．3 檢出限

按照1．2色譜條件，取1．3配制的標準儲備液逐級稀釋至適當濃度，進樣分析，以3倍信噪比計算得各溶劑的檢出限分別為正己烷 0．16μg/mL、苯0．10 μg/mL、甲苯 125 μg/mL、二甲苯0．25 μg/mL、苯乙烯 0．5 μg/mL、癸烷 0．25 μg/mL、二乙烯基苯0．5 μg/mL、萘 0．25 μg/mL。

2．4 精密度試驗

取2．2中配制的3#標準溶液，按1．2色譜條件連續進樣5次，記錄色譜圖。計算各溶劑與內標物色譜峰的峰面積比值及相對標準偏差，各有機溶劑的相對標準偏差分別為:正己烷0．34%、苯1．2%、甲苯 0．15%、二甲苯 0．29、苯乙烯 1．3%、癸烷0．62%、二乙烯基苯 1．2%、萘 0．43%，說明本法精密度良好。

2．5 回收試驗

分別準確稱取供試品(批號為071101)3份于10 mL容量瓶中，分別加入適量標準儲備液和內標儲備液100μL，加入適量甲醇，超聲10 min，用甲醇稀釋定容至刻度，按1．2色譜條件進樣分析。分別計算各溶劑與內標物色譜峰面積比值，并計算各組分的回收率，結果見表2。

表2 回收試驗結果

2．6 樣品測定

按照1．2色譜條件和1．4供試品溶液制備方法，采用內標定量法測定了批號為071101、071212、090201的3批銀杏內酯原料中的有機溶劑殘留量，結果均未檢出。

3 結語

本實驗建立的氣相色譜法不受頂空裝置的限制，具有操作簡單、快速，測量準確等特點，能滿足苯乙烯型大孔樹脂有機溶劑殘留的檢測要求。

［1］ 范偉贏，王柏章．大孔吸附樹脂分離法對提純中藥有效成分的影響因素［J］．廣東醫學院學報，2008，26(5):544－546 ．

［2］ 凌寧生，劉志青，李林，等．中藥用D－101型大孔樹脂苯系列殘留物分析研究［J］．中草藥，2002，33(2):122－124．

［3］ 中華人民共和國藥典委員會．中華人民共和國藥典［M］．二部．北京:化學工業出版社，2005:附錄54．

［4］ 劉東，楊敏芝，杜守穎，等．頂空氣相色譜法測定大孔樹脂提取物中的殘留溶劑研究［J］．藥物分析雜志，2009(11):1 877－1880．

［5］ 來國防，程賓，周蘭，等．頂空氣相色譜法檢測三七總皂苷中大孔樹脂殘留物［J］．商丘師范學院學報，2009(6):71－73．

ABSTRACTA method was developed for the determination of n － hexane，n － decane，benzene，toluene，styrene，naphthalene etc．residues in dimethylaminoethyl ginkgolide Bmesylate by GC．Sample was injected directly after dissolving with n－heptane as internal standard．The column was DB －1 capillary column(30 m ×0．25 mm，0．25 μm)．The concentration of organic residues were linear with peak areas ratio of it to n－heptane in certain range，correlation coefficient r＞0．999．The recoveries of organic solvents were 93．8% －100．7%，the detection limitswere in the range of0．125 －0．5 μg/mL．Themethod is fast，accurate and simple for the analysis of organic residues in dimethylaminoethyl ginkgolide Bmesylate．

KEYWORDSdimethylaminoethyl ginkgolide Bmesylate，macroporous resin，GC，organic residue

DETERM INATION OF ORGANIC RESIDUES IN DIMETHYLAM INOETHYL GINKGOLIDE B MESYLATE BY GC

Wu Xiaojing，Xu Hui，Zhuang Jianbin，Zhao Houmin
(Jiangsu Test Center for Physics and Chemistry，Jiangsu Test Center for Nutrition and Toxicant in Food，Nanjing 210042，China)

2010-10-25