蘇香1號對小鼠記憶障礙模型的影響

劉魁英 廖磊 李蜀平 劉冬平 劉洋

蘇香1號為金縷梅科植物蘇香1號樹(LiquidambarorientalisMill)所分泌的樹脂。有通竅辟穢，開郁祛痰，行氣止痛的作用，主治中風痰厥，氣厥之寒閉癥;溫瘧，驚癇;濕濁吐利;心腹卒痛以及凍瘡、疥癬。蘇香1號樹脂含揮發油、萜類，現代藥理研究發現蘇香1號有抗血栓功能，對心血管有明顯影響，可抑菌、抗炎。本試驗采用小鼠水迷宮行為實驗法，檢測蘇香1號對戊巴比妥鈉、乙醇以及亞硝酸鈉引起小鼠學習、記憶障礙的作用。

1 材料

1.1 實驗動物 清潔級昆明小鼠，220只，雄性，體重22～24 g。北京華阜康生物技術股份有限公司，合格證號:SCXK(京)2009-0007。

1.2 試劑與藥物 蘇香1號，1 g藥粉含生藥0.07991 g生藥。批號:20090810。由北京市衛生局臨床藥學研究所植化室提供。吡拉西坦片，廣東華南藥業集團有限公司生產，批號:090104。戊巴比妥鈉，國藥集團化學試劑公司，進口分裝，批號:F20041117。95%乙醇，北京化工廠生產，批號:20090618。亞硝酸鈉，北京紅星化工廠生產，批號:090612。

1.3 實驗儀器和統計軟件 BL-2200H電子天平，日本島津公司。Morris水迷宮:中國醫學科學院藥物研究所。采用SPSS 10.0軟件進行統計學處理。

2 實驗方法與結果

2.1 蘇香1號對戊巴比妥鈉所致小鼠記憶獲得障礙模型的影響［1，2］將小鼠隨機分為6組，即空白對照組、模型對照組、吡拉西坦組(640 mg/kg)、蘇香1號28、14、7 mg/kg組。灌胃給藥，1次/d，連續10 d，空白對照組及模型對照組分別給予等體積去離子水。于第11 d開始造模并進行Morris水迷宮測試。每天各組小鼠口服灌胃給藥30 min后，除空白對照組腹腔注射等量的生理鹽水外，其余各組小鼠均腹腔注射戊巴比妥鈉15 mg/kg，直到實驗全部結束。各組于造模后30 min進行水迷宮測試。訓練4次/d，動物找到并爬上站臺后，讓其停留20s，若動物入水后60 s未找到站臺者，將其引致站臺，放置20s引導其學習與記憶，潛伏期記為60s。第1 d、第2 d為訓練，第3～5 d按上述方法測試(但不再對其進行引導)，將各組小鼠最后一天的平均潛伏期離作為衡量其學習記憶能力的指標。t檢驗進行組間比較。結果見表1。

2.2 蘇香1號對乙醇所致小鼠記憶再現障礙模型的影響2-3將小鼠隨機分為6組，即空白對照組、模型對照組、吡拉西坦組、蘇香1號28、14、7 mg/kg組。給藥劑量、方法同前。第11～14 d，在各組口服灌胃給藥后1 h進行水迷宮實驗。每只小鼠連續訓練4 d，4次/d，60s/次。方法同上。試驗當日，除空白對照組灌胃去離子水外，其余各組動物給藥1 h后，灌胃50%乙醇7 ml/kg，30 min后，進行水迷宮試驗，結果以小鼠的平均潛伏期為指標，t檢驗進行組間比較。結果見表2。

2.3 蘇香1號對亞硝酸鈉所致小鼠記憶鞏固障礙模型的影響［2-4］將小鼠隨機分為6組，即空白對照組、模型對照組、吡拉西坦組、蘇香1號28、14、7 mg/kg組。給藥劑量、方法同前。第11～13 d，在各組口服灌胃給藥后1 h進行水迷宮試驗。每只小鼠連續訓練3 d，4次/d，60s/次。訓練方法同上。除空白對照組注射等體積生理鹽水外，其余各組動物于每日學習完后立即皮下注射120 mg/kg亞硝酸鈉。14 d，各給藥組給藥1 h后，進行水迷宮試驗，方法同上，結果以小鼠的平均潛伏期為指標，t檢驗進行組間比較。結果見表3。

3 結果

3.1 對戊巴比妥鈉所致小鼠記憶獲得障礙模型的影響 模型對照組動物于實驗第2～5 d，與空白對照組比較平均潛伏期比較均顯著延長(P＜0.05或P＜0.01)，小鼠記憶獲得障礙模型成立;與模型對照組比較，蘇香1號28、14 mg/kg組動物造模第4、5天平均潛伏期均顯著縮短(P＜0.05或P＜0.05)。表明蘇香1號28、14 mg/kg組能顯著降低戊巴比妥鈉引起的憶獲得障礙模型小鼠的潛伏期。見表1。

表1 蘇香1號對戊巴比妥鈉所致的記憶獲得障礙小鼠潛伏期的影響(s，±s)

表1 蘇香1號對戊巴比妥鈉所致的記憶獲得障礙小鼠潛伏期的影響(s，±s)

注:與空白對照組比較▲P＜0.05，▲▲P＜0.01，與戊巴比妥鈉組比較*P＜0.05，＊＊P＜0.01，差異均有統計學意義

組別 劑量mg/kg 第1天(s) 第2天(s) 第3天(s) 第4天(s) 第5天(s)空白對照組 - 46.76±10.43 27.22±14.25 23.96±9.33 26.75±8.06 18.65±9.88模型對照組 - 52.34±11.98 40.99±9.89▲ 36.86±14.72▲ 37.82±12.99▲ 35.63±9.80▲▲吡拉西坦組 640 52.17±11.70 36.75±17.15 24.83±10.11* 25.15±9.22* 20.40±8.81＊＊蘇香1號組 28 46.29±14.64 42.68±13.44 40.28±15.56 32.95±14.60 21.84±10.52*蘇香1號組 14 43.55±12.14 46.17±9.33 29.07±11.90 20.57±8.64＊＊ 19.74±11.65*蘇香1號組 7 49.22±13.21 45.43±10.29 33.17±13.56 34.66±13.40 30.25±13.69

3.2 對乙醇所致小鼠記憶再現障礙模型的影響 各組小鼠學習訓練4 d后，平均潛伏期較第一天均已經明顯縮短，各組動物均能找到站臺。第5日，一次性口服灌胃50%乙醇7 ml/kg后，與空白對照組比較模型對照組動物潛伏期延長差異有統計學意義(P＜0.01)，小鼠記憶再現障礙模型成立;與模型對照組比較蘇香1號28、14 mg/kg組動物潛伏期明顯縮短(P＜0.05)。表明蘇香1號28、14 mg/kg組能顯著降低乙醇引起記憶再現障礙模型小鼠找到站臺的潛伏期。見表2。

表2 蘇香1號對乙醇所致的記憶再現障礙小鼠潛伏期的影響(s，±s)

表2 蘇香1號對乙醇所致的記憶再現障礙小鼠潛伏期的影響(s，±s)

注:與空白對照組比較▲▲P＜0.01，與模型對照組比較*P＜0.05，＊＊P＜0.01，差異均有統計學意義

組別 劑量mg/kg 第1天(s) 第2天(s) 第3天(s) 第4天(s) 第5天(s)空白對照組 - 43.10±7.33 30.04±11.66 29.10±12.99 24.74±9.93 21.57±10.13模型對照組 - 42.75±13.88 32.64±14.85 32.55±10.24 26.79±13.78 45.50±7.19▲▲吡拉西坦組 640 44.22±10.25 37.51±13.20 31.50±11.24 25.06±10.45 20.14±9.78＊＊蘇香1號組 28 43.53±12.88 39.26±13.52 33.53±10.55 29.84±11.26 28.54±11.77*蘇香1號組 14 44.41±10.51 45.48±10.65 41.79±11.93 30.06±15.61 28.94±15.38*蘇香1號組 7 37.83±9.83 33.26±14.97 30.53±14.98 30.06±12.62 35.37±17.53

3.3 對亞硝酸鈉所致小鼠記憶鞏固障礙模型的影響實驗第2～4 d，與空白對照組比較模型對照組小鼠潛伏期比較均顯著延長(P＜0.05)。實驗第4 d，與模型對照組比較，蘇香1號28、14、7 mg/kg組動物潛伏期均明顯縮短(P＜0.05和P＜0.01)。表明蘇香1號28 mg/kg組能顯著降低亞硝酸鈉引起記憶鞏固障礙模型小鼠找到站臺的潛伏期。見表3。

表3 蘇香1號對亞硝酸鈉所致記憶鞏固障礙小鼠平均潛伏期的影響(s，±s)

表3 蘇香1號對亞硝酸鈉所致記憶鞏固障礙小鼠平均潛伏期的影響(s，±s)

注:與空白對照組比較▲P＜0.05，與模型對照組比較*P＜0.05，＊＊P＜0.01，差異均有統計學意義

組別 劑量mg/kg 第1天(s) 第2天(s) 第3天(s) 第4天(s)空白對照組 - 44.24±7.19 28.54±11.91 15.97±6.22 22.46±6.81模型對照組 - 48.36±9.26 42.85±10.47▲ 23.44±6.88▲ 31.76±7.39▲吡拉西坦組 640 47.88±9.56 33.12±10.26 18.21±6.02 18.43±6.17＊＊蘇香1號組 28 51.57±11.58 35.81±11.79 30.10±15.79 22.92±7.05*蘇香1號組 14 45.52±14.55 30.54±8.30 29.84±17.80 32.78±15.79蘇香1號組 7 49.83±13.20 37.17±9.56 29.26±11.02 31.26±9.62

3 討論

學習記憶屬于高級神經活動，其基本過程可以大致分為獲得(Acquisition)、鞏固(Consolidation)和再現(Retrieval)三個階段［5］。學習和記憶既是腦的高級功能，又是極復雜的神經活動過程，相應的，學習記憶障礙的產生機制也十分復雜，涉及神經生理學、神經藥理學、神經生化學等多學科的內容。根據記憶過程的生理生化基礎，在進行藥物研究中，通常在訓練前或訓練后不同時間給予動物某些化學藥物，造成各種記憶障礙模型。此種模型較正常動物更能正確反應藥物的作用，從而可用于藥物的篩選或初步分析其作用機理。

中樞神經抑制劑戊巴比妥鈉，能破壞動物的學習記憶獲得，致使小鼠記憶獲得障礙。蘇香1號28、14 mg/kg能使記憶獲得障礙小鼠平均潛伏期縮短，與模型對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05)。乙醇在低濃度下可明顯破壞記憶過程［6］，能明顯干擾記憶的在現，造成記憶再現障礙，且結果穩定。蘇香1號28、14 mg/kg組能明顯縮短記憶再現障礙小鼠的平均潛伏期(P＜0.05)。小鼠皮下注射亞硝酸鈉(NaNO2)可致動物腦部缺氧［5］，造成腦血循環發生障礙，導致記憶能力下降。蘇香1號28 mg/kg組動物能明顯縮短記憶鞏固障礙小鼠的平均潛伏期(P＜0.05)。以上實驗表明，蘇香1號能明顯改善戊巴比妥鈉、乙醇和亞硝酸鈉所致的記憶獲得障礙、記憶再現障礙以及記憶鞏固障礙。

［1］董曉華，張丹參，房杰.大黃酚對東莨菪堿致小鼠學習記憶障礙的作用及腦內NO和NOS的影響.河北北方學院醫學報，2009，26(1):7-9.

［2］徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學.第二版，北京:人民衛生出版社，1992，662-663.

［3］顧健，胡錦官，譚睿。石菖蒲及其有效成分對小鼠學習記憶的作用及α-細辛醚藥物動力學研究.世界科學技術中醫藥現代化基礎研究，2003，5(1):53-57.

［4］陳艷萍.珍腦膠囊對NaNO2所致記憶鞏固障礙小鼠學習記憶能力的影響.現代中藥研究與實踐，2009，23(4):39-40.

［5］吳馥梅，蕭信生.學習記憶及其腦內突觸機制.自然雜志，1991，14(10):746.

［6］汪根盛.乙醇的神經行為毒性及作用機制，職業衛生與應急救援，1997，15(3):148-150.