從蟑螂體內(nèi)檢出O1群霍亂弧菌＊

王路梅，楊晉川，郭 惠，張 雷，景懷琦

從蟑螂體內(nèi)檢出O1群霍亂弧菌＊

王路梅，楊晉川1，郭 惠1，張 雷1，景懷琦2

霍亂弧菌可引起霍亂的發(fā)生，是國家法定的甲類傳染病，多檢出于水體，海產(chǎn)品和水產(chǎn)品中；而從蟑螂體內(nèi)檢出霍亂弧菌尚未有報(bào)道。筆者于2010年12月份從蟑螂體內(nèi)檢出一株O1群霍亂弧菌，稻葉血清型。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標(biāo)本來源 分別在徐州市區(qū)的超市、醫(yī)院、居民區(qū)、賓館、餐飲店，采集蟑螂共計(jì)30份。

1.1.2 試劑、血清及設(shè)備 霍亂弧菌熒光定量PCR檢測試劑盒為深圳易瑞生物制品有限公司生產(chǎn)；霍亂弧菌O1/O139免疫磁珠為天津生物芯片技術(shù)有限責(zé)任公司產(chǎn)品；堿性蛋白胨水、TCBS為杭州天和微生物試劑有限公司生產(chǎn)，弧菌顯色培養(yǎng)基為法國Chromagar產(chǎn)品，弧菌生化鑒定管購自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司；霍亂弧菌多價(jià)、小川、稻葉型血清由中國藥品生物制品鑒定所提供。Invitrogen Bead RetrieverTM全自動微生物磁珠分選儀、ABI 7500熒光定量PCR儀、智能恒溫恒濕培養(yǎng)箱單位自備。

1.2 方法

1.2.1 分離方法 將采集到的單只蟑螂用無菌的方法剖開蟑螂，取其腸內(nèi)容物，剪碎放入2mL堿性蛋白胨水中，36℃增菌8h，取8h增菌液1mL進(jìn)行霍亂弧菌熒光PCR檢測，熒光PCR檢測陽性者進(jìn)行2次增菌，36℃培養(yǎng)18h；分別取PCR陽性的8h增菌液和二次增菌液各500μL進(jìn)行免疫磁珠富集，將免疫磁珠富集后的混懸液分別劃線于TCBS平板和弧菌顯色平板，36℃培養(yǎng)18h。

1.2.2 血清凝集 挑取TCBS和弧菌顯色平板上的可疑菌落轉(zhuǎn)種于營養(yǎng)平板分純，取純菌落分別與O1群霍亂弧菌多價(jià)和O139群霍亂血清凝集，如O1群多價(jià)血清凝集陽性再分別與稻葉型和小川型血清凝集，生理鹽水陰性。

1.2.3 生化確認(rèn) 取純菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，氧化酶試驗(yàn)，以及其它生化確認(rèn)試驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1 霍亂弧菌檢出情況 經(jīng)熒光PCR方法、免疫磁珠富集、TCBS和弧菌顯色培養(yǎng)基分離證實(shí)，從30份蟑螂體內(nèi)檢出一株O1群霍亂弧菌，檢出率為3.33%。

2.2 菌株生物特性 革蘭氏染色陰性，菌體短小，呈弧狀；氧化酶＋；血清分型為O1群稻葉型霍亂弧菌，生化特征詳見表1。

表1 蟑螂體內(nèi)檢出霍亂弧菌生化譜

2.3 霍亂弧菌的帶毒情況 此株霍亂弧菌經(jīng)中國CDC傳染病所國家細(xì)菌分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室檢測證實(shí)，不攜帶ctxAB毒素基因。

3 討 論

蟑螂或稱蜚蠊，俗稱偷油婆、茶婆子、灶螞子、貨郎等。在昆蟲中，蟑螂是最古老的種類之一。由于它們適應(yīng)性強(qiáng)，早已從發(fā)源地非洲通過海運(yùn)商船被帶到南美、東歐和南亞的港口城市，以后逐漸擴(kuò)散到溫帶，甚至到北方寒冷地區(qū)，現(xiàn)已成為當(dāng)今重要的衛(wèi)生害蟲。蟑螂可攜帶多種細(xì)菌，病毒，真菌，寄生蟲卵。若使用被蟑螂污染過的食物極易引起腸道傳染病和腸道寄生蟲病的發(fā)生。據(jù)翟明芳［1］等人的報(bào)道，蟑螂在不同生境下體表帶菌率為93.65%，而在醫(yī)院，農(nóng)貿(mào)市場，賓館及居民區(qū)蟑螂的體表帶菌率為100%；而林英姿［2］等人對170只蟑螂體表帶菌的調(diào)查結(jié)果為：82.4%的蟑螂都不同程度的帶有大腸桿菌，銅綠假單胞菌，沙門氏菌，金黃色葡萄球菌，變形桿菌和霉菌等。

在我國蟑螂以前主要分布于南方地區(qū)，那里的氣候常年溫暖濕潤，適宜蟑螂的生存。隨著交通、物流的日益發(fā)達(dá)，蟑螂逐漸被帶到了北方。徐州地區(qū)是從1995年以后才逐漸有蟑螂孽生的。蟑螂適宜生存溫度為20～30℃，低于0℃就會被凍死。徐州地區(qū)冬季較寒冷，但是隨著人民生活水平的提高，取暖設(shè)備的普遍使用，以致蟑螂可以終年活動和繁殖。此次檢出的1株O1群的霍亂弧菌來源于本市某一大型超市加工區(qū)內(nèi)采集的蟑螂體內(nèi)。由于超市都具有取暖設(shè)施并且有充足的食物和水源，非常適宜蟑螂的孽生和繁殖。筆者分析此只蟑螂有可能污染過海水產(chǎn)品，并攜帶了海水產(chǎn)品中常見的霍亂弧菌。

霍亂弧菌可引起烈性腸道傳染病，起病急，傳播快，自1817年首次爆發(fā)以來已經(jīng)引起了7次世界范圍內(nèi)的霍亂大流行［3］。此株O1群霍亂弧菌雖然不攜帶ctxAB毒素基因，但是在特定的條件下，即使非產(chǎn)毒株的霍亂弧菌如污染水或食品，也可引起水源性或食源性病例甚至爆發(fā)流行［4］。超市內(nèi)的蟑螂如不被及時(shí)消滅，蟑螂隨處爬行，釋放排泄物，就極易造成超市內(nèi)霍亂弧菌的大面積污染。而霍亂的主要傳播途徑就是經(jīng)食物和水，所以要切實(shí)加強(qiáng)超市的衛(wèi)生管理，徹底滅除蟑螂。

［1］翟明芳，馬楨紅，張夢寒，等.蘇州市蟑螂帶菌情況調(diào)查研究［J］.醫(yī)學(xué)動物防制，2008，24（2）：133－134.

［2］林英姿，崔玉寶，楊文，等.海南5城市蟑螂種類組成及其體表帶菌情況調(diào)查［J］.中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志，2008，26（1）：77－78.

［3］高守一.霍亂防治手冊［M］.5版.北京：中華人民共和國衛(wèi)生部，1999：1－3.

［4］嚴(yán)寒秋，李偉，吳疆，等.一起有非產(chǎn)毒霍亂弧菌引發(fā)腹瀉暴發(fā)的調(diào)查［J］.中華流行病學(xué)雜志，2006，27（10）：918－919.

R378.3

A

1002－2694（2011）10－0948－02

＊江蘇省衛(wèi)生廳預(yù)防醫(yī)學(xué)科研項(xiàng)目（Y200722）。

景懷琦，Emai：jinghuaiqi＠icdc.cn

1.徐州市疾病預(yù)防控制中心，徐州 221006；2.中國CDC傳染病所，北京 102206

2011－05－03；

2011－08－07