道地中藥材半夏離體快繁技術

賀美忠

（山西農科院高寒區作物研究所，大同 037008）

道地中藥材半夏離體快繁技術

賀美忠

（山西農科院高寒區作物研究所，大同 037008）

半夏是一種草本植物，是常用的藥材，具有降逆止嘔、消痞散結等作用，已經廣泛應用于各種疾病治療中。但是，由于該藥材市場產量較低，經常出現供不應求問題。文章主要對道地中藥材半夏離體快繁技術進行介紹，以期給同行提供借鑒。

半夏 快繁技術 研究方法

快繁技術是一種快速培養組織的技術，可以在短時間內產生很多優質的半夏，及時解決臨床應用中存在的短缺問題。文章主要對半夏離體快繁技術進行介紹，希望可以促進半夏的產業化發展。

1 材料與方法

主要以商洛地區種植的地道半夏品種為植株。操作方法：（1）選擇優質外植體。（2）進行滅菌接種。及時對當天采挖的塊莖清洗并去皮，使用清潔液進行浸泡，保證飲用安全。然后將其裝入到三角瓶中，加入70%乙醇浸泡，保證塊莖完全消毒。再使用無菌水沖洗，并將其放置在無菌濾紙上，進行接種。（3）培養基和條件：①MS+2.4D0.5 mg/L+6-BA1.0 mg/L。② MS+NAA0.5 mg/L+6-BA1.5 mg/L。③1/2MS+NAA0.5 mg/L。④ MS+NAA0.2 mg/L+6-BA2.0 mg/L。⑤ 在200～2 000 Lx光照下，培養10～16 h。（4）移栽試管苗。在日光中進行移栽，并用磚塊隔開，方便操作；基質以腐熟藥渣、食用菌廢紙袋及蛭石等組成，并對基質經常處理。移栽前，必須使用微菌素處理，基質厚度為20 cm。

2 設置實驗

首先，對不同誘導途徑進行分析，選擇最適合的生產防范。然后，設置培養條件，仔細觀察生物的生長。最后，配置各種的栽培基質。

3 分析結果

3.1 不同誘導途徑

（1）愈傷組織誘導。在1號培養基上，半個月可遇見組織，組成95%為綠色、堅硬。然后將其嫁接、分化培養，產生叢芽。一般部分疏松組織不成芽時，必須及時丟棄。（2）根據愈傷組織誘導不定芽。給愈傷組織誘導培養基上嫁接外植體，一段時間后，產生愈傷組織，再將其轉接到2號培養基上，一般20 d左右可定芽。（3）直接誘導生芽。直接將外植體嫁接到4號培養基上。（4）進行無外源激素培養。在5號無外源激素上，一般經過2周培養，可變為黃白色，之后枯萎。

3.2 不同培養條件的比對

（1）將外植體接種到4號培養基上，并放在溫度24℃，強度為2 000 Lx的光源下進行照射，通常半個月后可見莖根變色，體積膨脹，再經過20 d后，就會在上部位生長出綠色的芽。接種2個月后，幼芽開始生長，長到3 cm左右會變為淡綠色；葉柄在7 cm時，葉柄基部長出珠芽，并生長出氣生根。（2）將相同的培養物給4號培養基接種，放置在光照為200 Lx的溫度下照射14～16 h發現，根莖表層呈現綠色，體積增大。經過20 d后，愈傷組織繼續膨脹，上部生長為綠色芽狀物。接種2個月后，愈傷組織幼苗枯黃，表面呈現黃色。（3）生根誘導。直接將再生芽誘導，產生的不定芽與愈傷組織誘導產生的芽轉移到3號培養基上，20 d可見不定根。（4）移植前給基質澆水，并將已經生長好的半夏用試管取出，放置在打好孔的基質中，對其進行機械噴水、覆膜和遮陽處理，2周后可長出新根；40 d后長勢較好。

4 討論分析

（1）愈傷組織與半夏再生誘導，各有優缺。在再生誘導中，芽可繼續生長，不需要移植到其他培養基上，操作簡單，成苗期短暫，繁殖速度有限。愈傷組織誘導培養基中的組織長到一定程度后，必須移植到其他培養基，雖然操作環節復雜，但復制的半夏種苗較多。（2）半夏試管苗不能在較低溫度和黑暗下生長；半夏離體在24℃和2 000 Lx光照下，生長2個月后，長勢較好。但在溫度低下和黑暗中，幼苗將枯萎。（3）使用腐熟藥渣促進發芽成長，且充分利用了廢舊資源，操作簡單，成本較低。

5 結語

該文主要對道地中藥材半夏離體快繁技術進行介紹，對再生誘導與愈傷組織等2組方法進行分析。實際應用中，要有針對性選擇。

[1] 陶米林，劉清波，黃紅梅．半夏組織培養體系的建立．北方園藝，2013，（04）

[2] 賈永芳．半夏離體培養研究及遺傳轉化的初探．西南農業大學，2014，（05）