青風藤提取物對小鼠非特異性免疫功能的影響

董永和 邱敏 龐海 劉欣媛 武海軍 楊玉梅

青風藤來源于防己科植物青藤及毛青藤的干燥藤莖[1，2]，含有清風藤堿甲等多種生物堿，能祛風通絡，治療風濕骨痛，氣微，味苦[3，4]。以往研究已證實青風藤制劑具有祛風除濕、活血化瘀、溫經止痛、免疫調節等作用，且毒性小，副作用少等優點，但對其免疫調節功能文獻報道較少。本文主要觀察了青風藤對小鼠非特異性免疫功能的影響，以期進一步為青風藤開發提供科學依據。

1 材料和方法

1.1 藥品與試劑青風藤提取物(每克提取物相當于生藥1.4 g):青風藤，加水煎煮二次，煎液濾過，濾液合并，靜置使沉淀，濾過，濾液濃縮，干燥。臨用時用蒸餾水配成所需濃度。醋酸地塞米松片，新鄉市常樂制藥有限責任公司生產，批號070114。

1.2 實驗方法

1.2.1 青風藤對非特異性免疫功能的影響-碳粒廓清法檢測小鼠單核巨噬細胞吞噬功能小鼠50只，雌雄各半，體重18～22 g，隨機分為5組:第1組，生理鹽水組;第2組，陽性對照組，地塞米松0.004 g/kg;第3～5組，青風藤大、中、小劑量組，分別為0.9 g/kg(相當于生藥量1.26 g)、0.45 g/kg(相當于生藥量0.63 g)、0.225 g/kg(相當于生藥量0.315 g)。各組皆灌胃給藥，0.2 ml/10 g，1次/d，連續灌胃7 d。末次給藥1 h后，各組小鼠均尾靜脈注射印度墨汁(按1∶5稀釋)，立即計時，注射2 min、20 min用玻璃毛細吸管分別從眼眶內眥靜脈叢準確取血20 μl。將取得的血液加到2 ml的0.1%碳酸鈉溶液中，用721B型分光光度計在650 nm波長處測定光密度(A值)，取0.1%碳酸鈉溶液校正零點。取血完畢，用頸椎脫臼法處死小鼠，剖開小鼠腹腔，取其肝臟和脾臟，用濾紙吸干臟器血污，稱重，計算廓清指數K和吞噬指數α，以吞噬指數α值表示小鼠MΦ的吞噬功能。K=(lgA1-lgA2)/(t1-t2)(A1、A2分別代表注射墨汁2 min和20 min時的A值;t為采血時間)α=(K1/3)(W/WLS)(W是體重，WLS是肝脾和重)。

1.2.2 統計學方法數據資料應用SPSS 11.5進行統計學處理，實驗數據均以均數±標準差(±s)表示，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 實驗結果

青風藤提取物大劑量組能夠明顯抑制腹腔巨噬細胞的吞噬百分率和吞噬指數，而中、低劑量組具有降低趨勢但無統計學意義，(P＜0.05，＊＊P＜0.01)(見表1)。

表1 青風藤提取物對小鼠單核巨噬細胞吞噬功能的影響(±s，n=15)

表1 青風藤提取物對小鼠單核巨噬細胞吞噬功能的影響(±s，n=15)

注:與對照組比較*P＜0.05，＊＊P＜0.01

分組劑量(g/kg)廓清指數(K)吞噬指數(α)生理鹽水組0.03±0.015.67±1.09地塞米松組0.0040.01±0.01＊＊4.03±2.40*青風藤提取物小劑量組0.90.02±0.015.40±0.85青風藤提取物中劑量組0.450.02±0.014.95±1.39青風藤提取物大劑量組0.2250.01±0.01＊＊4.38±2.23-*

3 討論

青風藤是常用中藥，該藥藥理功效明確，化學成分穩定，提取方法簡單，臨床應用廣泛，是一個很有醫用價值和開發前景的中藥。目前對于青風藤藥理作用的研究多集中在中樞神經系統、免疫系統[5]和心血管系統。此外，青風藤及青藤堿是很有研究價值和前景的天然戒毒藥物，它們對阿片類戒斷綜合征療效確切，而藥物本身無成癮性。對其抗嗎啡依賴作用及機理的深入研究，將有助于全面評價青風藤和青藤堿在戒毒方面的應用[6，7]。隨著對青風藤有效成分提取分離、含量檢測以及藥理機制的深入研究，青風藤及其有效成分在臨床將會得到更廣泛的應用。

巨噬細胞的吞噬作用是機體維持內環境穩定的重要因素，是構成非特異性免疫的關鍵環節，也是機體產生特異性免疫應答的基礎。大多數抗原經巨噬細胞處理后，免疫原性會大大增強，從而刺激機體產生良好的免疫應答[8]。青風藤提取物能降低小鼠的單核-腹腔巨噬細胞吞噬和碳廓清能力。結果提示:青風藤提取物具有降低小鼠非特異性免疫功能的作用。

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[2]中國藥典[S].一部.化學工業出版社，2005.

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[6]蔡紅兵，莫志賢，李欣.青風藤及青風藤堿在體內外對嗎啡依賴模型戒斷反應的影響.北京中醫藥，2008，27(8):652-655.

[7]張國梅，莫志賢，王彩云.青風藤醇提液及其有效成分防治嗎啡戒斷癥狀的實驗研究.中藥材，2009，32(9):1414-1418.

[8]柳翰凌，康小紅.灌胃雙歧桿菌BB1對免疫低下小鼠非特異性免疫功能的影響.實驗動物科學，2008，25(1):6-7.