精子頂體酶活性定量檢測與男性不育病例分析

董樹林 曲文玉 王立名 王蔓 何家梅

20世紀(jì)90年代初開始了對精子頂體酶與男性不育關(guān)系的研究，認(rèn)為頂體酶與精子能否穿越卵細(xì)胞透明帶有關(guān)，頂體酶含量低則精子穿過卵細(xì)胞透明帶的能力下降，因而影響受孕、IUI和IVF的成功率。但是一直以來，精液常規(guī)分析(CASA)都是被用來作為男性生育能力的主要指標(biāo)。雖然過去有許多研究表明，精液中精子數(shù)量及活動精子的百分率與自然妊娠率在統(tǒng)計學(xué)上有顯著的相關(guān)性，但臨床上大約有三分之一男性不育患者的精液常規(guī)分析結(jié)果正?；蚪咏?。因此僅僅依靠精液常規(guī)分析(CASA)的結(jié)果來預(yù)測男性生育狀況是比較片面的。正常受孕過程是精子在女性生殖道運動到輸卵管的壺腹部與卵子相遇，識別并誘發(fā)頂體反應(yīng)，精子與卵子融合形成早期胚胎，最后是受精卵的種植，在受精過程中每個環(huán)節(jié)出現(xiàn)異常都會導(dǎo)致不育。而精液常規(guī)檢查(CASA)最主要指標(biāo)為精子濃度和精子運動能力。所以，對男性不育患者檢查要慎重，特別是不育時間超過1年的男性人群，除了檢查精液常規(guī)(CASA)外，還應(yīng)做精子功能檢測試驗。如:精子頂體酶活性定量，鈣離子誘發(fā)頂體反應(yīng)，精子-透明質(zhì)結(jié)合實驗，精子DNA碎片，精子核蛋白染色等。本文通過對精子頂體酶活性定量實驗與臨床男性不育病例分析，就精子頂體酶活性定量異常與男性不育的關(guān)系進(jìn)行探討。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源統(tǒng)計我院男科門診2011年7月至9月間395例男性不育患者(不育時間均1年以上)進(jìn)行精子頂體酶活性定量檢測。

1.2 實驗原理與結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)精子頂體內(nèi)存在精氨酸酰胺酶，其活性可反應(yīng)頂體酶全部活性，精氨酸酰胺酶以N-9-苯甲酸-DL-精氨酸-P-硝酰基苯胺為底物，分解產(chǎn)生有色產(chǎn)物-硝?；桨?，通過測定該產(chǎn)物量可推算出精氨酸酰胺酶的活性，試劑盒為深圳華康生物醫(yī)學(xué)工程有限公司生產(chǎn)的精子頂體酶活性定量檢測試劑盒。按照WHO推薦的改良Kennedy法，準(zhǔn)確檢測人精子中精子頂體酶活性，更真實的應(yīng)用于精子頂體酶活性的評價。精子頂體酶活性定量標(biāo)準(zhǔn):參考值48.2uIU-218.7uIU/106精子。

頂體酶存在于精子頂體內(nèi)膜及赤道膜上，它是受精過程中的蛋白水解酶，通常以活性形式存在，當(dāng)精子頭部進(jìn)入卵透明帶時，頂體酶原被活化為頂體酶，水解卵透明帶使精子穿過卵透明帶最終與卵子融合。

2 結(jié)果

所選395例病例均為夫婦不孕不育1年以上的男性，且無精液液化異常，精子濃度大于10×106/ml以上。精子濃度、活動率及精子頂體酶活性定量檢測統(tǒng)計列表1如下:

表1 部分精液常規(guī)與頂體酶活性相關(guān)性統(tǒng)計

3 討論

通過病例統(tǒng)計不難發(fā)現(xiàn)常規(guī)精液檢查(CASA)的精子濃度、活動率及活力正常，精子頂體酶活性定量異常比率3.8%[1]，也就是說只通過精液常規(guī)檢查(CASA)，頂體酶活性定量檢測一項漏診比率3.8%。精子濃度大于10×106/ml，活動率及活力正常頂體酶活性定量異常為4.8%;值得注意的是精子濃度大于10×106/ml，精子活動率或活力異常，即少弱精子癥患者頂體酶活性定量異常率占21.0%[2]。因此，提示男科醫(yī)生除精液常規(guī)檢查(CASA)外，不可忽視精子頂體酶活性定量檢測等其他精子功能檢查。

頂體酶活性可反應(yīng)精子質(zhì)量的一個方面，頂體酶活性的不足可導(dǎo)致不育，臨床精子存活率低，死精子癥以及嚴(yán)重生殖系統(tǒng)感染。特別是解脲支原體嚴(yán)重感染可造成精子頂體酶活性降低。此外，更具有意義的是通過常規(guī)精液檢查(CASA)正常，難以鑒別不孕不育原因者，存在頂體酶活性低的情況。頂體酶活性定量是判斷男性精子功能和生育力強(qiáng)弱的重要評價指標(biāo)之一，通過檢測也為輔助生殖(IUI、IVF和ICSI)治療方案的實施提供更可靠的依據(jù)。

[1]黃宇烽，許瑞吉.男科診斷學(xué).第二軍醫(yī)大學(xué)出版社，1999:158-163.

[2]熊承良，吳明章，周繼紅，等.主編.人類精子學(xué).湖北科學(xué)技術(shù)出版社，2002:427-428.