非發酵革蘭陰性桿菌臨床耐藥性分析

梁偉 李娟

近年來，由于各種廣譜抗菌藥物、免疫制劑的大量使用以及介入性診療技術的開展，醫院非發酵革蘭陰性桿菌的感染率和耐藥率日漸增高。為了解我院非發酵革蘭陰性桿菌的感染和耐藥情況，以提高臨床抗菌藥物的應用。我們對我院2010年5月～2011年5月非發酵革蘭陰性桿菌的分布和耐藥性進行了分析，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源

2010年5月～2011年5月,我院住院和門診患者各類標本中,包括支氣管分泌物及痰、分泌物(引流液、創面拭子)、膿液、中段尿、血液、胸、腹水、腦脊液等,分離得到銅綠假單胞菌315株、不動桿菌屬64株、嗜麥寡養單胞菌26株。剔除同一患者相同部位的重復菌株。

1.2 細菌分離培養與鑒定

按《全國臨床檢驗操作規程》[1]對各類標本進行接種、分離,采用DadeBehring Microscan Autoscan-4微生物鑒定儀作菌株鑒定,鑒定儀和NC-31鑒定卡購自美國德靈公司。

1.3 藥物敏感性試驗

藥敏試驗采用K-B紙片擴散法,M-H瓊脂為杭州天和產品。藥敏紙片(英國Oxoid公司產品):氨曲南、頭孢他啶、慶大霉素、哌拉西林、亞胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林/克拉維酸、復方新諾明、頭孢吡肟、左氧氟沙星、環丙沙星、美羅培南、米諾環素。結果判定標準按照美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)規定進行。采用WHONET5.3進行統計學分析。

1.4 質控菌株

銅綠假單胞菌ACTCC 27853(購自中國藥品生物制品檢定所)。

2 結果

2.1 病原菌分布情況

2010年5月～2011年5月從我院臨床和門診患者各類標本中共分離出851株革蘭陰性桿菌,其中非發酵革蘭陰性桿菌428株占50.3%，以銅綠假單胞菌檢出率最高，共315株(73.5%)、其次為不動桿菌屬64株(15.0%)、嗜麥芽寡養單胞菌26株(6.1%),其他非發酵細菌,包括伯克霍德菌屬、產堿菌屬細菌23株(5.4%)。分離情況見表1。

表1 非發酵革蘭陰性桿菌菌檢出分布構成比(%)

表2 428株非發酵菌在臨床標本中的分布（株）

2.2 臨床各類標本的分離率

所有非發酵革蘭陰性桿菌以支氣管分泌物及痰標本檢出率最高309株(72.2%),其次為分泌物52株(12.1%),中段尿41株(9.6%),膿液10株(2.3%),血液9株(2.1%)，胸、腹水7株(1.6%),各類細菌的標本分離構成比見表2。

2.3 藥敏結果

三種常見非發酵革蘭陰性桿菌對13種抗菌藥物的耐藥情況見表3。

表3 三種非發酵糖革蘭陰性桿菌對18種抗菌藥物的耐藥率（%）

3 討論

非發酵菌為一群需氧或兼性厭氧、不發酵糖類革蘭陰性桿菌,包括假單胞菌屬、不動桿菌屬、產堿桿菌屬、寡養單胞菌屬等。臨床上比較常見的為銅綠假單胞菌、不動桿菌屬和嗜麥芽寡養單胞菌。近年來,由于臨床上廣譜抗生素的大量應用,以及免疫抑制性藥物和各種侵襲性診療方法的普及應用,使得耐藥率高的非發酵菌在臨床的感染率呈逐年上升趨勢,其已成為引起院內感染的主要病原菌之一[2]。本院分離的非發酵菌中以銅綠假單胞菌檢出率最高,其次為不動桿菌屬和嗜麥芽寡養單胞菌,占醫院總分離革蘭陰性桿菌的50.3%(428/851)。從臨床標本分布特點來看,以支氣管分泌物及痰中分離率最高,其次為分泌物,提示非發酵菌是引起本院患者呼吸系統和傷口感染的主要致病菌。

非發酵革蘭陰性桿菌對常用抗菌藥物的耐藥率呈逐年上升趨勢。NCCLS 2003、2004年規定,用于銅綠假單胞菌、不動桿菌屬常規檢測的B類抗菌藥物氨曲南在本院的耐藥率以分別達到50.48%, 76.56%,已不適合作為治療銅綠假單胞菌及不動桿菌屬的常規和經驗用藥[3]。另一方面,以往常用于治療銅綠假單胞菌、不動桿菌屬感染的碳青霉烯類藥物（美羅培南、亞胺培南）已經出現了較高的耐藥率且均以＞50%；其他多種抗菌藥物(哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、復方新諾明、慶大霉素、替卡西林/克拉維酸)的耐藥率均以＞50%,臨床抗菌藥物的使用應參考微生物實驗室的藥敏數據。對于嗜麥芽寡養單胞菌的藥敏試驗,紙片法常規只檢測復方新諾明、左氧氟沙星和米諾環素3種抗菌藥物[4-6]。從表3中顯示,嗜麥芽寡養單胞菌對美羅培南、亞胺培南天然耐藥,對復方新諾明、左氧氟沙星和米諾環素3種抗菌藥物的耐藥率分別為38.46%、19.23%、3.85%。

非發酵菌耐藥現象嚴重,對多種抗菌藥物具有天然耐藥性[7-9]。非發酵菌的耐藥機制十分復雜,其可通過質粒、染色體及轉座子介導的超廣譜β-內酰胺酶、氨基糖苷類修飾酶、青霉素結合蛋白改變、外膜蛋白通透性降低等機制傳播獲得耐藥性[2，10]。非發酵菌已成為院內感染的重要病原菌，且耐藥率高，這給臨床抗感染治療增加了難度，因此臨床醫師應根據微生物實驗室的藥敏結果合理選用抗菌藥物，對減少和延緩耐藥菌株的產生,有效控制醫院感染具有重要的意義[11]。

[1]葉應嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規程[M].2版.南京:東南大學出版社,1997：472-527.

[2]肖永紅,王進,趙彩云,等.2006～2007年Mohnarin細菌耐藥監測［J］.中華醫院感染學雜志,2008,18(8):1051-1056.

[3]漆堅,程獻.銅綠假單胞菌耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志,2007,17(10):1285-1286.

[4]鄧笑偉,劉長庭.嗜麥芽寡養單胞菌感染危險因素與耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志,2007,17(4):462-464.

[5]李艷,劉長庭,王德龍,等.嗜麥芽寡養單胞菌所致醫院感染及危險因素分析[J].中華醫院感染學雜志,2007,17(9):1160-1162.

[6]余素飛,楊雪飛,李婷婷.嗜麥芽寡養單胞菌感染分布及耐藥性研究[J].中華醫院感染學雜志,2006,16(5):587-588.

[7]蘇維奇,李莉,朱元琪,等.青島地區醫院感染非發酵菌的分布特點及耐藥性分析[J].中國抗生素雜志,2008,33(1):61-63.

[8]趙虎，周庭銀，陳險峰，等.重癥監護室非發酵菌的檢出率及其耐藥性分析［J］.中國感染控制雜志，2004,3(1):39-42.

[9]吳偉元,何林,吳勁松,等.鮑氏不動桿菌對9種抗菌藥物敏感性及其多重耐藥分析[J].中華醫院感染學雜志,2006,16(5):572-57.

[10]陳建中,黃支密,單浩,等.4種非發酵糖革蘭陰性桿菌β-內酰胺酶基因研究[J].中華醫院感染學雜志,2006,16(8):862-864.

[11]華建平,夏涌.517株革蘭氏陰性桿菌耐藥分析[J].當代醫學(學術版),2007(10):38-40.