血清IL-10與缺血性腦卒中早期進(jìn)展的關(guān)系

王曉霞 楊巧蓮 黨連生 (包頭市第四醫(yī)院，內(nèi)蒙古 包頭 04030)

進(jìn)展期缺血性腦卒中在缺血性腦血管病中的發(fā)生率較高，約為25% ～40%〔1〕，與不良預(yù)后有關(guān)，可增加病死率和遠(yuǎn)期致殘率，尋找與其發(fā)生有關(guān)的早期預(yù)測(cè)因素和潛在的病理機(jī)制，對(duì)于探討干預(yù)措施有重要的臨床意義。本文探討IL-10在進(jìn)展期腦卒中發(fā)生、發(fā)展的作用及相互關(guān)系，以期從分子水平對(duì)缺血性腦卒中的進(jìn)展作出預(yù)測(cè)。

1 資料與方法

1.1 病例選擇 選擇2006年2月至2009年5月我院住院病人，首次發(fā)病24 h內(nèi)的腦卒中患者500例(男273例，女227例)，年齡43～92歲，平均(63.9±12.8)歲。診斷符合以下標(biāo)準(zhǔn):①符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)第四屆全國(guó)腦血管病會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)〔2〕，②經(jīng)頭顱CT或MRI掃描證實(shí)。排除以下情況:①近期有感染(發(fā)病前2 w)。②伴發(fā)嚴(yán)重的心、肝、腎疾病。③伴自身免疫性疾病或腫瘤。④腦卒中后出血或腦出血。⑤血液系統(tǒng)疾病。根據(jù)SNOBS對(duì)每1例患者進(jìn)行評(píng)估，選出進(jìn)展期腦卒中60例，男35例，女25例，年齡43～92歲，平均(65.45±10.25)歲。非進(jìn)展期腦卒中60例，男37例，女23例，年齡45～83歲，平均(61.32±13.69)歲。兩組按年齡、性別、血壓、血糖匹配，無(wú)顯著性差異，具有可比性(P＞0.05)。

1.2 對(duì)照組 選擇同期無(wú)心、肝、腎疾病的非患該病的同期住院患者30例，男19例，女11例，年齡45～78歲，平均(60.60±10.59)歲。

1.3 進(jìn)展期腦卒中診斷標(biāo)準(zhǔn) 于發(fā)病6 h～7 d臨床癥狀加重，采用臨床表現(xiàn)來(lái)自SSS評(píng)分系統(tǒng)的SNOBS進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分。符合下列條件之一:①在意識(shí)水平、上下肢運(yùn)動(dòng)、眼球運(yùn)動(dòng)中任何一種≥2分的加重，②在言語(yǔ)功能中有≥3分的加重，③ SSS評(píng)分下降≥9分，④SSS評(píng)分較入院時(shí)下降18%。排除梗死后出血、其他血管發(fā)生新的梗死，或因嚴(yán)重的感染、高熱、心功能不全所致的病情進(jìn)展即診斷為PIS。

1.4 血液標(biāo)本的采集和處理 受檢者分別在發(fā)病第1、3、7天清晨空腹采靜脈血4 ml，在室溫下靜置2 h后，置離心機(jī)3 000 r/min離心5 min，用加樣器取上清液置于干燥試管內(nèi)，封口放于－30℃低溫冰箱中保存待測(cè)。

1.5 試劑 IL-10采用ELISA法測(cè)定，檢測(cè)試劑盒由晶美生物工程公司提供。

1.6 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS11.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，各組數(shù)據(jù)用±s表示，進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，所用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法有單因素方差分析，兩樣本t檢驗(yàn)和線性相關(guān)分析。

2 結(jié)果

進(jìn)展期腦卒中、非進(jìn)展期腦卒中組與對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)血清IL-10水平比較，病程24 h，對(duì)照組、進(jìn)展期腦卒中組、非進(jìn)展期腦卒中組三組相比，血清 IL-10水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=17.936，P＜0.05)。與對(duì)照組、非進(jìn)展期腦卒中組相比，進(jìn)展性腦卒中組血清IL-10水平升高(P＜0.05)。與正常組比較，非進(jìn)展期腦卒中組血清IL-10水平有升高趨勢(shì)，但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

病程3 d，對(duì)照組、進(jìn)展期腦卒中組、非進(jìn)展進(jìn)展期腦卒中組三組相比，血清IL-10水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=28.983，P＜0.05)。在病程3 d進(jìn)展期腦卒中組、非進(jìn)展期腦卒中組與對(duì)照組相比血清IL-10濃度升高(P＜0.05)。進(jìn)展期腦卒中組血清IL-10濃度明顯高于非進(jìn)展期腦卒中組(P＜0.05)。

病程7 d，對(duì)照組、進(jìn)展期腦卒中組、非進(jìn)展期腦卒中組三組相比，血清IL-10水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=12.534，P＜0.05)。在病程7 d進(jìn)展期腦卒中組、非進(jìn)展期腦卒中組與對(duì)照組相比，血清IL-10濃度升高(P＜0.05)。病程7 d進(jìn)展期缺血性腦卒中組血清IL-10濃度高于非進(jìn)展期缺血性腦卒中組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

表1 各組不同時(shí)間點(diǎn)血清IL-10水平比較(±s，mmol/L)

表1 各組不同時(shí)間點(diǎn)血清IL-10水平比較(±s，mmol/L)

與對(duì)照組比較:1)P＜0.05;與非進(jìn)展期腦卒中組比較:2)P＜0.05

24 h 3 d 7 d進(jìn)展期腦卒中組 60 126.83±23.561)2) 133.73±22.531)2)125.11±31.631)分組 n非進(jìn)展期腦卒中組60 108.39±19.26 111.42±19.631)2)122.05±21.961)對(duì)照組30 102.29±18.7 102.29±18.77 102.29±18.77

3 討論

缺血性腦損傷的機(jī)制除了能量代謝、興奮性氨基酸、離子通道、NO、熱休克蛋白基因表達(dá)等因素外，細(xì)胞因子在其中也占有重要作用〔3〕。研究發(fā)現(xiàn)，急性缺血性腦卒中(ACIS)初期，在炎性細(xì)胞反應(yīng)出現(xiàn)之前出現(xiàn)炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，如白細(xì)胞介素、腫瘤因子，可介導(dǎo)缺血損傷時(shí)的炎性反應(yīng)。IL-10是一種多效性的生物因子，具有免疫抑制與免疫刺激的雙重作用。由于最早發(fā)現(xiàn)它具有抑制Th1細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的作用，故又稱為細(xì)胞因子合成抑制因子。它具有廣泛的生物學(xué)活性，是一種與腦缺血損傷、損傷修復(fù)過(guò)程相關(guān)的重要抗炎細(xì)胞因子，具有神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用〔4〕。

本研究發(fā)現(xiàn)，進(jìn)展性缺血性腦卒中早期血清IL-10水平在病程24 h即升高，至病程3 d時(shí)達(dá)高峰，在病程7 d已下降，但仍高于正常對(duì)照組(P＜0.05)。非進(jìn)展期腦卒中與正常組相比，血清IL-10水平在病程24 h即升高，病程7 d時(shí)達(dá)到高峰(P＜0.05)。這一結(jié)果與有些學(xué)者們的研究結(jié)果不一致。Perini等〔4〕觀察到缺血性腦卒中患者血中IL-10水平較健康人明顯減低，但沒(méi)有發(fā)現(xiàn)IL-10水平與臨床癥狀之間存在關(guān)聯(lián);認(rèn)為低IL-10水平不是缺血應(yīng)激導(dǎo)致，而是在發(fā)病前就存在的一種狀態(tài)，提示血中低水平的IL-10是腦卒中的一個(gè)危險(xiǎn)因素。Vila等〔5〕認(rèn)為外周血IL-10水平與急性缺血腦卒中病人早期臨床病情輕重呈負(fù)相關(guān)。另一些學(xué)者研究結(jié)果顯示:在急性腦梗死發(fā)生后，血中IL-10的含量從發(fā)病第1天開始就顯著升高，于第3天達(dá)高峰，隨后逐漸下降，但持續(xù)到第14天仍顯著高于對(duì)照組，呈現(xiàn)一個(gè)急速升高又緩慢下降的動(dòng)態(tài)變化過(guò)程〔6～8〕，提示IL-10可能參與了腦卒中后的炎癥反應(yīng)。且發(fā)病早期神經(jīng)損傷越重IL-10水平越高〔6〕。我們的研究結(jié)果與后者一致。提示在缺血損傷早期，損傷越重IL-10水平越高。

本研究發(fā)現(xiàn)在病程24 h、3、7 d時(shí)進(jìn)展期腦卒中組IL-10水平均高于正常對(duì)照組。特別在病程24 h、3 d進(jìn)展期腦卒中組IL-10水平均明顯高于正常對(duì)照組和非進(jìn)展期腦卒中組(P＜0.05)。這一結(jié)果提示，很可能在IL-10血清濃度達(dá)到某一臨界狀態(tài)后其免疫刺激作用激活。這一過(guò)程的激活可能依賴于人體的功能單位-細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路縱橫交錯(cuò)，某一條信號(hào)通路激活后，這條通路級(jí)聯(lián)反應(yīng)的各級(jí)產(chǎn)物又是其他通路激活的激酶。迅速大量的炎癥因子與抗炎因子產(chǎn)生造成了損傷和抗損傷的激烈對(duì)抗，使機(jī)體遭受急性損害，對(duì)抗程度越激烈損傷程度越重。

在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面，Zhai等〔9〕的研究結(jié)果顯示:大鼠MCAO后6 h就可檢測(cè)到IL-10 mRNA的表達(dá)。陳榮華等〔10〕的研究發(fā)現(xiàn):缺血組腦組織IL-10含量在MCAO后3 h處于較低水平，6 h達(dá)最低，與假手術(shù)組比較變化顯著，隨后逐漸升高;血清中IL-10含量在MCAO后3 h最低，隨后逐漸升高。臨床患者發(fā)病3～6 h住院治療者極少，取得3～6 h病程血標(biāo)本就更為不易。因此沒(méi)有關(guān)于急性腦梗死3～6 h血清IL-10水平的相關(guān)研究。國(guó)外學(xué)者Vila等〔3〕研究發(fā)現(xiàn)超早期(3～24 h)進(jìn)展期腦卒中組與非進(jìn)展期腦卒中組IL-10水平均高于正常組，但進(jìn)展期腦卒中組IL-10濃度低于非進(jìn)展期腦卒中組(P＜0.05)。國(guó)內(nèi)有研究報(bào)道，向腦缺血后側(cè)腦室注射IL-10可明顯縮小梗死灶面積〔11〕。這些研究提示，IL-10是保護(hù)性的抗炎因子。結(jié)合我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，由于IL-10具有免疫的雙向調(diào)節(jié)作用，而人體是復(fù)雜巨系統(tǒng)〔12〕，細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)通路縱橫成網(wǎng)，在腦缺血損傷發(fā)生后，有多種多效型活性物質(zhì)的產(chǎn)生，形成損傷與抗損傷的網(wǎng)絡(luò)，置身于其間的IL-10在人體這個(gè)復(fù)雜系統(tǒng)中所起的作用不同于簡(jiǎn)單的體外實(shí)驗(yàn)。這也提示我們，研究人體的科學(xué)僅僅運(yùn)用建立在經(jīng)典物理學(xué)基礎(chǔ)上的實(shí)驗(yàn)室方法是有很大局限性的。建立在現(xiàn)代物理學(xué)基礎(chǔ)上的系統(tǒng)自主組織理論，作為新的方法論將深刻地影響人類的思維并指導(dǎo)我們的實(shí)踐。

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