雙波長分光光度法測定氯霉素氫化可的松滴耳液中氫化可的松的含量

王藝紅，鄭紹忠，吳藝燕

解放軍第一七五醫院（廈門大學附屬東南醫院），福建漳州 363000

氯霉素氫化可的松滴耳液（氯可滴耳液）是《中國醫藥制劑規范》中收載的品種[1]，其有效成分為氯霉素和氫化可的松，是一種常用的醫院制劑。規范中“含量測定”項下未對氫化可的松進行含量控制。為保證制劑質量，筆者參考有關文獻[2-4]設計了雙波長分光光度法測定氯可滴耳液中氫化可的松的含量。該法不需要分別處理供試品，在氯可滴耳液稀釋1000倍后，便可直接測定氯霉素和氫化可的松的含量。

1 儀器與試劑

紫外可見分光光度計 （島津UV-2250）；分析天平（BT214S，德國賽多利斯）。氫化可的松對照品（山東新華制藥股份有限公司，批號：090913）；氯霉素對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：130555-200602）；氯霉素氫化可的松滴耳液（本院制劑室配制，規格8 ml，批號為100128、100315、100517）；其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 對照品貯備液的制備

準確稱取105℃下干燥至恒重的氯霉素對照品100.0 mg和氫化可的松對照品20.0 mg，分別用無水乙醇溶解并定容至 200 ml，制成貯備液 A（500 μg/ml的氯霉素對照品）和貯備液B（100 μg/ml的氫化可的松對照品）。再精密量取貯備液A、B各100 ml，于250 ml容量瓶中，加水稀釋定容，即得氯霉素濃度為200 μg/ml，氫化可的松的濃度為40 μg/ml的混合溶液。

2.2 等吸收波長的選擇

取編號為A、B、C的100 ml容量瓶3個。分別加貯備液A 2 ml；貯備液 B 5 ml；貯備液 A、B 各 2 ml；加水定容，搖勻備用。將以上3種溶液以水為空白，分別于200～400 nm波長范圍內掃描，建立紫外光吸收圖譜，見圖1。根據圖1，可見氫化可的松在248 nm處有最大吸收，即λ1＝248 nm，而氯霉素在該點與308.7 nm處有等吸收，即參比波長λ2＝308.7 nm。

2.3 線性關系考察

分別精密量取貯備液 C 0.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0 ml分別置于100 ml容量瓶中，用水定容，搖勻。以水為空白，于248、308.7 nm 處測定吸收度（A），求出吸收度之差△A氫化可的松＝A248-A308.7。以濃度（C）為橫坐標，△A為縱坐標進行回歸分析，得回歸方程：A=0.04456C+0.00220，r=0.9999，結果表明，氫化可的松在0～10 μg/ml范圍內線性關系良好。

2.4 精密度試驗

取貯備液C 25 ml，用水稀釋并定容至200 ml，搖勻。分別取樣測定 6 次，測得濃度為 5.076、5.083、5.089、5.090、5.083、5.087 μg/ml，平均 5.0847μg/ml，RSD 為 0.10%。

圖1 貯備液紫外光吸收圖譜

2.5 穩定性試驗

取“2.4”項下供試液，分別于 0、1、2、3、6、8 h 測定，測得濃度分別為 5.059、5.124、5.071、5.140、5.080、5.137 μg/ml，平均為 5.1018 μg/ml，RSD 為 0.70%。

2.6 測定范圍試驗

精密量取氯霉素氫化可的松滴耳液1 ml，置于100 ml容量瓶中，加水定容，搖勻。再精密量取稀釋液4.0、5.0、6.0 ml各5份，分別置50 ml容量瓶中，加水定容并搖勻，即得處方濃度為80%、100%、120%的樣品供試液，測定吸光度，得濃度值，見表1。

表1 不同濃度的供試液的濃度測定情況

2.7 加樣回收率試驗

精密量取貯備液C 4、6、8 ml各3份，分別置于50 ml容量瓶中，再分別各加貯備液B 1.0 ml，加入經稀釋了1000倍的空白供試品溶液至刻度，搖勻。測定吸光度，得濃度值，計算加入氫化的松的回收率。見表2。

2.8 樣品含量測定

精密量取樣品5 ml，稀釋1000倍，使之成為每毫升含氯霉素 25 μg，氫化可的松 5 μg 的溶液。 照“2.6”項下方法測定氫化可的松含量；在278 nm處測定氯霉素含量。三批樣品的測定結果，見表3。

3 討論

氫化可的松是氯可滴耳液的主要成分之一，且為激素類成分，不良反應多且嚴重，為了保障制劑質量，提供臨床安全有效的用藥，有必要建立氫化可的松的含量測定方法。

表2 加樣回收率測定結果

表3 樣品測定結果

3.1 供試品溶液的稀釋劑選擇

氯霉素微溶于水，而氫化可的松不溶于水，因此制備貯備液A、B時使用無水乙醇溶解。此外，其他稀釋過程一律選用環保、廉價、易得的純化水為溶劑，經試驗證明，測定的精密度高，穩定性好，結果可靠。

3.2 空白無干擾

不含氯霉素和氫化可的松的空白供試品溶液稀釋1000倍后，以水為空白，在200～400 nm波長范圍內無吸收，故測定時不需對樣品進行特殊處理。

3.3 方法學要求

樣品稀釋1000倍后，各主要成分在測定波長處的吸收值均在適宜范圍內，符合方法學要求。測定氫化可的松的供試液同時也可用于氯霉素的含量測定，無需另行制備，說明本法供試液的制備簡便，含量測定快速。

綜上所述，使用雙波長分光光度法測定氫化可的松的含量操作快速簡便，結果準確可靠，適用于氯可滴耳液的質量控制。建議將氫化可的松的含量控制寫入法規，進一步完善氯可滴耳液的質量控制。

[1]中華人民共和國衛生部藥政局.中國醫院制劑規范:西藥制劑[M].2版.北京:中國醫藥科技出版社,1995:158.

[2]中華人民共和國衛生部藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].二部.中國醫藥科技出版社,2010:1031.

[3]彭芳玲,李國強,龍榮.氯霉素氫化可的松滴耳液的制備和質量控制及臨床應用[J].現代醫藥衛生學雜志,2006,22(11):1639-1640.

[4]李小軍,王永桂.分光光度法測定氯霉素氫化可的松滴耳液中氫化可的松的含量[J].中國藥事,2004,18(3):179-180.