胃萎消顆粒治療大鼠慢性萎縮性胃炎的實驗研究

李 艷 ，羅興菊 ，陳 駿 ，文家萍 ，郭蓮軍

1.湖北省宜昌市夷陵醫院，湖北宜昌 443100；2.湖北省宜昌市夷陵區醫療保險局，湖北宜昌 443100；3.華中科技大學同濟醫學院，湖北武漢 430030

慢性萎縮性胃炎（CAG）是消化系統疾病治療中的難點之一，屬于癌前病變，對人類健康威脅較大[1]。現代醫學除密切隨訪和手術治療外，尚無其他較好的治療方法。臨床實踐表明，中醫中藥治療本病有較為滿意的效果，顯示了其廣闊的發展前景[2]571-574，[3]。胃萎消顆粒由隔山消、枳實、黃連、黨參、三七等11味中藥組成，具有養陰益氣、健脾導滯、祛瘀生新之功效。本實驗采用熱鹽水灌胃致CAG動物模型，觀察胃萎消顆粒對其治療作用，并探討其機制。現將結果報道如下：

1 材料與方法

1.1 儀器

SN-682型放射免疫γ計數器（上海核福光電儀器有限公司）；DL-8R冷凍離心機（上海離心機械研究所）；胃泌素（GAS）、胃動素（MTL）放射免疫試劑盒（北京華英生物技術研究所）。

1.2 試藥

胃萎消顆粒 （湖北宜昌市夷陵醫院制劑室制備，批號：20080913），處方組成為隔山消、黃連、枳實、黨參、白術、茯苓、三七、白芍、法半夏、甘草、干姜，使用蒸餾水配制成適用濃度的混懸液。

1.3 動物

SD大鼠110只，體質量200～213 g，♂，由華中科技大學同濟醫學院實驗動物中心提供，于普通級動物觀察室飼養。實驗動物質量合格證號：醫動字第19-025號。隨機將110只SD大鼠分為5組，每組各22只，即正常對照組、模型對照組和胃萎消高、中、低劑量組。

1.4 方法

1.4.1 模型制作及給藥方法 除正常對照組外，其余各組均采用熱鹽水灌胃方法制作CAG動物模型[4-5]。即用55℃的15%氯化鈉溶液灌胃，每日1次，每次2.5 ml，共12周。實驗開始，先處死10只正常對照組大鼠，并留取胃大體標本作為對照。從第3周開始，各造模組每2周處死2只大鼠，取胃標本進行病理檢查。第12周末，對照組鼠胃病檢無明確病態表現，其他各組胃病檢均符合慢性萎縮性胃炎表現，提示造模成功。從第13周開始灌服藥物治療，至第24周末結束。其中胃萎消高、中、低劑量組分別予胃萎消顆粒相當于原生藥5.00、2.50、1.25 g/（kg·d）灌胃，正常對照組和模型對照組予以等量蒸餾水灌胃。

1.4.2 檢測指標 實驗各組大鼠停藥并禁食12 h后，每只取血4 ml，平均置于2只試管中。取一管2000 r/min離心5 min，分離血清于-20℃下保存，待測GAS；在另一試管中加入預置的 10%EDTA-Na 30 μl和抑肽酶 30 μl，充分混勻，2000 r/min離心10 min，分離血漿于-20℃下保存，待測MTL。血清GAS和血漿MTL均采用放射免疫法測定。

1.4.3 病理組織學觀察 將各組大鼠剖腹取全胃，沿胃大彎剖開并用生理鹽水漂洗，沿大鼠胃小彎條狀取材，放入10%甲醛中固定，取腺胃前壁、小彎、后壁自幽門到前胃各取材一條約 2.5 cm×0.3 cm 切片，蘇木精-伊紅（HE）染色，參照 1994年美國休斯頓胃炎診斷分類標準[2]，光鏡下觀察胃黏膜糜爛、萎縮、腸上皮化生、增生等情況。按照胃黏膜損傷的程度，分為輕、中、重、超重四個等級。損傷等級評分之和除以該組的動物數，即平均胃黏膜損傷指數。

1.4.4 統計學方法 采用SAS 6.12統計軟件包進行處理數據，組間計量數據采用t檢驗及秩和檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 胃萎消顆粒對大鼠血清GAS和血漿MTL的影響

CAG模型大鼠血清GAS和血漿MTL明顯降低（P<0.05或P<0.01），經胃萎消顆粒治療12周后，大鼠血清GAS和血漿MTL升高。其中胃萎消高、中劑量組MTL明顯高于模型對照組（P<0.05），胃萎消各劑量組GAS均顯著高于模型對照組（均P<0.05）。 見表1。

表1 胃萎消顆粒對大鼠血清GAS和血漿MTL的影響（±s）

表1 胃萎消顆粒對大鼠血清GAS和血漿MTL的影響（±s）

注：與正常對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型對照組比較，#P＜0.05

?

2.2 胃萎消顆粒對大鼠胃黏膜損傷的影響

各組大鼠胃黏膜損傷指數比較，胃萎消高、中、低劑量組顯著低于模型對照組（P<0.01或P<0.05）；各組大鼠胃黏膜萎縮、腸上皮化生、異常增生的發生鼠數量作雙向無序檢驗，胃萎消高、中、低劑量組顯著低于模型對照組（P<0.01）。見表2。

表2 胃萎消顆粒對大鼠胃黏膜損傷的影響（±s）

表2 胃萎消顆粒對大鼠胃黏膜損傷的影響（±s）

注：與模型對照組比較，#P＜0.05，##P＜0.01；-代表無損傷

2.3 造模各組大鼠胃黏膜病理組織學檢查

大鼠造模后各組胃黏膜組織病理切片中腺體及纖維結締組織增生情況，見表3。

3 討論

本實驗采用熱鹽水灌胃制作CAG模型。大鼠經持續的12周熱鹽水連續刺激后，胃黏膜受到不同程度損傷。經不同劑量，尤其是高、中劑量的胃萎消顆粒治療后，胃黏膜萎縮、腸上皮化生、異常增生鼠數明顯減少；病理結果也顯示，經治療，腺體排列較規則，無萎縮，固有層中無纖維結締組織增生。分析其機制，可能與GAS和MTL有關[2]581-583，[6-7]。

表3 造模后各組大鼠胃黏膜病理組織學檢查結果

GAS由胃竇G細胞產生，是胃黏膜的主要營養因子，可通過直接作用胃壁細胞上的胃泌素受體，或通過刺激產生Reg蛋白等生長因子促使胃黏膜細胞增殖，對胃黏膜直接或間接地發揮營養和保護作用[6，8]。MTL主要作用是刺激胃腸道和膽道運動，還能刺激胃蛋白酶和胰液的分泌，有助于胃排空和食物消化。在CAG模型大鼠中，胃黏膜腺體萎縮，黏膜變薄，血清GAS和血漿MTL明顯下降[9-10]。

本研究結果顯示，經過胃萎消顆粒相當于原生藥2.50g/（kg·d）以上劑量治療后，大鼠血清GAS和血漿MTL顯著升高，胃黏膜損傷減輕，腺體排列較規則。提示胃萎消顆粒治療大鼠實驗性CAG的機制可能是通過促進GAS和MTL等胃腸激素的分泌，從而增加胃動力，促進胃液分泌，營養和修復損傷的胃黏膜來實現的。表明胃萎消顆粒對大鼠實驗性CAG胃部相關病變有較好的治療作用。

[1]王茜,龔其海,吳芹,等.石斛生物總堿對原代皮層神經元氧糖剝奪的保護作用[J].中國藥理通訊,2006,23(4):44.

[2]張瀝,張玲霞,徐俊榮,等.熱鹽水致大鼠萎縮性胃炎動物模型建立[J].世界華人消化雜志,2002,10(5).

[3]中華醫學會消化病學分會.全國慢性胃炎研討會共識意見[J].胃腸病學,2000,5(2):77-79.

[4]Chen XY,Lu AP,Zhou SJ.Pathomorphological studies on gastric mucosa of rat model of chronic atrophic gastritis with spleen deficiency[J].Zhongguo Zhongxiyi jiehe Zazhi,1995,15(5):119-121.

[5]Zhu XL,Duo Tian ZH,Song Tian HY,et al.Prolonged effect of ammonia water on gastric mucosa of albino rats[J].Zhonghua Xiaohua Zazhi,1990,10:198-201.

[6]Yoshikazu K,Shunji I.Gastric mucosal protection and cell proliferation[J].Gastroenterology and Hepatology,2000,15:7-10.

[7]馮德仕,韓江南,馮鑫東.自制隔山消散治療萎縮性胃炎45例臨床觀察[J].世界名醫論壇雜志,2002,(8):24-25.

[8]苑述剛.陰虛氣滯瘀血與慢性萎縮性胃炎的關系[J].中國中西醫結合消化雜志,2003,11(5):293-294.

[9]Zhao JB,Cui Q,Zhang X,et al.Weiyankang improves immune function of patients with chronic atrophic gastris[J].Disi Junyi Daxue Xuebao(J Fourth Mil Med Univ),2000,21(7):155-156.

[10]李曉斌.中藥消萎靈對大鼠慢性萎縮性胃炎胃黏膜血流量和血漿動素的影響[J].第四軍醫大學學報,2002,23(9):772.