金花葵籽不飽和脂肪酸對實驗性高脂血癥大鼠血脂和肝功能的影響

吳正平

(宜春學院美容醫學院，江西宜春336000)

金花葵Hibiscus manihot L.，又名菜芙蓉，為錦葵科秋葵屬1年生草本植物，是瀕于滅絕的珍稀植物。金花葵具有食用、藥用、保健等功能，有較高的利用價值［1-2］。前期對金花葵籽油中脂肪酸的氣相色譜-質譜(GC-MS)聯用技術分析［3］，結果表明金花葵籽油中含有6種脂肪酸，其中不飽和脂肪酸包括油酸、亞油酸以及少量的棕櫚油酸，質量分數達到68.91%。本實驗對金花葵籽油中不飽和脂肪酸進行提純，觀察其對實驗性高脂血癥大鼠血脂和肝功能的影響，探討金花葵籽不飽和脂肪酸調血脂和護肝作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 SD大鼠，雄性，體質量(150±20)g，由南昌大學實驗動物科學部提供，合格證號:贛醫動字第02196-02。

1.1.2 藥品 金花葵籽不飽和脂肪酸由宜春學院藥妝研發中心采用尿素包合法制備［4］，呈黃色澄清油狀物，經氣相色譜分析，不飽和脂肪酸量≥95%。

1.1.3 飼料 基礎飼料由南昌大學醫學院實驗動物中心提供。高脂飼料含75%基礎飼料，8%豬油，15%蛋黃粉，2%膽固醇。

1.1.4 試劑 血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C、TP、ALB、GPT 和GOT檢測試劑盒均為上海申索佑福醫學診斷用品有限公司產品。

1.1.5主要儀器 OLYMPUS AU2700全自動生化分析儀(日本奧林巴斯)。

1.2 方法

1.2.1 動物分組與給藥 將實驗大鼠隨機分為5組，每組10只:正常組喂普通飼料;高脂組喂高脂飼料;金花葵籽不飽和脂肪酸低、中、高劑量組喂高脂飼料，并灌胃金花葵籽不飽和脂肪酸原液:低劑量組1 mL/kg、中劑量組2 mL/kg、高劑量組4 mL/kg，1次/d。持續飼養6周。

1.2.2 血清生化指標的測定 各組大鼠飼養6周末禁食12 h后，乙醚麻醉，眼眶靜脈采血，分離血清，按試劑盒說明書測定各組血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C、TP、ALB、GPT 和 GOT。

1.2.3 肝脂堆積觀察 取大鼠肝臟同一部位，制備肝臟組織冰凍切片，Herxheimer油紅O脂肪染色法進行肝臟組織冰凍切片的脂肪染色。

1.2.4 統計學處理 以SPSS11.0軟件分析數據，數據以±s表示，進行方差分析和t檢驗。

2 結果

2.1 對血脂水平的影響 與正常組比較，高脂組血清TC、TG、LDL-C水平明顯升高(P＜0.01)，HDL-C明顯降低(P＜0.05)，表明高脂血癥模型造模成功。與高脂組比較，低劑量組血清TC、TG、LDL-C水平均有不同程度降低，但無顯著差異(P＞0.05);中劑量組和高劑量組血清 TC、TG、LDL-C水平明顯降低(P＜0.05或P＜0.01)，高劑量組血清HDL-C水平明顯升高(P＜0.05)。見表1。

2.2 對血清TP、ALB、GPT和GOT水平的影響 與正常組比較，高脂組血清 TP、ALB水平明顯降低(P＜0.05)，GPT、GOT水平明顯升高(P＜0.01)。與高脂組比較，低、中、高劑量組血清TP、ALB水平均有所提高，但無顯著差異(P＞0.05);低劑量組血清GPT、GOT水平有所降低，但無顯著差異(P＞0.05);中、高劑量組血清 GPT水平明顯降低(P＜0.05或P＜0.01);高劑量組血清 GOT水平明顯降低(P＜0.05)。見表2。

表1 各組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平 (±s，n=10)

表1 各組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平 (±s，n=10)

注:與高脂組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01。下同。

組別 TC/(mmol/L) TG/(mmol/L) LDL-C/(mmol/L) HDL-C/(mmol/L)正常組 1.97±0.24＊＊ 0.62±0.17＊＊ 0.37±0.10＊＊ 0.58 ±0.12*高脂組 6.89 ±1.92 0.89 ±0.15 2.56 ±0.76 0.44 ±0.13低劑量組 5.82 ±0.96 0.87 ±0.16 2.13 ±0.54 0.43 ±0.15中劑量組 4.85 ±1.62* 0.69 ±0.15* 1.57 ±0.68* 0.49 ±0.17高劑量組 3.87±0.35＊＊ 0.63±0.21＊＊ 1.25±0.46＊＊ 0.54 ±0.11*

表2 各組血清TP、ALB、GPT和GOT水平 (±s，n=10)

表2 各組血清TP、ALB、GPT和GOT水平 (±s，n=10)

GPT/IU GOT/IU正常組 71.04±7.59* 39.13±3.97* 22.13±8.71＊＊ 39.45 ±14.53組別 TP/(g/L) ALB/(g/L)＊＊高脂組 60.84 ±5.62 32.76 ±7.37 65.19 ±17.85 80.35 ±15.56低劑量組 62.87 ±4.53 33.46 ±5.47 60.24 ±18.57 75.64 ±19.35中劑量組 63.75 ±5.48 34.42 ±2.75 49.65 ±8.57* 73.85 ±21.15高劑量組 65.07±4.86 34.72±3.78 45.23±14.45＊＊ 68.50 ±15.67*

2.3 對肝脂堆積的影響 正常組肝臟有組織彈性，色澤紅，質地緊密;高脂組肝臟表面色澤蒼白或帶灰黃色，壓時現凹陷或易碎;金花葵籽油不飽和脂肪酸中、高劑量組肝臟形態則近似于正常組。Herxheimer油紅O脂肪染色法觀察到高脂組肝細胞間隙以及細胞內堆積了大量脂滴，正常組切片則沒有發現明顯脂滴，金花葵籽不飽和脂肪酸中、高劑量組切片中脂滴明顯少于高脂組。見圖1。

3 討論

圖1 肝臟冰凍切片油紅O染色(×600)

高血脂是導致心腦血管疾病的一個重要原因。大量動物實驗和臨床實驗表明，不飽和脂肪酸具有調血脂作用而降低心血管疾病發生的風險［5-6］。在與血脂水平密切相關的心血管疾病發病率逐年攀升的今天，不飽和脂肪酸的應用前景十分廣闊。動物血清TC、TG、LDL-C和HDL-C水平是反映機體脂質代謝重要指標。其中HDL-C可逆向轉運TC，從而降低血清TC水平，因此，高水平HDL-C是心血管的保護因素［7］，而HDL-C水平降低成為誘發早發性冠心病的危險因素之一［8］。本研究結果表明，金花葵籽油不飽和脂肪酸中、高劑量組能降低大鼠血清TC、TG、LDL-C水平(P＜0.05或P＜0.01)，高劑量組升高血清 HDL-C水平(P ＜0.05)，顯示具有明顯的調血脂作用。

肝臟在營養代謝中起到非常重要的作用，是脂質和脂蛋白代謝的中心，過量的脂質攝入常引起肝損傷的發生［9-12］。血液中蛋白的含量可以反映肝臟功能，一旦肝臟合成功能下降，蛋白在血液中濃度隨之降低，其降低程度與肝臟合成功能損害程度呈正相關。實驗結果顯示高脂組與正常組相比，血清TP和ALB明顯降低，表明此造模方法可使實驗大鼠肝功能下降;轉氨酶是反應肝臟損傷的靈敏指標，與高脂組比較，金花葵籽不飽和脂肪酸中、高劑量組血清GPT水平明顯降低(P＜0.05或P＜0.01)，高劑量組血清GOT水平明顯降低(P＜0.05)，表明金花葵籽不飽和脂肪酸能抑制因高血脂造成的肝功能下降。從肝脂堆積的觀察結果來看，金花葵籽不飽和脂肪酸中、高劑量組肝臟形態好于高脂組，且切片中脂滴明顯少于高脂組，這也說明金花葵籽不飽和脂肪酸能有效逆轉高血脂對肝臟的影響，促進肝臟脂質分解，減少大鼠肝臟脂質堆積，保護肝細胞的正常功能，發揮護肝效果。

［1］仇 燕.菜芙蓉花中總黃酮微波提取的研究［J］.中藥材.2006，29(4):387-390.

［2］劉 臨.原子吸收光譜法測定金花葵中微量元素［J］.微量元素與健康研究，2008，25(4):27-29.

［3］彭志兵，吳正平，喻華娟.金花葵籽油中脂肪酸組成的GC-MS分析［J］.安徽農業科學，2009，37(34):16753-16756.

［4］Guil-Guerrero J，Campra-Madrid P，Belarbi E.γ-Linolenic acid purification from seed oil sources by argentated silica gel chromatography column［J］.Proc Biochem，2000，36:341-354.

［5］Valentine R C，Valentine D L.Omega-3 fatty acids in cellular membranes:a unified concept［J］.Prog Lipid Res，2004，43:383-402.

［6］O’Shea M，Devery R，Lawless F，et al.Enrichment of the conjugated linoleic acid content of bovine milk fat by dry fractionation［J］.Int Dairy J，2000，10:289-294.

［7］Barter PJ，Nicholls S，Rye K A.Anti-inflammatory properties of HDL［J］.Cite Res，2004，95:764-772.

［8］鄭建仙.功能食品［M］.3版.北京:中國輕工業出版社，1993:433-435.

［9］周 斌.茶油對梗阻性黃疸肝臟保護作用的實驗研究［J］.溫州醫學院學報，2000，30(3)，193-195.

［10］Sanyal A J，Campbell Sargent C，Mishahi F，et al.Non-alcoholic steato hepatitis:association of insulin resistance and itochondrial abnoemalities［J］.Gas troenterology，2001，120:1183-1193.

［11］劉利東，馬正偉，李 昆，等.含不同脂肪乳劑的腸外營養對肝移植大鼠肝臟功能的影響［J］.消化外科，2004，3(4):256-260.

［12］Aguilera C M，Ramirez-Tortosa C L，Quiles J L.Monounsatuartedandomega-3 but not omega-6 polyunsaturated fatty aeids improve hepatic fibrosis in hypercholesterolemic rabbits［J］.Ann Sugr，2005，21(3):363-371.