血透對腎衰患者紅細胞膜Na+-K+-ATP酶活性的影響

苑記清

（天津醫科大學總醫院代謝病科，天津300052）

鈉泵控制細胞許多重要功能，血管平滑肌細胞膜鈉泵受抑制后，細胞內鈣離子濃度增加，血管平滑肌收縮力增強，血壓增高。有報道證實腎功能不全時Na+-K+-ATP酶活性下降，低蛋白飲食可恢復部分鈉泵活性。有關血透對鈉泵活性影響的報道限于一次血透前后鈉泵活性的變化，為此筆者檢測了血透、非血透腎功能不全患者紅細胞膜鈉泵活性，了解血透對鈉泵活性的影響及意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 慢性腎功能不全患者共52例，其中慢性腎小球腎炎44例，梗阻性腎病、糖尿病腎病各2例，慢性腎盂腎炎、尿酸性腎病、多囊性腎病、狼瘡性腎病各1例。按是否行血液透析治療分2組，非血透組29例（男21例），平均年齡（40.8±15.2）歲，血肌酐（906.93±284.35）μmol/L；血透組 23例（男 15例），平均年齡(39.4±7.7)歲，血肌酐（432.45±197.36）μmol/L，血透時間（8.3±2.9）月；對照組為健康查體者 26例（男14例），平均年齡(42.7±18.6)歲。

1.2 方法

1.2.1 紅細胞膜蛋白的制備 清晨空腹靜脈取血6 mL，置于含 625U肝素的抗凝管中，搖勻，以2500r/min離心10min，分離血漿，用滴管吸出血細胞上的白細胞層。剩下的紅細胞用生理鹽水在同樣的條件下洗滌3次。將洗凈的紅細胞置于8mL10mmol/L Tris-HCl緩沖液（pH:7.4）中溶血，放置 0.5 h后于16000 r/min下離心20 min，可見管底乳白色紅細胞膜沉淀，棄去上清的血紅蛋白液和管底的硬結，再用同樣的緩沖液如此反復洗3次，可得乳白色紅細胞膜。將膜懸浮于10 mmol/L Tris-HCl緩沖液中（pH:7.4），使其濃度在1 mg/mL左右。

1.2.2 Na+-K+-ATP酶活性的測定用孔雀綠定磷法測定酶活力，反應自加入ATP開始，于37℃保溫10 min后加入定磷顯色液1 mL終止酶反應。置于室溫30 min后測定吸光度。

1.2.3 酶活力單位 在37℃下每小時每毫克膜蛋白催化ATP水解產生1個nmol無機磷為1個活力單位。

1.3 統計學處理 采用SPSS12.0統計軟件進行分析，計量資料以±s表示，組間比較采用q檢驗，兩因素的相關性采用Pearson相關分析。

2 結果

2.1 血透組、非血透組Na+-K+-ATP酶活性測定結果 兩組酶活性均低于正常對照組，但血透組酶活力高于非血透組（P<0.005），見表1。

表1 各組Na+-K+-ATP酶活性測定結果（±s）

表1 各組Na+-K+-ATP酶活性測定結果（±s）

與對照組相比:*P<0.005；與血透組相比:#P<0.005

組別非血透組血透組對照組Na+-K+-ATP 酶活性（nmol/mg·h）63.13±22.73*#122.47±58.47*179.75±60.21例數292326

2.2 非血透組Na+-K+-ATP酶活力與肌酐的相關分析 二者呈負相關，回歸方程：y贊=106.16-0.052x,r=-0.532，P<0.002。

2.3 血透組Na+-K+-ATP酶活力與血透時間（月）的相關分析 二者呈正相關，回歸方程：y=92.64+6.55x，r=0.617，P<0.001。

3 討論

尿毒癥患者紅細胞的鉀內流減少[1]，并被認為參與血清鉀的調節，可引發高血鉀。血鉀內流減少可能與鈉泵活力減低有關，并導致一系列細胞功能失調，包括鈉外流下降，細胞水腫等。腎功不全非血透組Na+-K+-ATP酶活力下降，與文獻報道一致[2]，并與血肌酐負相關，說明酶的活力可反映腎衰的嚴重程度。低蛋白飲食可使鈉泵活性上升，本文提示血透組鈉泵活性較非血透組有所上升，但未至正常。本文結果說明血透治療確能提高鈉泵活性。有報道尿毒癥患者體內有鈉泵抑制因子，推測尿毒癥鈉泵活性降低與此有關，并從尿毒癥患者的腹透液中提取了這一因子[3-4]，血透能將這一因子清除可能與血透者鈉泵活性升高有關。國外資料顯示血透病人鈉泵活性與正常人無差異[5]，但國外報道僅為長期血透者一次血透后鈉泵的活力結果。本文結果還顯示血透組鈉泵活性與血透時間正相關，說明鈉泵的活性與血透的充分性有關。國外透析器僅使用一次，而國內透析器復用，這可能導致了本試驗與國外有差異。鈉泵是細胞膜上的一個重要的酶，它的活性恢復利于細胞基本功能的恢復，緩解尿毒癥的一系列癥狀，如血管平滑肌細胞膜鈉泵活性恢復后，細胞內鈣離子濃度由高轉低，血管平滑肌收縮力降低，血壓下降，紅細胞膜鈉泵恢復，血鉀內流增加，血鉀下降等。因此鈉泵的活性還可作為血透充分性的又一指標。

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