宣導瀉肺飲對心力衰竭大鼠血流動力學及神經內分泌的影響1)

楊祥坤,許國振,潘 茹

心力衰竭(心衰)病人,在一定階段會出現三焦壅塞、氣血水液代謝失常的病理變化,以胸悶喘氣、咳痰、脘腹脹滿、雙下肢水腫、二便艱澀為其臨床特征。宣導瀉肺飲是我科治療心衰的臨床驗方,具有宣導三焦,化痰活血利水的功效,臨床應用有較好的療效。本實驗通過采用宣導瀉肺飲作用于心衰大鼠,觀察其對心衰大鼠血流動力學及神經內分泌的影響,并探討其作用機制。

1 材料與方法

1.1 藥品與儀器 戊巴比妥鈉(中國醫藥集團上海化學試劑公司生產,批號:20041117);肝素、青霉素等均為市售產品;BL-420E+生物機能實驗系統、BL-New Century生物信號顯示與處理軟件(成都泰盟科技有限公司生產)、YX-200型動物呼吸機(成都泰盟科技有限公司生產)、MFV-1200型電磁血流量計(日本光電公司生產);血漿心鈉素(ANP)、醛固酮(ALD)、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)等放射免疫分析測定盒(北京北方生物技術研究所);Gγ-1200放射免疫計數器(中國科學技術大學科技實業總公司中佳光電儀器分公司)。實驗藥品:洛汀新(鹽酸貝那普利片,每片10mg,北京諾華制藥有限公司生產,批號:05032);宣導瀉肺飲濃縮液(組成:葶藶子、萊菔子、澤瀉、桑白皮、杏仁、川厚樸、豬苓、陳皮、當歸、川木通等組成,相當于每毫升含生藥3.81 g,武漢中醫院制劑室生產)。

1.2 分組與模型制作 SPF級Wistar雄性大鼠60只,體重190 g～210 g。由湖北省醫學科學院實驗動物中心提供[合格證號:SCXK(鄂)2003-0005]。60只大鼠中隨機抽出10只作為假手術組,剩余均復制心衰大鼠模型,成功后再按隨機數字表法分為模型組、洛汀新組、中藥小劑量組、中藥大劑量組、中藥+洛汀新組。每組樣本數均為10只。造模方法:采用縮窄腹主動脈方法[1]復制大鼠心衰模型,大鼠適應性喂養7 d后,3%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔注射麻醉,無菌操作,劍突下腹正中切口,打開腹腔,在左腎動脈分支以上,鈍性分離暴露腹主動脈,用游標卡尺測量其直徑,然后采用相應的注射針頭與腹主動脈一起平行結扎[2],抽出針頭,即可形成腹主動脈狹窄(橫截面積減少50%～60%)。術后經腹腔注射青霉素1周(前3 d每只4×105U,后4 d每只2×105U),預防感染。

1.3 處理因素 造模成功隨機分組后,開始給予實驗藥物灌胃。假手術組和造模組予生理鹽水3 m L;洛汀新組予洛汀新2 mg/kg;中藥小劑量組予宣導瀉肺飲濃縮液0.28 g/kg;中藥大劑量組予宣導瀉肺飲濃縮液0.55 g/kg;中藥+洛汀新組予宣導瀉肺飲濃縮液0.28 g/kg,洛汀新 2 mg/kg。用法:每日 1次灌胃,連續1個月。

1.4 觀察指標的測定 實驗觀察前禁食12 h。3%戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔注射,麻醉后固定連接BL-420E+生物機能實驗系統,記錄Ⅱ導心電圖及心率,行呼吸機輔助呼吸(頻率60/min,潮氣量3.5 m L)。分離主動脈約 0.5 cm,安放 2 mm的電磁血流量計探頭,測每搏輸出量(SV)、心輸出量(CO)、每搏量指數(SV I)、心臟指數(CI)指標。分離右頸總動脈行動脈插管,接BL-420E+生物機能實驗系統,測動脈收縮壓(SAP)、動脈舒張壓(DAP)、平均動脈壓(MAP)等指標。用心導管于心尖部插入左心室[3],測左室收縮壓(LVSP)、左室內壓最大上升速率(LV+dp/d tmax)等指標。由左心室導管直接放血,離心后取血漿冰浴保存,送同位素室應用Gγ-1200放射免疫計數器,采用均相競爭放射免疫法測定AngⅡ、ALD、ANP等放免指標。

1.5 統計學處理 選用SPSS13.0統計軟件進行分析。數據以均數±標準差(±s)表示。均數間兩兩比較采用t檢驗,多個樣本均數間每兩個均數的比較采用q檢驗,多個樣本均數與一個對照組均數比較用Dunnett’t檢驗。

2 結 果

2.1 血流動力學指標結果(見表1、表2) 模型組與假手術組相比,SBP 、DBP、M AP 、HR、LVSP、LV+dp/d tmax、SV 、CO 、SV I、CI等指標均有統計學意義(P＜0.05或 P＜0.01),模型組 HR增加明顯,其他各指標下降明顯,說明造模成功。中藥大劑量組、中藥小劑量組、洛汀新組、中藥+洛汀新組與模型組相比,HR減慢明顯,其他各項指標均有提高(P＜0.05或 P＜0.01)。說明各處理因素均能夠改善心功能。中藥大劑量組、中藥小劑量組、洛汀新組與中藥+洛汀新組比較,LVSP、LV+dp/dtmax、SV、CO、SV I、CI等均有統計學意義(P＜0.05或 P＜0.01),中藥+洛汀新組改善心功能更加明顯。中藥大劑量組與中藥小劑量組相比,DBP 、MAP 、LVSP、LV+dp/dtmax、SV、CO 、SV I、CI等指標有統計學意義,說明隨著宣導瀉肺飲劑量的增大,其改善心功能的作用也隨之增強。

表1 各組 SBP、DBP、M AP、LVSP、LV+dp/d tmax的比較(±s)

組別 SBP(mm Hg) DBP(mmHg) M AP(mmHg) LVSP(mm Hg) LV+dp/dtmax(mmH g/s)假手術組 114.50±21.00 95.00±24.47 101.70±23.23 126.00±12.45 4 666.00±639.61模型組 89.70±18.261) 69.80±23.781) 76.50±21.391) 96.10±15.902) 3 666.90±650.671)中藥大劑量組 118.90±18.424) 88.40±11.683)7) 98.50±13.183)7) 122.90±13.644)5)7) 6 202.40±558.014)6)8)中藥小劑量組 100.90±25.583)6) 70.00±17.596) 80.30±18.696) 110.30±10.863)6) 4 898.80±663.014)6)洛汀新組 112.90±18.193)5) 78.10±23.585) 89.70±21.105) 123.30±22.104)5) 4 874.00±614.024)6)中藥+洛汀新組 128.60±13.684) 95.90±11.004) 105.10±8.684) 144.00±22.154) 6 521.00±550.954)與假手術組比較,1)P＜0.05,2)P＜0.01;與模型組比較,3)P＜0.05,4)P＜0.01;與中藥+洛汀新組比較,5)P＜0.05,6)P＜0.01;與中藥小劑量組比較,7)P＜0.05,8)P＜0.01

表2 各組 HR、SV 、CO 、SV I、CI的比較(±s)

表2 各組 HR、SV 、CO 、SV I、CI的比較(±s)

組別 HR(/m in) SV(m L/beat) CO(m L/m in) SV I[m L/(beat·m2)] CI[m L/(m in·m2)]假手術組 381.80±32.26 0.228±0.034 86.967±14.512 7.72±1.12 2 942.45±437.78模型組 458.60±30.591) 0.124±0.0181) 56.620±6.7501) 4.35±0.771) 1 980.32±286.521)中藥大劑量組 389.10±26.032) 0.276±0.0572)3)5) 106.830±20.2662)3)5) 9.23±1.522)3)4) 3 579.04±552.172)3)4)中藥小劑量組 397.90±48.472) 0.207±0.0472)3) 80.849±12.9612)3) 7.57±1.922)3) 2 958.76±603.512)3)洛汀新組 384.40±35.452) 0.260±0.0412)3) 99.866±18.6362)3) 9.34±1.802)3) 3 592.29±801.2622)3)中藥+洛汀新組 399.20±27.562) 0.370±0.0592) 147.301±23.0292) 12.48±2.272) 4 970.58±901.352)與假手術組比較,1)P＜0.01;與模型組比較,2)P＜0.01;與中藥+洛汀新組比較,3)P＜0.01;與中藥小劑量組比較,4)P＜0.05,5)P＜0.01

2.2 放免指標(見表3) 模型組 ANP、ALD、AngⅡ均高于假手術組(P＜0.05或P＜0.01),說明模型組存在神經內分泌過度激活,造模成功。與模型組比較,中藥大劑量組、中藥小劑量組、洛汀新組、中藥+洛汀新組ANP、ALD、AngⅡ水平下降(P＜0.05或P＜0.01)。說明各處理因素均能對抗神經內分泌激活。但中藥大劑量組、中藥+洛汀新組ALD水平較洛汀新組降低明顯(P＜0.01)。

表3 各組ANP、ALD、AngⅡ水平比較(±s)

表3 各組ANP、ALD、AngⅡ水平比較(±s)

組別 ANP(ng/m L) A LD(ng/m L) A ngⅡ(pg/mL)假手術組 2.13±0.37 0.99±0.31 1 543.10±506.25模型組 2.93±0.682) 1.50±0.481) 3 040.11±820.252)中藥大劑量組 2.03±0.454) 0.67±0.084)5)1 482.60±639.404)中藥小劑量組 2.03±0.524) 0.94±0.443) 1 930.51±479.543)洛汀新組 2.11±0.294) 1.08±0.373) 1 565.82±473.134)中藥+洛汀新組 2.19±0.733) 0.72±0.104)5)1 713.25±671.254)與假手術組比較,1)P＜0.05,2)P＜0.01;與模型組比較,3)P＜0.05,4)P＜0.01;與洛汀新組比較,5)P＜0.01

3 討 論

腹主動脈結扎法[4]是常用的慢性壓力超負荷型心衰造模方法,該方法的機制是造成腎缺血,導致腎素增加,激活腎素-血管緊張素-醛固酮系統(RAS),增加外周阻力,同時狹窄腹主動脈也可直接使心臟后負荷增加。此法與臨床上的充血性心力衰竭的病理變化過程較為吻合,且簡單,易控制,機制明了,模型穩定,心衰程度比較齊同。

本實驗結果表明,與模型組相比,各用藥組HR減慢明顯,其他各項血流動力學指標均有提高,明顯改善了心功能。中藥大劑量組與中藥小劑量組相比,DBP、MAP、LVSP、LV+dp/dtmax、SV、CO、SI、CI等指標有統計學意義,說明隨著宣導瀉肺飲劑量的增大,其改善心功能的作用也隨之增強。現代藥理研究表明,葶藶子水提取物可明顯增強心肌收縮性即對心肌具有正性肌力作用,能改善心臟的泵血功能對心率無明顯影響,不增加心肌耗氧量,對心衰的心臟可增加輸出量,降低靜脈壓[5]。陳皮和當歸均可增強心臟收縮力,使心輸出量增加,尚可擴張冠狀動脈,使冠脈流量增加[6]。萊菔子的提取液靜脈注射能明顯降壓及降肺動脈高壓,其中β-谷甾醇,尚有一定的鎮咳、祛痰作用[7]。川木通、豬苓、澤瀉[8]有利尿作用。杏仁有平喘作用,其含有的苦杏仁苷在人體內分解產生氫氰酸,能鎮靜呼吸中樞而起止咳平喘作用。所以諸藥合用可以明顯改善心衰大鼠的血流動力學,從而改善心功能。

現代醫學研究證明,心室重塑是充血性心力衰竭發生、發展的重要病理環節,而RAS系統的激活,是心室重塑的主要機制之一。AngⅡ、ALD是RAS系統主要的效應物質,病理情況下,二者均可導致水鈉潴留和循環血量增加,增加心臟負荷;促進心肌和平滑肌增生、重構[9,10]。ANP是由心房分泌的一種擴血管物質,它能直接抑制心肌細胞和血管平滑肌肥厚和間質纖維化[11]。本次實驗過程中心衰大鼠模型組血漿中的 AngⅡ、ANP、ALD分泌均較假手術組升高。實驗結果表明宣導瀉肺飲能抑制 RAS系統的過度激活,降低血漿中的 AngⅡ、ANP、ALD水平,宣導瀉肺飲和洛汀新具有協同作用,然而,中藥+洛汀新組及中藥大、小劑量組在抑制ANP、ALD、AngⅡ等神經內分泌過度激活中,未見明顯差異。

綜上所述,宣導瀉肺飲治療心衰的作用,其機制可能與強心、利尿、降低心臟負荷以及抑制神經內分泌過度激活有關,其他作用機制有待進一步研究。

[1] 張善堂,王欽茂,陳禮明,等.參麥注射液對實驗性心力衰竭大鼠左室舒縮性能及血漿Ang、ET和ANP的影響[J].中國中西醫結合急救雜志,2001,8(1):21-24.

[2] 徐叔云,卞如濂,陳修.藥理實驗方法學[M].第2版.北京:人民衛生出版社,1989:854.

[3] 朱明娟,黃琪.中藥腦肺康對實驗性犬心力衰竭的影響[J].中國心血管雜志,2000,5(2):70.

[4] 白民剛.狹窄腹主動脈致大鼠心衰模型方法的探討[J].實用中西醫結合雜志,1997,10(2):116-117.

[5] 吳曉玲,楊裕忠.葶藶子水取物對狗左心室功能的作用[J].中藥材,1998,21(5):244.

[6] 王浴生,鄧文龍,薛春生.中藥藥理與應用[M].北京:人民衛生出版社,2000:4.

[7] 國家中醫藥管理局《中華本草》編委會.中華本草[M].上海:上海科學技術出版社,1998:713.

[8] 田代華.實用中藥辭典[M].北京:人民衛生出版社,2002:914.

[9] 中華醫學會心血管病學分會,中華心血管病雜志編輯委員會.慢性收縮性心力衰竭治療建議[J].中國循環雜志,2002,17(4):248-263.

[10] Eugene Braunw ald.心臟病學[M].北京:人民衛生出版社,2000:379-380.

[11] 湯新之,崔乃杰.臨床生物化學[M].天津:天津科學技術出版社,1999:340.