早期肝硬化患者口服四聯活菌片對血漿細胞因子和腸道菌群的影響

陳世川

(海口市秀英區永興中心衛院消化內科，海南 海口 571152)

肝炎后肝硬化患者均有不同程度的腸道菌群失調，特別是厭氧雙歧桿菌、真桿菌以及需氧腸桿菌、酵母樣真菌的數量發生改變。研究發現微生態制劑具有營養和改善肝臟、腸道功能、增強免疫作用，對肝硬化有輔助治療作用〔1〕。本文對早期肝硬化患者在保肝常規治療的基礎上加用四聯活菌片(思連康)進行治療，觀察治療前后患者血漿細胞因子和腸道菌群的變化。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選擇2008年1月至2009年12月在我院消化內科住院治療，經B超或CT證實的早期肝硬化患者90例，排除肝癌、感染及其他重要器官衰竭的患者;排除在治療中應用廣譜抗菌藥物而影響腸道菌群者。男64例，女36例;年齡38～75〔平均(49.5±8.5)〕歲。隨機將患者分為治療組和對照組，每組45例。兩組患者在年齡、性別及肝功能等方面無統計學差異(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 治療方法 對照組給予肝硬化常規治療，治療組在此基礎上加服四聯活菌片(思連康，主要成分:嗜酸乳桿菌、嬰兒雙歧桿菌、蠟樣芽胞桿菌、腸球菌，杭州龍達新科生物制藥有限公司，規格1.0 g)，1.0 g/次，3次/d口服，療程均為21 d。兩組分別在治療前后進行血漿細胞因子和腸道菌群的檢測。

1.3 檢測方法

1.3.1 血漿細胞因子檢測 采用酶聯免疫法定量測定血漿白細胞介素1β(IL-1β)、IL-8的水平。試劑盒購自解放軍總醫院科技開發中心放免所。嚴格按試劑盒說明書進行操作。

1.3.2 腸道菌群的檢測 取新鮮糞便0.5 g加入4.5 ml 0.9%無菌氯化鈉溶液中，按10倍連續稀釋法稀釋至10－9。分別取 10－9、10－7、10－5、10－3、10－1稀釋液 50 μl，依次接種在選擇性培養基上。選擇腸道菌群中具有代表性的厭氧菌3種(擬桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌)和需氧菌2種(腸桿菌、腸球菌)及酵母樣真菌。厭氧菌采用抽氣換氣培養法培養48 h，需氧菌置35℃孵箱培養24 h，酵母樣真菌置35℃孵箱培養48～72 h。使用ATB半自動微生物鑒定系統(法國生物梅里埃公司)進行細菌鑒定。結果以糞便每克濕重中菌落形成單位的對數值表示(lg cfu/g)〔2〕。

1.4 統計學方法 應用SPSS14.0統計軟件進行分析，計量數據用x±s表示，采用t檢驗。

2 結果

2.1 兩組患者治療前后血漿細胞因子的變化 兩組患者治療前血漿IL-1β和IL-8水平比較無顯著差異(P＞0.05)。對照組患者治療前后血漿IL-1β和IL-8水平無明顯變化(P＞0.05)，治療組患者治療后血漿IL-1β和IL-8水平均較治療前明顯下降(P＜0.05)。見表1。

2.2 兩組患者治療前后腸道菌群的變化 兩組患者治療前腸道菌群比較無統計學差異(P＞0.05)。治療組治療后雙歧桿菌和乳酸桿菌的菌落數量較治療前明顯增加，有統計學意義(P＜0.05);酵母樣真菌菌落數較治療前顯著降低，有統計學意義(P＜0.05)。腸球菌和擬桿菌、腸桿菌的菌落數均有不同程度的增加，但無統計學差異(P＞0.05)。見表2。

表1 兩組患者治療前后血漿細胞因子的變化(x±s)

表2 兩組患者治療前后腸道菌群變化(x ± s，lg cfu/g)

3 討論

肝硬化患者通常存在不同程度的腸道菌群失衡，表現為厭氧的雙歧桿菌減少，而需氧的腸球菌、腸桿菌顯著增多。文獻表明肝硬化患者腸道菌群的變化可能與腸蠕動減慢、延遲，微絨毛損害，腸道清除能力降低，提供過路菌接觸、黏附黏膜的機會，消化道運動減弱，消化道對細菌的機械排空作用減弱有關。抗體、溶菌酶、酸堿分泌減少有利于細菌生長，腸腔內pH上升，腸壁局部抵抗力下降，使細菌生長受到變化。口服益生菌，對于恢復正常的腸道菌群具有重要意義。

四聯活菌片是一種四聯活菌，主要成分為嗜酸乳桿菌、嬰兒雙歧桿菌、蠟樣芽孢桿菌、腸球菌，其中各菌種數量均不低于0.5×106cfu。雙歧桿菌、乳酸桿菌及腸球菌是人類腸道內主要益生菌，這些細菌可為機體提供維生素及多種微量元素，通過影響蛋白質、糖和脂肪代謝，促進機體對營養物質的吸收利用〔3〕。雙歧桿菌及乳酸桿菌能增強機體的非特異與特異免疫功能，在腸道中對病原微生物產生營養競爭及生物化學抑制作用，阻止致病菌的定植和入侵，抑制致病菌的生長繁殖，促進腸道正常菌群恢復，從而恢復正常胃腸運動及減少胃腸癥狀。肝硬化患者由于腸蠕動減慢，分泌減少，腸道清除能力降低，使腸道成為潛在致病菌的良好生存場所〔4〕。本研究結果顯示兩組患者治療前腸道菌群比較無統計學差異。治療組雙歧桿菌和乳酸桿菌的菌落數量較治療前明顯增加;酵母樣真菌菌落數較治療前顯著降低;腸球菌和擬桿菌、腸桿菌的菌落數雖有不同程度的增加，但無統計學差異，表明口服四聯活菌片能調節腸道菌群，抑制腸道有害菌的過度繁殖，使腸道有益菌迅速增加，維持腸道微生態平衡。

肝硬化患者釋放細胞因子構成一個獨特的網絡系統，能夠參與肝組織的損傷。炎癥因子的產生和增加，導致肝硬化患者凝血系統功能紊亂，誘發或加重肝性腦病。肝硬化失代償可激活巨噬細胞釋放各種生物活性因子〔5〕。IL-1β和IL-8是具有炎癥介導活性的細胞因子，IL-1β的過度表達是引起肝損傷的重要因素之一，在許多方面與腫瘤壞死因子(TNF)具有相似的生物功能，通過與TNF產生協同作用，提高機體對TNF的敏感性;同時高濃度的IL-1β也能誘導肝臟合成急性期蛋白，引發代謝性消耗;IL-1β也可使T輔助細胞分泌IL-2，進一步促進B細胞與T細胞增殖分化，加重損傷過程。T細胞活化因子及肝細胞刺激因子，可產生大量免疫球蛋白，誘導分泌型IL-2受體(sIL-2R)表達，促進急性期蛋白合成，加重肝細胞壞死。IL-8是一種小分子量活性多肽，有較強的趨化和激活中性粒細胞的作用。本研究兩組患者治療前血漿IL-1β和IL-8水平比較差異不顯著，對照組患者治療前后血漿IL-1β和IL-8水平無明顯變化，治療組患者治療后血漿IL-1β和IL-8水平均較治療前明顯下降。四聯活菌片能顯著降低血漿IL-1β和IL-8含量，減弱對肝組織中吞噬細胞的刺激從而對損傷肝臟起到保護作用。

綜上所述，口服四聯活菌片能降低血漿IL-1β、IL-8水平，調節腸道菌群失調，從而減少對肝組織的損傷，對早期肝硬化有一定的輔助治療作用。

1 陳曉文，朱德新，張洪欽.思連康對肝硬化患者腸道菌群及血漿內毒素的影響〔J〕.實用醫學雜志，2008;24(4):642-3.

2 景麗榮，張洪濤，李 琳.雙歧桿菌四聯活菌片治療肝硬化并自發性腹膜炎51例療效觀察〔J〕.中國煤炭工業醫學雜志，2009;12(10):1545.

3 李瑞軍，楊昭徐.微生態制劑在消化系統疾病中的應用進展〔J〕.中國新藥雜志，2003;12(6):416-9.

4 張東紳，黃志華，陳 如.肝硬化患者口服培菲康和媽咪愛對腸道菌群影響的研究〔J〕.中國微生態學雜志，2004;16(2):109-10.

5 吳靜黎，溫帆淵，朱瑞芳，等.肝硬化患者血清內毒素、TNF-α、IL-6檢測的臨床意義〔J〕.現代醫藥衛生，2004;20(8):602-3.