MCM7及MMP-7蛋白在胃癌組織中的表達

陽誠柏，趙景志，龐 超，和志強，尹 磊，馮天平

(河南省軍區直屬醫院，河南鄭州450003)

胃癌是臨床常見惡性腫瘤之一，其發病率和死亡率近年來逐漸升高，且患者有年輕化趨勢。胃癌發病機制的研究是目前關注的熱點，但其具體機制尚未完全闡明。有關研究表明，微小染色體維持蛋白7(minichromosome maintenance protein 7，MCM7)及基質金屬蛋白酶 －7(matrix metalloproteinases-7，MMP-7)與多種消化系統惡性腫瘤的發生發展關系密切［1－2］。作者應用免疫組化S-P法檢測MCM7及MMP-7蛋白在胃癌組織中的表達，并探討兩者與胃癌臨床病理學特征的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇鄭州大學第二附屬醫院2008年1月至2010年12月收治的具有完整臨床資料的85例胃癌、30例癌旁不典型增生及30例正常胃黏膜組織石蠟標本。85例胃癌患者的年齡35～65歲，中位年齡52歲;男性58例，女性27例;根據TNM分期標準，Ⅰ期18例，Ⅱ期20例，Ⅲ期30例，Ⅳ期17例;無漿膜浸潤45例，有漿膜浸潤40例;無淋巴結轉移42例，有淋巴結轉移43例;高分化30例，中分化19例，低分化25例，未分化11例;取材前均未接受過抗腫瘤治療。30例癌旁不典型增生患者的年齡28～63歲，中位年齡49歲;男性18例，女性12例。30例正常胃黏膜患者的年齡20～59歲，中位年齡44歲;男性17例，女性13例。3組患者的年齡、性別構成具有可比性(P＞0.05)。

1.2 主要試劑 兔抗人MCM7抗體、兔抗人MMP-7抗體、S-P免疫組化試劑盒及DAB顯色劑均購至福州邁新生物技術有限公司。

1.3 檢測方法 所有石蠟標本切成4～5 μm切片。采用免疫組化S-P法檢測MCM7及MMP-7蛋白在85例宮頸鱗癌、30例癌旁不典型增生、30例正常胃黏膜組織中的表達。用已知MCM7或MMP-7蛋白陽性表達的切片作為陽性對照，以磷酸鹽緩沖液代替一抗作為陰性對照。

1.4 結果判定 MCM7蛋白陽性信號位于細胞核，MMP-7蛋白陽性信號位于細胞膜或細胞質，兩者無染色為陰性(－)，淡黃色為(+)，黃色為(++)，棕黃色為(+++)，(+)～(+++)記為陽性。

1.5 統計學處理 采用SPSS 17.0進行統計學分析，計數資料比較采用χ2檢驗，相關性檢驗采用Spearman相關分析，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 MCM7及MMP-7蛋白在不同胃黏膜組織中的表達 MCM7蛋白在胃癌組織(82.4%)中的表達高于癌旁不典型增生組織(50.0%)和正常胃黏膜組織(43.3%)，差異有統計學意義(P=0.001，P ＜0.001)。MMP-7蛋白在胃癌組織(74.1%)中的表達高于癌旁不典型增生組織(50.0%)和正常胃黏膜組織(36.7%)，差異有統計學意義(P=0.015，P ＜0.001)。

2.2 MCM7及MMP-7蛋白的表達與各臨床病理學特征的關系 MCM7及MMP-7蛋白的表達與胃癌患者各臨床病理學特征的關系見表1。

2.3 MCM7蛋白與MMP-7蛋白的關系 胃癌組織中MCM7蛋白表達與MMP-7蛋白表達呈正相關關系(r=0.642，P ＜0.001)，見表2。

表1 MCM7及MMP-7蛋白的表達與各臨床病理學特征的關系

表2 MCM7蛋白與MMP-7蛋白的關系

3 討論

胃癌的侵襲和轉移是其預后較差的主要原因，也是胃癌患者的主要死因，而對于胃癌而言，主要表現為侵及漿膜層和周圍淋巴結發生轉移，因此，這兩個方面的研究對胃癌進展機制的探討和治療方案的選擇具有重要意義［3］。

MCMs是由cdc基因編碼的一組能夠啟動DNA復制的關鍵因子，包括MCM2～7等6個亞單位，不但參與DNA的復制和合成延伸，而且還與腫瘤細胞的增殖關系密切，其中MCM7蛋白作為家族成員之一，其表達水平能夠代表家族蛋白的水平，可用于腫瘤癌變及進展的評估，已經發現其在前列腺癌、甲狀腺癌等多種腫瘤組織中存在高表達［4－5］。本文研究結果顯示:MCM7蛋白在胃癌組織中的表達高于癌旁不典型增生組織和正常胃黏膜組織，提示其在腫瘤的發生中可能起一定的作用;MCM7蛋白的表達還與TNM分期、漿膜浸潤、淋巴結轉移有關，提示其參與了胃癌的進展，這與有關的研究一致［5－6］。

MMPs是一組鋅依賴性的內源性蛋白水解酶，是降解細胞外基質的主要酶類，至今已發現28種，該家族中MMP-7蛋白相對分子質量最小，但其具有較廣泛的底物特異性和強大的基質降解功能，且能激活MMPs的其他成員以及表皮生長因子等，進而促進腫瘤的生長和進展。本研究發現，在胃癌組織中MMP-7蛋白呈高表達，且其在TNM分期的晚期高于早期，有漿膜浸潤組織高于無漿膜浸潤者，有淋巴結轉移者高于無淋巴結轉移者，分化程度低者高于分化程度高者，提示MMP-7參與了胃癌的發生、發展，這與有關研究一致［2，7］。

通過相關性分析發現，胃癌組織中MCM7蛋白表達與MMP-7蛋白表達呈正相關關系，提示兩者可能具有協同作用，在胃癌的癌變和進展過程中相互影響或受同一因素的影響而表達升高，從而參與胃癌的進展過程。

綜上所述，MCM7及MMP-7蛋白在胃癌組織中均高表達，且呈正相關關系，兩者的表達與胃癌的癌變及進展關系密切。

［1］劉娟，殷飛，姚樹坤.細胞周期素D1、視網膜母細胞瘤樣蛋白2及微小染色體維持蛋白7在干細胞癌中的表達及對預后的意義［J］.中國病理生理雜志，2011，27(2):304 －309.

［2］譚學軍，李曉東.COX-2、MMP-7的表達與胃癌組織生物學行為的關系［J］.中國現代普通外科進展，2010，13(11):858 －860.

［3］周官保，張樂鳴.基質金屬蛋白酶及抑制劑與胃癌侵襲、轉移的關系［J］.現代實用醫學，2011，23(2):234 －236.

［4］史琳，張安文，羅宇，等.甲狀腺癌中MCM7和p27的表達及臨床意義［J］.實用腫瘤雜志，2011，26(4):390 －393.

［5］陳軍，曹驥，覃思繁.胃癌組織MCM7和p27蛋白表達及其臨床意義的探討［J］.中華腫瘤防治雜志，2010，17(21):1755 －1757.

［6］陳軍，曹驥，覃思繁.MCM7和Rb蛋白在胃癌中的表達及臨床意義［J］.實用醫學雜志，2010，26(20):3707 －3709.

［7］李德艷，劉愛東，高峰.MMP-7和E-cad在胃癌組織中表達的臨床價值［J］.中國老年學雜志，2011，31(2):185 －186.