補氣藥延緩衰老抗氧化機制的文獻再評價

張恩戶 張琪 胡銳

中醫認為，元氣、宗氣、腎氣等是維持機體生命活動的主要物質，氣虛可導致機體的臟腑功能減退。補氣藥具有補五臟，安精神，長肌肉，耐寒暑，久服輕身延年之功效?，F代研究表明，抗氧化劑能清除自由基而延緩衰老。為此，筆者以補氣藥為對象，通過文獻查閱、歸納、整理，參考衛生部《保健食品檢驗與評價技術規范(2003年版)》，擬定了中藥抗氧化作用的評定標準，對其延緩衰老之抗氧化機制進行文獻再評價，以明確其作用的可靠性。

1 延緩衰老之抗氧化機制及其評價方法

衰老即生命周期中隨時間進展而表現出功能不斷惡化，直到死亡的過程。目前有很多關于衰老機制的學說[1]。其中，受到人們普遍關注的自由基學說認為，引起人類衰老的主要原因是：細胞在代謝過程中不斷產生自由基(free radical，FR)。自由基是單獨存在的、具有不配對電子的離子、原子、分子基團[2]。該物質具有兩面性，適量自由基能介導正常細胞分化增殖，但當氧和體內某些物質發生化學反應，生成過多的氧自由基，則會引起生物膜的脂類過氧化，導致膜結構損傷和功能失活，出現衰老癥狀。自由基反應誘發脂質過氧化，生成過氧化脂質(LPO)，繼而分解產生丙二醛(MDA)與脂褐素(LF)，存在于腦、心、肝、表皮組織中[3]。體內自由基生成量與年齡呈正相關，即脂質過氧化隨年齡增加而增高，而清除自由基系統的功能則逐漸減弱。

為避免自由基產生過多，人體內存在著清除酶系，如超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)等。SOD廣泛存在于血液和組織中，能促使超氧陰離子自由基(O2·)變為過氧化氫(H2O2)和氧分子，進而被清除，使機體和細胞免受損害。GSH-Px主要分布在肝臟、胃腸、睪丸等組織，以肝中含量最高，是一種含硒的清除自由基并抑制自由基反應的酶系，可清除O2·，H2O2和羥自由基(·OH)。自由基清除酶隨著機體衰老而減少，是衰老和生命活力降低的定量指標。

因此，以藥物清除自由基、抗氧化是延緩衰老的重要途徑之一，評價的實驗方法是觀察藥物對老齡鼠、快速老化小鼠或D-半乳糖、臭氧(O3)、去胸腺等衰老動物模型的組織或血中的抗氧化酶如SOD、GSH-Px、CAT等和過氧化代謝產物如LPO、MDA、LF等的影響，評價其延緩衰老之抗氧化機制。

2 再評價方法

2.1 文獻收集與整理

以新世紀全國高等中醫院校規劃教材《中藥學》[4]記載的補氣藥(人參、黃芪、絞股藍、紅景天、沙棘、刺五加、白術、甘草、山藥、太子參、大棗、黨參)為對象，查閱1979～2009年間有關實驗性研究文獻，以中國學術期刊網絡出版總庫(www.cnki.net)數據庫為主，其他數據庫為輔進行檢索、查閱。研讀文獻，摘錄相關信息并歸納入《文獻再評價信息表》，信息表內容包括供試藥制備、給藥途徑與劑量、動物品系、實驗方法、陽性藥結果、實驗結果與結論、作者及工作單位，刊物與發表年代等信息。

2.2 中藥抗氧化機制的評定標準

參考《保健食品檢驗與評價技術規范》規定的抗氧化功能檢驗方法，以及中藥藥理作用研究應符合綜合評價和重復性等原則，制訂中藥抗氧化機制的評定標準為：應選用老齡鼠、D-半乳糖模型、輻照模型等，測定血、腦、肝、心等組織(不少于2種)的上述抗自由基相關酶和老化代謝產物如SOD、GSH-Px、MDA、LF等指標中的3項以上(包括3項)；每種衰老模型及觀察指標應由不同實驗人員進行2次以上(包括2次)重復性實驗，結果均有效。凡符合上述標準者，即可判定為具有抗氧化作用。

3 結果

驗證補氣藥抗氧化作用，使用老齡鼠、D-半乳糖模型以及輻照、氫化可的松、氟哌啶醇、去卵巢等模型。相關文獻統計結果見表1。文獻以測定學和組織中SOD、GSH-Px等自由基相關酶及MDA、LF、LPO等過氧化代謝產物等手段來驗證補氣藥的抗氧化作用。相關文獻統計結果見表2～6。

表1 驗證抗氧化作用使用了不同動物模型的文獻篇數

表2 測定血和組織中SOD來驗證抗氧化作用的文獻篇數

表3 測定血和組織中GSH-Px來驗證抗氧化作用的文獻篇數

表4 測定血和組織中MDA來驗證抗氧化作用的文獻篇數

表5 測定血和組織中LF來驗證抗氧化作用的文獻篇數

表6 測定血和組織中LPO來驗證抗氧化作用的文獻篇數

4 小結

結果表明，人參、黃芪、絞股藍、紅景天抗氧化作用的研究文獻均超過10篇[5-12]，各項指標測定次數較多，且結果有效，說明上述4味中藥研究較為充分，抗氧化作用較為肯定；沙棘、刺五加文獻數雖少，但也符合本文所定之標準，故認為其具有抗氧化作用[13,14]；白術、甘草、山藥、太子參、大棗、黨參文獻資料較少，動物模型或實驗指標不符合再評價標準[15-20]，尚需進一步研究，以證實其有無抗氧化作用。機體氧化是多因素綜合作用的結果，機體中的血可以代表全身狀態，腦為最早衰老的器官，肝則是最晚衰老的器官，在上述的實驗研究中，對血的相關測定約占32%，主要組織中，腦組織的測定約占27%，肝組織的測定約占20%。

總體來看，各實驗研究對自由基相關酶和老化代謝產物測定部位的選擇是可行的，并且兼顧其它，有力地說明了藥物對實驗動物作用的整體效果。文獻中所測定的各項指標也符合評價要求。不足在于有些文獻選取指標過少，只憑借一、兩種檢測指標而得出結論，不夠全面，缺乏重復性和氧化機制的深入研究；有些文獻之間的實驗結果存在不同之處，可能與動物模型標準不盡相同，藥物劑量相差過多，無統一規范所致。故有必要規范中藥抗氧化作用的評價方法，如實驗方法、供試藥制備、給藥途徑、重復次數等等。因此，本文歸納、整合了各文獻的實驗數據，明確具有抗氧化作用的藥物均為：不同實驗人員對3項以上(含)檢測指標，進行2次以上(含)的重復實驗，結果可靠。

從已有81篇文獻來看，補氣藥抗氧化作用機理的研究還比較孤立和分散，缺乏系統的綜合研究。在本文研究中，制定的抗氧化評定標準可行，可操作性強。此外，通過對既往實驗的歸納、整理，本文發現了科研實驗項目中的空白之處，對今后的實驗選題具有指導意義。

隨著人類生活水平的提高，人們對于如何延長生命更加關注。自1956年，Harman提出自由基學說以來，抗氧化已成為延緩衰老的一個重要部分。作為中醫藥工作者，利用現有資源，研究傳統中藥的藥理作用，開發廉價、有效的抗氧化新藥是研究的主要方向。中藥品種繁多，單品成分復雜，復方組成多樣，有著非常廣泛的研究領域和深遠的發展前景。運用現代科學技術，結合中醫傳統理論，挖掘中藥新功用，在嚴格的實驗檢測標準下，進行中藥抗氧化機制的研究，以期獲得國際認可，使中藥真正走向世界。

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