抗存活素抗體水平對非小細胞肺癌患者化療生存期的影響

鄒亞峰 劉桂舫 王國臣 曹俊華 趙新華 劉桂華

目前，國內外綜合治療對非小細胞肺癌(NSCLC)患者血清抗存活素(Survivin)抗體水平的臨床研究甚少，本實驗通過用酶聯免疫吸附法(ELISA)對NSCLC患者化療前血清中抗Survivin抗體的測定，旨在探討血清抗Survivin抗體陽性NSCLC患者抗Survivin抗體低水平組的生存期與高水平組生存期差異。

1 資料與方法

1.1 一般資料 260例NSCLC患者血清標本，經ELISA法檢測后證實抗Survivin抗體陽性的65例化療患者，化療前1周采血經離心后的血清標本。抗Survivin抗體陽性的65例化療患者化療(化療方案為吉西他濱第1天、第8天靜脈滴注，1000 mg/m2，順鉑第1～3天靜脈滴注，30 mg/m2。21 d為1周期，共4個周期)。4個周期后隨訪，獲得65位患者的化療后生存資料，隨訪率為100%。化療后生存期從化療之日開始計算，以d為單位，直至術后死亡為止。臨床行為狀態評分依據美國腫瘤東方合作標準(ECOG)。高于對照組均值2個標準差作為確定NSCLC抗 Survivin抗體陽性的診斷標準:1.3946+2×0.0846=1.56 U/ml。在 NSCLC 中表達率 51.5%(134/260 手術組 69 例，化療組 65 例)［1］。

1.2 實驗試劑 人抗Survivin抗體/生存蛋白(SurvAb)酶聯免疫分析試劑盒，上海麥莎生物科技有限公司，產品編號:E1814 h，檢測范圍1.56 ～100 U/ml。

1.3 檢測方法 血清抗Survivin抗體濃度測定采用ELISA，嚴格按說明書實驗步驟操作，450 nm光波檢測吸光度。

1.4 計算 以標準物的濃度為橫坐標(對數坐標)，OD值為縱坐標(普通坐標)，在半對數坐標紙上繪出標準曲線根據樣品的OD值，由標準曲線查出相應的濃度，再乘以稀釋倍數;或用標準的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品的濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。

1.5 統計學分析應用SPSS 13.0統計軟件，計量資料以表示，采用u檢驗，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 抗Survivin抗體陽性NSCLC化療前抗Survivin抗體水平比較 65例抗Survivin抗體陽性NSCLC化療前抗Survivin抗體水平(2.5± 0.7)U/ml，腺癌(2.5± 0.7)U/ml，鱗癌(2.5±0.8)U/ml，差異無統計學意義(P ＞0.05)。

2.2 NSCLC患者各臨床特點與血清抗Survivin抗體水平比較以抗Survivin抗體平均濃度2.1 U/ml為臨界值分為2組:高水平組(＞2.1 U/ml)與低水平組(≤2.1 U/ml)，高水平組ⅢA期、ⅢB期明顯多于ⅡB期(P＜0.05)。高水平組與腫瘤分化程度相關，中低分化多于高分化(P＜0.05)。抗Survivin抗體陽性高水平組生存期短于抗Survivin抗體陽性低水平組，差異有統計學意義(P＜0.05)。血清抗Survivin抗體二水平組與其他臨床特點差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

3 討論

Survivin是IAP家族的成員之一，它充分表達于胚胎及絕大多數腫瘤中，但在正常分化細胞中不表達［2－4］。該蛋白可被自身固有T細胞所識別，具有抗原性，血清中其抗體稱為抗Survivin抗體。癌細胞的Survivin過表達可導致抗Survivin抗體和細胞毒性 T-淋巴細胞抗癌反應［5，6］。2004 年 Joseph 等［7］報道對頭頸癌獲得癌癥治療前連續294例的血液進行了抗Survivin抗體的檢測，結果提示檢測循環血液中的抗Survivin抗體可以作為檢測確定頭頸癌狀態的一種有用的非侵襲性標志物。Atsuhito等［8］報道 63例胃腸癌患者中，25 例(39.7%)通過ELISA法對重組體存活素蛋白有反應，而健康獻血者無1例有反應，并認為Survivin抗體的確定可能對檢測胃腸癌有用。

研究結果顯示:抗Survivin抗體陽性高水平與分期關系密切;高水平組ⅢA期、ⅢB期明顯多于ⅡB期。高水平組與腫瘤分化程度相關，中低分化多于高分化，因高水平組與低水平組均有淋巴結轉移，抗Survivin抗體水平是否與淋巴結轉移相關未作統計，抗Survivin抗體陽性高水平組生存期短于抗Survivin抗體陽性低水平組，血清抗Survivin抗體二水平組與其他臨床特點無顯著性差異。存活素表達和侵襲性疾病的相關性已在很多癌癥中被發現［9，10］。在此項研究中，抗Survivin抗體和腫瘤侵襲性相關，這些結果提示化療前測定NSCLC患者血清中抗Survivin抗體對判斷NSCLC化療預后有指導作用。

表1 NSCLC患者各臨床特點與血清抗Survivin抗體二水平組比較 例

1 鄒亞峰，王國臣.手術對非小細胞肺癌患者血清抗Survivin抗體水平的影響.河北醫藥，2010，32:953.

2 Adida C，Crotty PL，Mc Grath J，et al.Developmentally regulated expression of the novel cancer anti-apoptosis gene survivin in human and mouse differentiation Am.J Pathol，1998，152:43-49.

3 Ambrosini G，Adida C，Altieri DC.A novel anti-apoptosis gene，survivin，expressed in cancer and lymphoma.Nat Med，1997，3:917-921.

4 Ma YP，Zou P，Xiao J，et al.Expression of survivin in cord blood CD34(+)stem/progenitor cells and its significance.Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi，2003，24:238-240.

5 Schmitz M，Diestelkoetter P，Weigle B，et al.Generation of survivin-specific CD8+T effector cells by dendritic cells pulsed with protein or selected peptides.Cancer Res，2000，60:4845-4849.

6 Rohayem J，Diestelkoetter P，Weigle B，et al.Antibody response to the tumor-associated inhibitor of apoptosis protein survivin in cancer patients.Cancer Res，2000，60:1815-1817.

7 Joseph T，Chang FH，Wong D，et al.Enzyme immunoassay for serum autoantibody to surviving and its findings in head-and-neck cancer patients.Clinical Chemistry，2004，50:1261-1264.

8 Atsuhito Y，Koichi A，Masashi N，et al.Detection of Anti-Survivin Antibody in Gastrointestinal Cancer Patients.Clinical Chemistry，2001，47:1729-1731.

9 Schultz IJ，Kiemeney LA，Witjes JA，et al.Survivin mRNA expression is elevated in malignant urothelial cell carcinomas and predicts time to recurrence.Anticancer Res，2003，23:3327-3331.

10 Dong Y，Sui L，Watanabe Y，et al.Survivin expression in laryngeal squamous cell carcinomas and its prognostic implications.Anti-cancer Res，2002，22:2377-2383.