針氧療法對慢性鼻-鼻竇炎兔血清中IL-8、TNF-a的影響

呂品,李勝濤,邙玲玲,周新穎

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針氧療法對慢性鼻-鼻竇炎兔血清中IL-8、TNF-a的影響

呂品1,李勝濤2,邙玲玲3,周新穎2

(1.中國中醫科學院廣安門醫院,北京 100029;2.成都中醫藥大學,四川 610075;3.天津市河東區常州醫院,天津 300250)

從對慢性鼻-鼻竇炎兔血清中白細胞介素8(IL-8)、腫瘤壞死因子(TNF-a)影響的角度,揭示針氧療法治療慢性鼻-鼻竇炎的分子生物學機制。取體重1.5～3.0 kg健康新西蘭大白兔45只,隨機分為正常組、模型組、西藥組、針刺組、針氧組,共5組,每組9只。隨后建立兔慢性鼻-鼻竇炎模型。造模后第43天開始,西藥組服克拉霉素片,針刺組針刺5組穴位,針氧組在針刺組基礎上加氧療。治療2星期后,心臟取血提取血清,用ELISA法測各組新西蘭兔血清中IL-8、TNF-a含量。模型組兔血清IL-8含量明顯升高,與正常組相比差異有統計學意義(＜0.01)。針氧治療后多數兔血清中IL-8含量降低,但與模型組相比差異無統計學意義(＞0.05)。模型組兔血清TNF-a含量明顯升高,與正常組相比差異有統計學意義(＜0.01)。針氧治療后兔血清TNF-a含量降低,與模型組相比差異有統計學意義(＜0.05)。針氧療法能有效改善炎癥所引起的兔全身表現,降低部分兔血清中IL-8含量,降低兔血清中TNF-a含量,從而抑制炎癥的發展。

針刺;針氧療法;鼻竇炎;酶聯免疫吸附法;白細胞介素8;腫瘤壞死因子

慢性鼻-鼻竇炎是單一鼻竇或各鼻竇黏膜的慢性化膿性疾病[1],是一種常見多發性耳鼻喉科疾病。慢性鼻-鼻竇炎病程長,反復發作,難以治愈。主要局部癥狀為嚏噴、鼻塞、膿涕、嗅覺障礙、面部疼痛或壓迫感、頭痛等。本研究是通過實驗觀察針氧療法對慢性鼻-鼻竇炎兔炎性細胞因子的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

健康新西蘭大白兔45只,體重1.5～3.0 kg。

1.2 方法

1.2.1 實驗造模

取門診慢性鼻-鼻竇炎患者上頜竇穿刺沖洗液進行細菌培養,得到1麥氏單位的細菌懸濁液。參考林彬等[2]報道的竇口不完全堵塞加竇腔留置棉絮的造模方法,建立兔慢性鼻-鼻竇炎模型。具體造模方法如下。整個手術過程在無菌操作的前提下進行,將健康新西蘭大白兔用戊巴比妥鈉2 mL/kg耳緣靜脈注射麻醉后,將其鼻背正中的毛剪短、刮光。常規消毒、鋪巾,1%利多卡因術區浸潤麻醉,沿鼻背正中線切一縱長切口,取雙側上頜竇前壁,分離皮下組織及骨膜。用上頜竇穿刺針在上頜竇前壁圓孔凹陷處鉆開直徑大約1.5 mm的小孔。取少量棉絮通過上頜竇前壁所鉆的小孔,將其置放在竇口及竇腔中,不必完全堵塞竇口。而后用1 mL注射器抽取上述1 mL細菌懸濁液,小心緩慢通過小孔注入模型組、西藥組、針刺組、針氧組兔竇腔內。碘伏消毒手術創面,將骨膜、皮膚逐層縫合。飼養42 d,建立CRS模型。

1.2.2 實驗分組與治療

將45只健康新西蘭兔適應性喂養1星期后,按隨機數字表法分為5組,即正常組、模型組、西藥組、針刺組、針氧組,每組9只。自造模后第43天開始,西藥組將備用的克拉霉素按25 mg/kg·d[3]灌服給藥;針刺組將兔固定在兔架上,從面部到下肢,依次針刺雙側迎香穴、肺俞穴、脾俞穴、腎俞穴和后三里穴,留針15 min;針氧組將兔固定在兔架上,從面部到下肢,依次針刺雙側迎香穴、肺俞穴、脾俞穴、腎俞穴和后三里穴,針刺后將兔架放入密封箱后,給氧10 min。每日治療1次,療程共14 d。

1.2.3 取材

治療結束后,心臟取血裝入離心管內,3000×離心15 min后用移液器取出上清液,獲取血清,－20℃冰箱保存。

1.2.4 檢測指標與方法

酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清中白細胞介素8(IL-8)、腫瘤壞死因子(TNF-a)濃度。

1.3 統計學方法

運用SPSS13.0統計軟件進行數據處理,各組數據均以均數±標準差表示,等級資料采用兩個組別的非參數檢驗。

2 結果

2.1 一般情況觀察

適應性喂養至造模前,各組新西蘭兔體重均自然增加,行動敏捷,進食正常,皮毛密集而有光澤,鼻、唇部濕潤清潔,眼睛明亮,大便正常,無死亡。

造模2 d后,模型組、西藥組、針刺組、針氧組兔陸續普遍出現精神差,活動減少,進食及飲水量有所下降。在造模第5天,各治療組和模型組兔進食及飲水量明顯下降,倦怠懶動,大便溏稀、皮毛光澤度差。西藥組和針刺組經治療后,精神轉佳,活動較治療前多,進食及飲水量稍有增加。針氧組經治療后,精神轉佳,活動如常,進食及飲水量顯著增加,皮毛恢復光澤。

2.2 主要癥狀體征觀察

造模前,各組兔無鼻塞、膿涕癥狀,個別兔偶爾打噴嚏,屬正常生理反應。造模后至治療前,各組兔(除正常組)鼻塞、噴嚏、膿涕癥狀明顯。治療后,西藥組和針氧組兔鼻塞、噴嚏、膿涕癥狀消失。針刺組噴嚏癥狀消失,鼻塞癥狀減輕,膿涕量較治療前有所減少,但仍然不斷流出。正常組兔,始終無鼻塞、噴嚏、膿涕癥狀。模型組從造模成功至處死時,鼻塞、噴嚏、膿涕癥狀明顯。

2.3 血清中IL-8含量的測定

模型組兔血清IL-8含量明顯升高,與正常組相比差異有統計學意義(＜0.01)。西藥治療后兔血清中IL-8含量明顯降低,與模型組相比差異有統計學意義(＜0.05)。針刺治療后個別兔血清中IL-8含量降低,與模型組相比差異無統計學意義(＞0.05)。針氧治療后多數兔血清中IL-8含量降低(只有1例含量增高,比模型組高出很多,分析原因可能是因為采集血液時被感染),但與模型組相比差異無統計學意義(＞0.05)。詳見表1。

表1 各組兔血清IL-8含量比較 (±s)

注:與正常組比較1)＜0.01;與模型組比較2)＜0.05

2.4 血清中TNF-a含量的測定

模型組兔血清TNF-a含量明顯升高,與正常組相比差異有統計學意義(＜0.01)。西藥治療后兔血清TNF-a含量下降,與模型組相比差異有統計學意義(＜0.01)。針刺治療后兔血清TNF-a含量略有所下降,與模型組相比差異無統計學意義(＞0.05)。針氧治療后兔血清TNF-a含量下降,與模型組相比差異有統計學意義(＜0.05)。詳見表2。

表2 各組兔血清TNF-a含量 (±s)

注:與正常組比較1)＜0.01;與模型組比較2)＜0.05,3)＜0.01

3 討論

3.1 慢性鼻-鼻竇炎的治療方法

目前慢性鼻-鼻竇炎的治療,西醫以鼻內窺鏡手術和西藥為主,中醫以內服中藥為主及中藥外敷、針灸、氧療等方法。西醫治療方法存在著一些不足,如細菌耐藥性增強會使抗生素療效降低,局部長期應用血管收縮劑可導致藥物性鼻炎,手術治療會產生手術諸多后遺癥等。中藥治療慢性鼻竇炎效果較好,但對于不適宜服用中藥的患者,治療慢性鼻竇炎就缺少良效方法。面對這些問題,迫切需要尋求一種療效確切、穩定、副反應少的新治療方法。針氧療法治療慢性鼻-鼻竇炎缺乏相關報道和規范化的研究,也缺乏隨機對照的綜合研究。如何運用針氧療法治療慢性鼻-鼻竇炎對于臨床治療來說是一個值得關注的問題。

3.2 選穴依據

鼻淵者與肺、脾、腎有密切的聯系,其證有虛、實之分。實者以脾胃濕熱及外感風熱為多見;虛者以肺氣虛寒、脾氣虛弱、腎氣不足為多見。因此擬定針氧治療慢性鼻-鼻竇炎治療原則為疏風清熱,宣肺降濁,健脾益氣,扶正祛邪。文獻研究表明[4],臨床選穴也有一定規律可循。根據對兔的可操作性選取迎香穴、肺俞穴、脾俞穴、腎俞穴和足三里穴。肺俞穴、脾俞穴、腎俞穴均為背俞穴,是臟腑經氣到達體表的重要位置,背部有大團的免疫細胞平時處于休眠狀態,調整背俞穴激活了免疫細胞,提高了免疫力,有效地增強抵抗疾病的能力。

根據經絡所過,主治所及的原理,近取鼻旁陽明大腸經末穴迎香兩穴,疏風清肺熱而通鼻竅。通過瀉法可使毛細血管收縮,鼻孔縮小,鼻癢、噴嚏、鼻分泌物減少,從而改善過敏性鼻炎癥狀及體征[5]?，F代研究顯示,針刺治療可改善局部血液循環,加速炎性產物的吸收和排泄,起到消炎退腫的作用[6,7]。肺俞屬膀胱經腧穴,位于背部,具有疏風瀉熱,宣肺解表,肅肺降濁作用。肺臟的濕熱之氣外傳于膀胱經,肺俞穴有散發肺臟之熱作用。針灸背部的肺俞穴,通過其經絡系統,可調節肺臟功能,調和氣血陰陽,損有余而補不足,使人體氣血維持動態的平衡。脾俞具有健脾利濕、調整消化道的功能。電針百會、脾俞穴[8],針后30 min、60 min、90 min時白細胞總數顯著升高。白細胞具有吞噬、殺傷細菌及異物和免疫功能。電針機體后,通過經絡、神經-體液系統等的調節,使白細胞總數升高,增強機體的防御能力和抗病能力,起到扶正祛邪的作用。腎具有受藏肺所吸入之清氣的功能。腎受藏清氣的功能,是腎氣的固攝作用之一。腎俞穴具有補益腎氣的作用,使之固攝作用得以發揮。腎俞穴是經脈氣血流注多的地方,具有補益氣血之功效。足三里為足陽明胃經合穴,胃經起于鼻旁,具有調理脾胃,補益氣血,疏風化濕,扶正祛邪之功效。足三里穴是陽明經穴,根據陽明經多氣多血的中醫理論選穴,足三里能健脾,消除腹脹,助消化[9]?，F代醫學證明刺激足三里能夠調整全身功能,提高機體免疫力[10]。

3.3 針氧療法原理

氧是新陳代謝的關鍵物質,是生命活動的第一要素。缺氧引起疾病及病變導致缺氧的情況很多,因此氧療在各種疾病的治療、預防和康復中得到廣泛的應用。常壓吸氧后血氧分壓可提高50%,氧向組織的彌散距離迅速增加,血液黏度降低,微循環改善,血管收縮,減輕組織水腫,吞噬細胞功能加強,有利于壞死組織的修復和清除,加快側支循環的建立,清除無氧代謝的酸性產物,并有免疫調節作用。針刺通過刺激穴位,改善局部血液循環,調節局部免疫功能,促進炎癥恢復,對炎癥的滲出、變質、增生病理變化過程均有調整作用,既能促進炎癥的防衛反應,又能抑制損傷反應。

關于針刺配合吸氧的作用機理目前尚無明確實驗研究證實,但研究表明氧氣除可以滿足機體各器官新陳代謝時對氧氣的需要外,還可增加有氧代謝以達到改善各臟器功能的作用。長期鼻塞會引起大腦及全身各組織的缺氧,在針刺的同時吸入氧氣可迅速改善患者腦細胞缺氧現象,氧氣被吸入終末支氣管和肺泡,能迅速進入血液循環,改善血液黏稠度,提高動脈血氧含量及飽和度,促進代謝。采取針刺配合氧療的治療方法,針刺不僅能疏通經絡,暢調氣血,同時對氧起到引經定位,直達病所的作用。針氧療法既能促進炎癥灶的愈合,又能控制組織的增生性病變的發展,改善兔整體機能,從而使慢性鼻-鼻竇炎兔機體逐步恢復正常。

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Effect of Acupuncture plus Oxygen Therapy on Serum IL-9 and TNF-ain Chronic Rhinosinusitis Rabbits

1,-2,-3,-2.

1.’,100029,; 2.,610075,; 3.,300250,

To explore the molecular biological mechanism of combined acupuncture and oxygen therapy in treating chronic rhinosinusitis by studying the serum IL-8 and TNF-ain chronic rhinosinusitis rabbits.Forty-five healthy New Zealand white rabbits (weight 1.5～3.0 kg) were randomly divided into five groups, a normal group, a model group, a western medication group, an acupuncture group, and an acupuncture-oxygen group, with 9 in each group. On the 43rd day after the chronic rhinosinusitis rabbit models were successfully developed, the Western medication group started to take Clarithromycin tablets, the acupuncture group received acupuncture treatment with 5 groups of acupoints, and the acupuncture-oxygen group received additional oxygen therapy plus acupuncture. Blood was drawn via intracardiac puncture for extracting blood serum after 2-week treatment, and ELISA was used for determining the contents of serum IL-8 and TNF-a.Compared with the normal group, the content of serum IL-8 was significantly higher in the model group (＜0.01). Reduction of serum IL-8 content was detected in majority of rabbits in the acupuncture-oxygen group, but without significant difference compared with the model group (＞0.05). Compared with the normal group, the content of serum TNF-awas significantly higher in the model group (＜0.01). Compared with the model group, the content of serum TNF-awas significantly lower in the acupuncture-oxygen group (＜0.05).Combined acupuncture and oxygen therapy can effectively improve the general symptoms in rabbits induced by inflammation, and reduce the content of rabbit serum IL-8 to some extent, and definitely reduce the content of rabbit serum TNF-a, inhibiting the development of inflammation.

Acupuncture; Acupuncture-oxygen therapy; Sinusitis; Enzyme-linked immunosorbent assay; IL-8; TNF-a

1005-0957(2011)08-0574-03

R2-03

A

10.3969/j.issn.1005-0957.2011.08.574

2011-05-20

呂品(1983 - ),女,碩士