茸鹿細管凍精人工輸精技術操作規程

修德軍

(撫順市農業科學研究院,遼寧 清原 113300)

1 適用范圍

本規程適用于全國各地茸鹿人工輸精點結合實際條件應用。

2 人工輸精的要求

2.1 輸精員必須具有鹿生殖解剖基礎理論知識,熟練掌握細管凍精人工輸精的各個主要技術環節。輸精員應保持個人衛生,指甲剪短磨光,工作服干凈整齊,工作期間禁止吸煙,禁止酒后操作。梅花鹿輸精員應選擇手掌圍度小于17cm的人員進行培訓。

2.2 人工輸精點應設有輸精準備室進行細管凍精的保存、解凍操作和質量檢驗。準備室面積不小于10m2,室溫不低于15℃。準備室應保持無塵、無煙、無味、無蚊蠅和無直射陽光,所需設備保持清潔。準備室不宜與獸醫室、庫房等混用。

2.3 輸精準備室應配齊顯微鏡、恒溫載物臺、恒溫水浴箱、干燥箱、高壓滅菌鍋、載玻片、蓋玻片、細管剪子、鑷子、細管輸精器、液氮罐等儀器設備。

2.4 對使用器械應及時清洗、消毒,并保存在干凈的櫥柜內。消毒方法:先用溫肥皂水刷除污物,然后用清水沖洗干凈,再用蒸餾水沖洗,最后放入紗布袋中蒸汽滅菌30min,亦可用75%酒精棉球擦拭消毒。

2.5 發情母鹿輸精前要進行麻醉保定,保定后排除宿糞,清洗外陰部。

2.6 對輸精用過的廢棄用品(一次性塑料輸精手套、輸精器外套等)集中收集,嚴格按照環保要求處理。

3 細管冷凍精液解凍及質檢

3.1 鹿細管凍精要求在輸精前幾分鐘內解凍并立即輸精。最多不超過15min。

3.2 從液氮罐中迅速取出細管凍精,時間不超過5s,投入恒溫水浴箱38℃水中解凍10s,取出后用干凈紗布擦去水珠,用手撮動幾下使細管中精液混勻、排除氣泡備用。

3.3 解凍后的細管凍精應檢查精子活力,鏡檢溫度37℃,放大倍數160～400倍。檢查活力須在解凍3～5min后精子完全復蘇時進行,活力評定應取多視野、多液層平均值。精子活力低于0.3的細管凍精不得使用。

3.4 質檢合格的細管凍精裝入細管輸精器,準備輸精。

4 人工輸精

4.1 輸精時機:發情母鹿在接受試情公鹿爬跨后,經多次試情,至拒絕接受試情公鹿爬跨時,即可麻醉保定輸精。同期發情的梅花鹿在取栓后58～60h麻醉保定一次輸精。

4.2 輸精方法:輸精應采用直腸把握子宮頸深部輸精法。輸精動作要柔和、快捷,做到“輕插、適深、緩注、慢出”。輸精槍應用消毒毛巾包裹,防止精液受冷打擊。

4.3 輸精器必須在無污染的情況下通過陰道進入子宮頸,每輸精一次必須更換一只輸精器外套或消毒后再用。

5 建立育種檔案

建立育種檔案有利于規范茸鹿人工授精工作。母鹿配種記錄表應每頭鹿登記1張,配種時及時認真逐項填寫,并長期保存,按時進行統計整理歸檔。

母鹿配種記錄表見下表

母鹿配種記錄表

6 受胎率

評定鹿細管凍精配種受胎效果,主要以第一情期受胎率的高低為標準,一般我們也以平均情期受胎率為標準。發情母鹿受精20～25天后不返情即可初步認為受孕。

第一情期受胎率=第一情期受胎母鹿數/第一情期受精母鹿數×100%

平均情期受胎率=總受胎母鹿數/總受精母鹿數×100%

不返情率=不返情數/受精母鹿數×100%