李龍瑞 張吉鹍 趙桂庭 周奀忠 羅 靈 〈 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院 廣州 5064 江西省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所 南昌 000 江西核工業(yè)天地和藥業(yè)有限公司 江西 峽江 400〉
雞慢性呼吸道病和大腸桿菌病是雞的常見病和多發(fā)病,前者是由家禽毒支原體引起的一種慢性上呼吸道疾病,常因繼發(fā)或并發(fā)大腸桿菌感染而引起雞群大批死亡,給養(yǎng)雞業(yè)帶來很大的經(jīng)濟(jì)損失。藥物防治是目前較為有效的防治措施。泰妙菌素對(duì)革蘭氏陽性菌、支原體等均有較強(qiáng)的抗菌作用,常用于防治雞的慢性呼吸道病、豬喘氣病等,但對(duì)革蘭氏陰性菌作用較差。鹽酸土霉素為廣譜抗生素,對(duì)革蘭氏陰性菌、陽性菌和支原體等均有較強(qiáng)的抗菌活性。為了客觀、科學(xué)地評(píng)價(jià)鹽酸土霉素、泰妙菌素配合使用對(duì)雞毒支原體和大腸桿菌混合感染的防治效果,本試驗(yàn)通過人工誘發(fā)混合感染的疾病模型,以混飲方式進(jìn)行療效觀察。
1.1 試驗(yàn)藥品
鹽酸土霉素由河北華曙藥業(yè)有限公司提供,批號(hào)為070901。延胡索酸泰妙菌素由山東勝利股份有限公司提供,批號(hào)為080104。
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
黃羽肉雞,由廣東省農(nóng)科院畜牧研究所提供雞苗,經(jīng)檢測(cè)均為支原體、大腸桿菌血清學(xué)反應(yīng)陰性。試驗(yàn)前按常規(guī)飼養(yǎng),喂自配全價(jià)粉料,不含任何藥物,供自由采食或飲水。飼養(yǎng)至21d時(shí),選出臨床觀察健康雞210只,隨機(jī)分成7組,每組30只。具體分組情況見表1。
1.3 人工誘導(dǎo)混合感染
1.3.1 病原
1.3.1.1 雞毒支原體
禽毒支原體S6毒株(MGS6株),由中國(guó)獸藥監(jiān)察所提供。KM2培養(yǎng)基培養(yǎng),接種液為第3代傳代培養(yǎng)物。按常規(guī)方法計(jì)數(shù),毒株數(shù)為109cfu/mL。
1.3.1.2 雞大腸桿菌
雞大腸桿菌O78血清型,由中國(guó)獸藥監(jiān)察所提供,使用前,保存的強(qiáng)毒菌種先接種普通平板培養(yǎng)24h,選典型菌落于肉湯中,37℃培養(yǎng)18h后取出。肉湯培養(yǎng)物接種雞復(fù)壯后,從病死雞肝臟分離大腸桿菌并接種到平板培養(yǎng),最后選典型菌落用普通肉湯培養(yǎng)制備攻毒菌液,以平板培養(yǎng)計(jì)數(shù)法測(cè)定其生長(zhǎng)濁度單位為7.8×108個(gè) /mL。
1.3.2 攻毒方式和接種量
除健康對(duì)照組外,均按每100g體重的雞胸氣囊接種毒支原體液0.5mL,再按每100g體重的雞胸肌接種大腸桿菌液0.1mL。
1.3.3 接種前后觀察
接種前及接種后觀察雞的臨床癥狀,主要包括精神狀態(tài)、食欲和呼吸系統(tǒng)的變化等。對(duì)死雞進(jìn)行剖檢,觀察氣管、氣囊、肺、心臟和肝臟等的病變,并進(jìn)行病原菌的分離培養(yǎng)。
1.4 實(shí)驗(yàn)性治療
按鹽酸土霉素、延胡索酸泰妙菌素的推薦劑量為試驗(yàn)中劑量。第2~7組已接種過雞毒支原體和大腸桿菌的試驗(yàn)雞在24h后,部分雞開始出現(xiàn)支原體病感染和大腸桿菌病臨床癥狀,如精神不振、沉郁和喘氣等。在接種后1h內(nèi)分別按表1中處理方式給藥,每天給藥1次,任自由飲服,連用5d。觀察期為接種后14d。每天觀察雞臨床表現(xiàn),對(duì)死雞進(jìn)行剖檢,確定死因。
1.5 藥效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)
1.5.1 死亡
凡在試驗(yàn)期限間,出現(xiàn)雞毒支原體感染和大腸桿菌病的典型癥狀并死亡,尸體剖檢氣管、氣囊、肺、心臟和肝臟有典型的病變特征,判定為受感染死亡。根據(jù)死亡雞數(shù)占整個(gè)試驗(yàn)雞數(shù)的比率計(jì)算死亡率。
1.5.2 有效
經(jīng)用藥后,治愈的與沒有死亡但有臨床癥狀表現(xiàn)的雞均為治療“有效”。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每組存活的雞數(shù)占試驗(yàn)雞數(shù)的百分率為有效率。
1.5.3 治愈
凡在試驗(yàn)期間,雞經(jīng)飲水給藥后,精神狀態(tài)、食欲及呼吸恢復(fù)正常,不再表現(xiàn)氣管啰音、張口呼吸和拉稀等臨床癥狀均屬治愈。根據(jù)治愈雞數(shù)占整個(gè)試驗(yàn)雞數(shù)的比率計(jì)算治愈率。
1.6 數(shù)據(jù)的分析與處理
用生物統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行數(shù)據(jù)的顯著性檢驗(yàn),其中死亡率、有效率和治愈率用卡方檢驗(yàn)。
2.1 感染對(duì)照組
30只雞中有25只在接種后7d內(nèi)死亡。病雞出現(xiàn)的主要臨床癥狀為精神不振、食(飲水)欲下降、羽毛松亂、閉眼昏睡、拉稀糞和啰音等,臥地至死亡。死雞的剖檢特征為氣管黏膜充血、肝臟呈肝周炎和腫大易碎,肝漿膜增厚,有大量滲出物。心包炎,心包積水,纖維素性滲出物。氣囊混濁、增厚、有干酪樣物覆蓋或粘連。
2.2 實(shí)驗(yàn)性治療
試驗(yàn)雞經(jīng)飲水給藥后,與感染對(duì)照組比較,出現(xiàn)的臨床癥狀較輕。雞接種雞毒支原體和大腸桿菌后的14d觀察期內(nèi),各組雞的死亡率、有效率和治愈率見表2。
3.1 人工誘變雞毒支原體和大腸桿菌混合感染疾病模型構(gòu)建成功本試驗(yàn)感染對(duì)照組的死亡率為83.3%,說明本次人工誘變雞毒支原體和大腸桿菌混合感染疾病模型的構(gòu)建成功。
3.2 低劑量鹽酸土霉素、延胡索酸泰妙菌素配合使用,亦可提高其療效

表1 試驗(yàn)雞的分組及處理

表2 各試驗(yàn)組對(duì)雞毒支原體和大腸桿菌混合感染的療效試驗(yàn)
統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明,復(fù)方制劑的高、中和低劑量的死亡率均極顯著低于感染對(duì)照組(P<0.01),而有效率分別為90.0%、83.3%和70.0%,均極顯著高于感染對(duì)照組(P<0.01)。這表明鹽酸土霉素、延胡索酸泰妙菌素配合使用對(duì)雞毒支原體-大腸桿菌混合感染均有較好的療效,其中高、中劑量組與低劑量組比較,有效率有明顯提高,但差異不顯著。
判定標(biāo)準(zhǔn):當(dāng)df=1,n=30時(shí),X2≥3.84表示差異顯著,X2≥6.63表示差異極顯著。
3.3 鹽酸土霉素、延胡索酸泰妙菌素配合使用較單個(gè)效果明顯,具有明顯的正組合效應(yīng)
單方鹽酸土霉素和單方延胡索酸泰妙菌素對(duì)混合感染的有效率分別為60.0%和63.3%,但與推薦中劑量組比較,差異分別為顯著(X2=4.02,P<0.05)與不顯著(X2=3.07,P>0.05)。綜合比較各組的死亡率、有效率和治愈率,發(fā)現(xiàn)以復(fù)方制劑高、中劑量組的療效最好。本試驗(yàn)表明,鹽酸土霉素、延胡索酸泰妙菌素兩種藥物合用呈現(xiàn)一定的協(xié)同作用,對(duì)雞毒支原體和大腸桿菌混合感染的療效優(yōu)于兩種單方藥物。