DBA/2J小鼠對(duì)糖尿病誘導(dǎo)劑STZ反應(yīng)的性別差異

李曉莉，顧灑灑，吳淑燕，張 巖

(上海理工大學(xué)，上海200090)

鏈脲佐菌素(STZ)常用來(lái)誘導(dǎo)1型糖尿病，其在不同性別小鼠間的生物活性是否存在差異還不清楚。大多數(shù)實(shí)驗(yàn)證實(shí)，雌激素對(duì)于非糖尿病性腎病具有保護(hù)作用［1，2］。然而，具有誘導(dǎo)糖尿病及糖尿病腎病作用的STZ是否能夠?qū)Υ菩孕∈螽a(chǎn)生同樣效應(yīng)，有待于驗(yàn)證。2010年7～10月，我們檢測(cè)了DBA/2J小鼠對(duì)STZ反應(yīng)的性別差異。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物處理 8周齡DBA/2J小鼠，體質(zhì)量20～22 g，由第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物適應(yīng)環(huán)境1周后，腹腔注射STZ 40 mg/kg，連續(xù)5 d。雌性、雄性小鼠各8只。

1.2 檢測(cè)指標(biāo)及方法 分別于STZ注射完成后2、6、10周測(cè)量體質(zhì)量及空腹血糖(FBG，CONTOUR，Bayer)，并收集尿液。尿液稀釋后，使用ELISA試劑盒(BETHYL，TX，USA)檢測(cè)尿蛋白含量，并經(jīng)尿肌酐值進(jìn)行校正。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用Excel2003對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。所得結(jié)果以±s表示，對(duì)每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的雌、雄2組小鼠進(jìn)行雙尾Student’s t檢驗(yàn)，以P≤0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

STZ注射前后雌、雄DBA/2J小鼠體質(zhì)量、FBG、尿蛋白含量比較見(jiàn)表1。

表1 STZ注射前后雌、雄小鼠體質(zhì)量、FBG、尿蛋白含量比較(±s)

表1 STZ注射前后雌、雄小鼠體質(zhì)量、FBG、尿蛋白含量比較(±s)

注:與雌性組比較，*P ＜0.05，△P ＜0.01

組別 體質(zhì)量百分比(%)FBG(mg/dl)尿蛋白/肌酐(μg/mg)雌性組0周 100.0 ±4.3 102±5 103 ±9 2周 91.6±2.2 99±13 127±15 6 周 102.0 ±2.3 125 ±5 141 ±19 10周 108.0 ±4.4 139 ±15 154±23雄性組0周 100.0 ±5.6 107 ±11 98±15 2 周 90.9 ±5.5 261 ±25* 386 ±25*6周 86.0±5.0* 320±29△ 597±42△10周 78.9±3.3△ 460±23△ 671±36△

3 討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)STZ誘導(dǎo)1型糖尿病后，雌性小鼠體質(zhì)量雖在第2周時(shí)略有下降，但之后保持穩(wěn)步增長(zhǎng)趨勢(shì)，相反，雄性小鼠體質(zhì)量顯著降低，至第10周時(shí)，已比實(shí)驗(yàn)前降低20%。因此，誘導(dǎo)劑STZ對(duì)雌性小鼠體質(zhì)量存在短期可逆負(fù)性影響。

雌性小鼠FBG在實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)無(wú)明顯變化，而雄性小鼠經(jīng)STZ注射后，F(xiàn)BG水平急劇上升，至第10周時(shí)，比實(shí)驗(yàn)前提高了3倍多。Keck等［3］報(bào)道，雌性小鼠體內(nèi)雌激素失衡會(huì)負(fù)性影響糖尿病腎病進(jìn)程。研究顯示，小鼠經(jīng)去氧乙烯基環(huán)己烯(VCD)誘導(dǎo)致卵巢功能喪失后，STZ注射后第6周，與卵巢功能正常的糖尿病小鼠比較，血糖值顯著升高［3］。結(jié)合本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以看出，雌激素對(duì)于血糖的穩(wěn)定具有重要調(diào)節(jié)作用。

蛋白尿是糖尿病腎病發(fā)生早期的病理生化指標(biāo)［4］。雌性小鼠尿蛋白含量無(wú)明顯變化，這與其FBG未發(fā)生病理性升高直接相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)中，雄性DBA/2J小鼠尿液中蛋白含量呈顯著升高趨勢(shì)，這與我們以往對(duì)糖尿病DBA/2J小鼠的研究結(jié)果相一致［5，6］。由于蛋白尿的產(chǎn)生受腎小球微結(jié)構(gòu)、濾過(guò)屏障等諸多因素影響［7，8］，因此，本研究也間接表明 STZ 對(duì)于雌性小鼠的腎功能在短期內(nèi)并未產(chǎn)生損傷。

綜上所述，糖尿病誘導(dǎo)劑STZ單獨(dú)使用未能有效制備雌性小鼠糖尿病模型，這主要是由于本實(shí)驗(yàn)中雌性小鼠體內(nèi)雌激素處于正常水平。結(jié)合他人研究結(jié)果，我們認(rèn)為雌性小鼠1型糖尿病模型的建立不僅需要STZ注射誘導(dǎo)，還需結(jié)合去卵巢手術(shù)處理，或VCD等藥物處理，破壞體內(nèi)雌激素平衡狀態(tài)，從而有效建立糖尿病模型。

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