乙肝患者外周血 IL-18、TGF-β1、ALT、TBIL、HBV-DNA定量測定及分析

(勝利油田中心醫院，山東東營257034)

乙型病毒性肝炎(下稱乙肝)發病機理復雜。目前已證實，HBV感染可使病情加重及病毒逃避機體免疫而持續感染［1］，其所誘導的機體免疫反應程度決定患者的臨床特征和病情嚴重程度;許多細胞因子與乙肝、肝纖維化等形成關系密切。2008年5月～2010年12月，我們對67例乙肝患者外周血IL-18、轉化生長因子(TGF)-β1、ALT、總 膽 紅 素(TBIL)、HBV-DNA定量進行測定，并分析了各指標間的關系。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 同期收治的67例乙肝患者(乙肝組)，男39例，女28例;年齡22～50(39.8±16.2)歲。診斷均符合2000年全國第十次病毒性肝炎會議(西安)制定的《病毒性肝炎防治方案》［1］，其中輕度13例、中度20例、重度15例、并肝硬化19例。設20例體檢健康者為對照組，男12例、女8例，年齡19～48(40.5±15.6)歲。兩組一般資料具有可比性。

1.2 外周血 IL-18、TGF-β1、HBV-DNA 定量測定兩組均抽取5ml空腹靜脈血，收集于無菌離心管中，室溫放置不超過4 h，4℃、3 000 r/min離心10min，吸取血清轉入無菌EP管中-20℃保存待檢。采用自動分析儀以放免法測定ALT、TBIL，采用雙抗體夾心ABC-ELISA法檢測IL-18、TGF-β1，采用熒光PCR系統行HBV-DNA定量檢測。

1.3 統計學方法 采用SPSS11.5進行統計學處理。計量資料以±s表示、行t檢驗，各指標間關系采用Spearman相關分析及偏相關分析。P≤0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

兩組血清 TGF-β1、IL-18、ALT、TBIL 水平見表1。IL-18與ALT、TBIL呈正相關，r分別為0.379 4、0.504 7(P 均＜0.01);TGF-β1與 IL-18、ALT、TBIL無明顯相關性;HBV-DNA 定量與 IL-18、TGF-β1、ALT、TBIL均無明顯相關性，r分別為0.103 8、0.180 6、0.004 3、0.016 9(P 均 ＞0.05)。

表1 兩組血清 IL-18、TGF-β1、ALT、TBIL、HBV-DNA(±s)

表1 兩組血清 IL-18、TGF-β1、ALT、TBIL、HBV-DNA(±s)

注:與對照組比較，*P＜0.01;與輕度比較，△P＜0.01;與中度比較，#P＜0.01;與重度比較，▲P＜0.01

組別 n IL-18(pg/ml) TGF-β1(pg/ml) ALT(IU/L) TBIL(μmol/L) HBV-DNA(×105 copies/m 67輕度 13 83.22±20.36* 102.51± 16.55* 76.69± 30.00* 19.68± 5.72* 10.51± 8.65*中度 20 162.60±52.67＊△ 231.12± 42.62＊△ 268.26± 88.75＊△ 53.27± 19.02＊△ 34.26± 78.67重度 15 279.62±50.16＊△# 457.80±117.83＊△# 436.95±153.32＊△ 280.95±192.91＊△# 1.39± 2.25肝硬化 19 157.81±45.80＊△▲ 829.37± 96.42＊△#▲ 247.70±133.82＊△ 70.40± 45.44＊△▲ 54.65±106.81對照組 20 65.19±18.02 41.21± 8.31 26.22±10.24 12.20 l)乙肝組± 2.150.00±0.00

3 討論

人體感染HBV后的病變進展主要由病原及宿主兩方面因素決定。病原研究發現，HBV-DNA定量測定是了解HBV復制狀況敏感而可靠的方法，也是選擇抗病毒治療及評價藥物療效最重要的指標之一［2，3］;宿主方面的關鍵為自身免疫狀態，機體細胞免疫低下或缺陷及HBV在肝內持續復制是乙肝病變進展的主要原因。IL-18是由活化巨噬細胞、T細胞、NK細胞等產生的一種強有力的免疫調節因子［4］，對乙肝患者具有雙重作用:通過促進Th1/Th2反應平衡向Th1方向發展，誘導IFN-γ產生而抑制病毒復制，有利于病毒消除及肝功能恢復［5］;調動宿主對HBV的細胞免疫，促進吞噬細胞和NK細胞介導的非特異性免疫和輔助性T細胞、細胞毒性T細胞介導的特異性免疫，同時導致一定程度肝臟損害。本研究顯示，乙肝組不同疾病時期患者血清IL-18水平均明顯高于對照組，且與血清ALT、TBIL水平呈正相關。提示HBV感染可刺激IL-18表達，且IL-18與肝臟損傷嚴重程度密切相關［6］。但乙肝組肝硬化者血清IL-18水平與病情為中度者無明顯差異，IL-18與TGF-β1無相關性。可能與病例數量偏少及其他調節免疫的細胞因子參與優勢作用有關，仍需進一步研究。TGF-β1亦為一種多功能細胞因子，已證實其為目前已知最強的致纖維化因子。本研究表明，乙肝組輕度、中度、重度患者血清TGF-β1水平均顯著高于對照組，且隨病情加重而升高。表明血清TGF-β1水平與患者病情基本一致，抑制TGF-β1分泌或拮抗其作用有利于恢復細胞免疫功能。本研究還顯示，乙肝組血清HBV-DNA定量顯著高于對照組，但與病情及 IL-18、TGF-β1、ALT、TBIL均無明顯相關性。證實HBV感染所致肝臟和其他臟器病變的發生、發展與人體免疫狀態有關。可能機制:HBV不直接致肝臟炎癥損害，而是通過激發宿主的免疫反應及細胞因子等共同作用于肝臟。因此對慢乙肝實施抗病毒治療不能單憑血清HBV-DNA水平決定，應結合肝功能、血清纖維化指標及影像學檢查等判定，同時動態監測上述指標及抗病毒療效。

總之，乙肝發病過程復雜，血清 IL-18、TGF-β1水平可作為判斷肝臟損傷嚴重程度的指標，其中TGF-β1水平升高對早期肝硬化具有診斷價值;HBV-DNA定量與肝功能及肝臟損傷程度無明顯相關。

［1］中華醫學會傳染病與寄生蟲病學分會、肝病學分會聯合修訂.病毒性肝炎的診斷標準［J］.中華傳染病雜志，2001，19(1):56-60.

［2］張玉琦，周秀梅，丁明權，等.乙型肝炎患者血清HBV DNA水平與臨床特征的關系［J］.醫學臨床研究，2003，20(9):676-678.

［3］Zhou P，Cai Q，Guan J，et al.Relationship between the concentration of HBV DNA and liver damage in serum of the patients of chronic hepatitis B［J］.Gastroenterol Hepatol，2001，16(1):302-308.

［4］Lotze MT，Taraha H，Okamura H.Interleukin-18 as a novel，distinct，and distant member of the interleukin-1 family promoting development of the adaptive immune response:the interleukin-18 issue of the Journal of Immunotherapy［J］.J Immunother，2002，25(11):1-3.

［5］Tsutsui H，Matsui K，Okamura H，et al.Pathophysiological role of interleukin-18 in inflammatory liver diseases［J］.Immunol Rev，2000，174(1):192-209.

［6］Takeuchi D，Yoshidome H，Kato A，et al.Interleukin-18 causes hepatic ischemia/reperfusion injury by suppressing anti-inflammatory cytokine expression in mice［J］.Hepatology，2004，39(3):699-710.