酶聯免疫法檢測新型除草劑雙甲胺草磷

摘 要 以甲醇與三氯硫磷為原料，人工合成了半抗原結構類似物，與琥珀酸酣反應引入羧基，利用活性酯法使之與載體蛋白偶聯，制得完全抗原，免疫動物獲得多克隆抗體，建立了新型除草劑雙甲胺草磷（H-9201）的間接競爭ELISA檢測方法，并進行了水體中除草劑H-9201殘留的實際樣品檢測。結果表明: 所獲得的多克隆抗體可以特異性的識別目標化合物H-9201，抗體的效價為1/102400，抗體的工作濃度為1/18000倍，抗原的工作濃度為1/512倍。在此工作濃度條件下建立的ELISA方法對H-9201的抑制中濃度（IC50）為1.331 mg/L； 檢出限（IC10）為0.017 mg/L； 線性范圍為0.05～20.0 mg/L。交叉反應表明，該抗體對結構類似化合物2，4-二甲基-6-硝基苯酚、硝基苯酚、甲胺磷、甲拌磷、毒死蜱、對硫磷均無識別作用；微弱識別S-羧乙基-O，O-二甲基二硫代磷酸酯、樂果、馬拉硫磷；對半抗原及其結構類似物具有較高的識別作用。對田間水樣的添加樣本進行檢測，方法的回收率范圍為（80.5±4.5）%～（95.2±3.2）%，可用于水體樣本中H-9201殘留的ELISA檢測。

關鍵詞 除草劑； 雙甲胺草磷； 酶聯免疫； 多克隆抗體