CD44v6與子宮頸癌轉移的相關性研究

杜建層 王秋菊 馮艷萍

子宮頸癌是最常見的女性生殖道惡性腫瘤之一，近年來發病率有上升及年輕化趨勢。其浸潤及轉移是導致患者死亡的重要原因。CD44v6是細胞表面黏附分子CD44的變異型之一。CD44v6的主要功能是與細胞骨架連接蛋白結合，參與細胞與基質、細胞與細胞間的黏附，參與細胞偽足的形成及細胞的遷徙運動;有利于腫瘤細胞的轉移和擴散［1］。本研究通過檢測CD44v6在宮頸癌組織中的表達，進一步探討CD44v6在子宮頸癌轉移中的作用，以期為腫瘤的生物靶向性治療、預測和改善子宮頸癌患者的預后提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2005至2010年河北醫科大學第一醫院、河北醫科大學第三醫院手術切除并經病理組織學檢查證實的宮頸組織標本95例，其中宮頸癌組織35例(有淋巴轉移者25例;無淋巴轉移者10例);宮頸上皮內瘤變(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)組織30例;正常宮頸組織或者伴有慢性宮頸炎組織30例，所有標本術前均未經過放療及化療。

1.2 方法 標本均用10%甲醛固定，石蠟包埋，采用免疫組化法檢測CD44v6蛋白陽性表達水平。

1.3 結果判定 CD44v6蛋白陽性染色定位于細胞膜或者細胞質中，呈棕黃色顆粒，按照顯色有無和陽性細胞數的多少將其分為三個等級:－:無陽性細胞;+:陽性細胞＜50%且顏色淺;++:陽性細胞≥50%且顏色深，其中強陽性(++)為陽性。

1.4 統計學分析 應用SPSS 13.0統計軟件，計數資料采用χ2檢驗及連續校正χ2檢驗，兩類別四格表陽性率的比較采用Fisher精確概率法，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 CD44v6的陽性分布 CD44v6在細胞膜中呈線性分布，并在細胞膜或細胞質中呈棕黃色顆粒。CD44v6的陽性信號定位于宮頸癌細胞、宮頸上皮內瘤變細胞或者正常宮頸組織細胞的細胞質或胞膜中，呈棕黃色顆粒。

2.2 CD44v6的陽性表達 CD44v6在宮頸癌、宮頸上皮內瘤變及正常宮頸組織中的表達率分別為82.9%(29/35)、46.7%(14/30)、10.0%(3/10)，3組比較差異有統計學意義(P＜0.05);3組兩兩比較，差異亦有統計學意義(P＜0.05)，宮頸癌有淋巴轉移組陽性表達率為96.0%(24/25)顯著高于無淋巴轉移組50.0%(5/10)，差異有統計學意義(P＜0.05)。

3 討論

3.1 CD44v6的分子結構 白細胞分化抗原44(cluster of differentiation 44;CD44)是細胞黏附分子家族，是一種細胞表面跨膜糖蛋白。CD44基因有19～20個高度保守的外顯子，被長短不一的內含子所分隔，定位于11號染色體的短臂上(11p13)。CD44基因根據其外顯子表達方式的不同，可分為兩種類型:一種是V區變異性剪接外顯子，稱為變異型CD44(CD44v);另一種是由僅含組成型外顯子的CD44轉錄體編碼的蛋白質，稱標準型CD44(CD44s)。10種不同的CD44拼接變異體CD44v，可在CD44s中按不同的順序插入10個變異型外顯子來產生。研究表明CD44v主要分布在上皮細胞中，CD44v與腫瘤分化類型及轉移密切相關，且在許多類型的惡性腫瘤中均有不同程度的表達［2］。CD44v主要包括三種亞型:CD44v3、CD44v5、CD44v6。CD44V6與CD44s的結構基本相似，但在細胞膜外區插入了34個由V6變異拼接型外顯子所編碼的不同序列的氨基酸殘基。

3.2 CD44v6的生物學功能 CD44v6為細胞表面跨膜糖蛋白分子之一，分布極為廣泛，其主要有以下生物學功能:(1)可以參與細胞偽足的形成;(2)與細胞骨架連接蛋白相結合;(3)與細胞的遷徙運動密切相關;(4)可以識別并結合相應的配體，參與腫瘤細胞、宿主細胞以及宿主基質之間的黏附;(5)可以參與細胞與基質、細胞與細胞間的黏附作用;(6)其作為細胞基質透明質酸受體，可以改變腫瘤細胞表面黏附分子的功能和構成，在腫瘤細胞的轉移和擴散過程中起著非常重要的促進作用［1］。

3.3 CD44v6與腫瘤轉移 CD44v6的過表達均與人體多種惡性腫瘤的發生、發展、侵襲和轉移相關。CD44v6可以參與淋巴細胞的增殖、活化及再循環，主要介導循環中的淋巴細胞回歸定位于淋巴結中，其被稱為是淋巴結歸巢的受體［3］。表達CD44v6的腫瘤細胞離開原發灶進入外周淋巴器官的過程有很強的侵襲行為，同淋巴細胞循環的運行過程非常相似，都能在黏附接觸過程中進行細胞遷移，在引流淋巴結中快速積聚以后大量的增殖，并通過外滲作用進入周圍組織細胞，最后釋放到循環系統中。CD44v6作為細胞基質透明質酸受體，可以改變腫瘤細胞表面黏附分子的功能和構成，有利于癌細胞的侵襲、轉移和擴散［4］。Vizoso等［5］在直腸癌中的研究表明，CD44v6陽性表達者的復發率和淋巴結轉移率顯著高于陰性表達者和無淋巴轉移者，該研究結果證實了CD44v6的過量表達與人體惡性腫瘤的發生發展、侵襲以及轉移密切相關。Guler等［6］在人喉上皮癌中研究發現，CD44v6在原位癌組織和發育不良組織中高表達，而且患者的預后差，生存期顯著縮短。Koopmen等［7］研究顯示，在宮頸鱗癌組織中，脈管神經浸潤組CD44v6的陽性表達率明顯高于未浸潤組，低分化組中CD44v6的陽性表達率顯著高于高中分化組，提示腫瘤的侵襲和轉移與CD44V6的陽性高表達率密切相關。李霞［8］在子宮頸癌中的研究發現，CD44v6陽性表達的腫瘤較陰性表達者惡性程度高、淋巴結轉移率高、進展快，提示CD44v6的陽性表達程度與癌組織的病期進展及浸潤深度有關，其顯著的陽性表達預示著癌組織容易向周圍組織擴散，具有更強的侵襲和轉移能力。

本實驗結果表明，CD44v6分子在宮頸癌組織中的陽性表達率(82.9%)顯著高于宮頸上皮內瘤變組織(46.7%)及正常宮頸組織(10.0%)，差異有統計學意義(P＜0.05);在宮頸癌組織中，有淋巴轉移組CD44v6的陽性表達率(96.0%)顯著高于無淋巴轉移組(50%)，差異有統計學意義(P＜0.05)，本實驗研究結果與文獻報道一致。本文認為CD44v6在子宮頸癌組織中的陽性過度表達，促進了宮頸癌細胞的增殖分化，CD44v6分子作為淋巴細胞的歸巢受體，介導了淋巴細胞與血管內皮細胞的結合，使淋巴細胞穿過血管壁回到淋巴組織，從而逃避免疫識別和殺傷，與宮頸癌細胞的侵襲、淋巴結的轉移擴散密切相關。

1 郭亮，張敏，高潔凡.轉移相關基因蛋白CD44v6和nm23-H1在宮頸病變中的表達及意義.河北醫藥，2009，31:911-913.

2 王繁，呂杰強.CD44v6和Ezrin在子宮內膜癌中的研究進展.實用腫瘤學雜志，2008，22:398-400.

3 Zhang JC，Wang ZR，Cheng YJ，et al.Expression of tumors and corresponding lumph nod metastases of colorectal carcinoma with dukes stage Cord world.J Gastroenterol，2003，9:1482.

4 Ontgomery E，Abraham SC.CD44 loss in gastric stromal tumors as a prognostic marker.Am J Surg Pathal，2004，28:168-177.

5 Vizoso FJ，Femandez JC，Corte MD，et al.Expression and clinical significance CD44v5 and CD44v6 in respectable Colorectal cancer.J Cancer Clin Oncol，2004，130:679-684.

6 Guler G，Sarac S，Uner A，et al.Prognostic value of CD44 Variant 6 in laryngeale pidermoid carcinomas.Arch Otolaryngol Head Neck Surg，2002，128:393-397.

7 Koopmen G，Heider KH，Horst E，et al.Activated human lymphocytes and aggressive non-Hodykin’s lymphomas express ahomdogne of the rat metastasis-associated variant of CD44.J Exp Med，1993，177:897.

8 李霞.CD44V6與子宮頸癌預后關系的研究.實用腫瘤雜志，2004，19:51.